[生物—选修1：生物技术实践]

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入________制成选择培养基进行分离。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________，常用________法统计样品中活菌的数量，统计结果一般用培养基中出现的菌落数表示。统计培养液中微生物（如酵母菌）的数量还可采用________的方法，用血细胞计数板计数。

（3）橘皮压榨后得到的糊状液体除去其中的固体物后获得乳状液，从乳状液中分离得到芳香油，要加入无水硫酸钠，其作用是________。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是________。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的蛋白酶分解。最终使________含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入      制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是       。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是            。

（3）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在     期，花药培养成功率高。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是                ；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是                 。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的         分解。最终使         含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

（6）血红蛋白的分离一般采用法和电泳法，前一种分离方法是根据来分离蛋白质。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用___________法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__________催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

【生物—选修1：生物技术实验】

研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

请回答下列有关的问题：

（1）鉴定尿素分解菌需在培养基中加入        指示剂。纤维素分解菌的筛选方法                              

（2）制作泡菜时，所用盐水使用前，盐水需要         。为了缩短制作时间，有人还会在盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是         。

（3）在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是                                。

（4）水中蒸馏的方法对于有些原料不适用。这是因为水中蒸馏会导致                   、和                 等问题。

（5）萃取的效率主要取决于                     和                ，同时还要受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。

A[选修l：生物技术实践]

请回答下列问题：

(1)从土壤中筛选纤维素分解菌时，需要在培养基中加入的特殊染料是________。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是___________________________________________________________。

(2)制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是___________。从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是______________。

(3)腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是______ __。豆腐发酵主要利用了微生物产生的_____________，通过发酵，豆腐中营养物质的种类增多，且更易于消化和吸收。

(4)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，为了提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用______浸泡，浸泡时间为10h以上，这样压榨时不会滑脱。

(5)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用花药离体培养技术大量繁殖，则应选择花粉发育至_______期的花药培养成功率最高。

B[选修3：现代生物科技专题]

图示方案为人们获得生物新品种的过程，请回答下列问题：

方案I、抗冻蛋白基因烟草细胞→抗冻烟草

方案Ⅱ、A基因全免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体

方案III、人的生长激素基因牛的受精卵→早期胚胎受体母牛→转基因牛

(1)基因工程的核心步骤是_________。农杆菌上转化法中，根据农杆菌的特点，如果将抗冻蛋白基因插入到_________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中____________上。

(2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________，请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则_____________。   

(3)方案III中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定一般是取处于______时期的______细胞进行检测。

[生物——选修1：生物技术实践]

回答下列有关“生物特定成分提取与分离”的问题：

（1）通常利用DNA与蛋白质等其他成分在不同浓度的________溶液中溶解度不同对DNA粗提取，再利用DNA在酒精溶液中溶解度远远________（填“低于”或“高于”）蛋白质等而对DNA进一步分离。若进一步提取的DNA不是白色丝状，说明________。

（2）玫瑰精油化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，可用________法提取，要提高产品质量，应采取的措施是________。

（3）从分解纤维素细菌中提取出的产物中含有多种蛋白质，纯化得到纤维素酶常用的方法是________。要判断纯化的纤维素酶是否达到要求，常通过________对纤维素酶进行纯度鉴定，对进行完纯度鉴定的纤维素酶要检测________，以便更好地将酶用于生产实践。

[选修模块1：生物技术实践]

请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：

（1）植物芳香油的提取可采用的方法有________、________和________。

（2）芳香油溶解性的特点是不溶于_________，易溶于__________，因此可用_________作为提取剂来提取芳香油。

（3）橘子皮中含有大量的______________和水分，如果直接压榨，出油率较低。提取时往往选用新鲜的材料，理由是_______________________。

（4）对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是_____。

（5）得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的_______层，原因是_________________________。加入氯化钠的作用是____________________。

（6）从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，此试剂的作用是_________________________________________。

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用              染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用                         （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以                         为碳源的固体培养基进行培养。

（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用                 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用                    法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，          ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕            ℃设计后续实验。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等，流程如下：

(1)某同学设计了从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。最好选择　　　　　　　　　　环境采集土样。配制培养基时，各种成分在分装前必须进行　　　 　   　，接种前要进行　　　    　　。在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在无菌条件下进行。在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是　　　　　　　。

(2)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基中加入　　　　　，将筛选获得的菌液稀释后用　　　　　      法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生  　    　的菌落作为菌种进行进一步的扩大培养。

(3)玉米胚芽油不易挥发，宜选用萃取法或         法从玉米胚芽中提取。