（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用              染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用                         （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以                         为碳源的固体培养基进行培养。

（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用                 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用                    法进行计数。

（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，          ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕            ℃设计后续实验。

 玉米（2N=20）是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油等产品。下面图甲表示玉米深加工流程，图乙表示为了获得玉米新品种常采用的一种育种方式，请回答下列问题。

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　
（1）玉米秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母菌利用，纤维素酶是由3种组分组成的复合酶，其中的________可将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素分解菌能合成纤维素酶，人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌。分离纤维素分解菌常用的方法是_________；其实验流程是：土壤取样→选择培养→____   __→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。

（2）使用选择培养基从土壤中分离纤维素分解菌，对培养基的要求是_____________。如果还要对土壤中该类微生物进行计数，则接种方法是_________________________。

（3）玉米胚芽油不易挥发，宜选用压榨法或________法从玉米胚芽中提取。

（4）在育种过程中，若改变图乙‚过程所使用的培养基中的____________________，则可能不会形成愈伤组织，而是形成胚状体。若愈伤组织没有形成根，但分化了芽，其原因可能是____________________

40【生物—选修3：现代生物科技专题】 (15分)

2015年，屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产量低，价格高。基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路。科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，偶然发现一株高产植株。通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。

（1）提取了高产植株的全部DNA后，要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术，该技术的原理是____________。

（2）如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段，用该双链cDNA进行PCR扩增，进行了30个循环后，理论上可以产生约为__________个DNA分子，该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做青蒿的________________,获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列___________（填“相同”或“不同”）。

（3）将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体，图l、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答：

用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是___________ ，构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子，启动子是__________识别结合位点。

（4）检测目的基因是否表达出相应蛋白质，应采取____________技术。目的基因导入组织细胞后，通过                      技术培育出青蒿幼苗。