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          50条信息

            • 1.
              PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程.下列说法错误的是(  )
              A.甲过程高温使DNA变性解旋,该过程不需要解旋酶的作用
              B.丙过程用到的酶在高温下失活,因此在PCR扩增时需要再添加
              C.如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,循环3次后,在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%
              D.PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变
            • 2.
              以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图.据图分析,下列说法正确的是(  )
              A.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶,都能耐高温
              B.催化①过程的酶是RNA聚合酶
              C.④过程发生的变化是引物与单链DNA结合
              D.如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%,则一个双链DNA中,A与U之和也占该DNA碱基含量的40%
            • 3.
              下列关于PCR的描述中,正确的是(  )
              ①PCR是一种酶促反应         ②引物决定了扩增的特异性 
              ③扩增DNA利用了热变性的原理  ④扩增的对象是氨基酸序列.
              A.①②④
              B.②③④
              C.①③④
              D.①②③
            • 4.
              在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:

              (1)在PCR中先用95℃高温处理的目的是 ______ ;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过 ______ 实现的。
              (2)在PCR技术中所需要的引物实质上是一种 ______ ,在相应的橫线上写出引物Ⅱ ______ 。
              (3)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA: ______ (写出①、②中的一种即可)。
              (4)若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入 ______ 个引物。
              (5)在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是 ______ 。
            • 5.
              已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.

              请回答:
              (1)①代表的是______过程.为获得A基因表达载体,需用______酶对A基因和运载体进行切割.将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是______.
              (2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是______,加入引物的作用是______.
              (3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制______等条件.
              (4)过程③采用的技术是______,获得的X叫______ 细胞.
            • 6.
              研究人员将人工丝蛋白基因导入到蚕卵内,对蚕卵的基因改造获得成功.含有人工丝蛋白的蚕茧发出绿色荧光,比正常的蚕茧更加轻薄.请回答下列问题:
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.将人工丝蛋白基因导入到蚕卵体内,常用的方法是 ______ .
              (2)绿色荧光蛋白基因可以作为 ______ ,用于鉴别和筛选蚕卵中是否含有人工丝蛋白基因.
              (3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导人家蚕细胞.PCR技术利用的原理是 ______ ,该PCR 反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、 ______ 和 ______ .
              (4)生物反应器培养家香细胞时会产生接触抑制,所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器 中,这样可以通过 ______ 来增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
            • 7.

              人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

              (1)为获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取mRNA合成_________,然后以此为模板,采用___________________扩增HSA基因。

              (2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是______________________。

              (3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是________________________________________________________________________。

              (4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径Ⅱ相比,选择途径Ⅰ获取rHSA的优势是___________________________________。

              (5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与________的生物学功能一致。

            • 8.

              PCR技术是把某一DNA片段在酶的作用下,在体外合成许多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段;电泳技术则是在外电场作用下,利用分子携带的净电荷不同,把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术,利用它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质作亲子鉴定。图中是电泳装置及相应电泳结果。

              (1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增,依据的原理是______________________。PCR实验步骤主要包括_________________________。

              (2)图3是把含21个氨基酸的多肽进行水解,得到的氨基酸混合物进行电泳的结果,据图可推知该多肽由______种氨基酸构成。

              (3)图4通过提取某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA,分别由酶处理后,生成含有若干DNA片段,并进行扩增得到的混合物,然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱。请分析:F1~F4中,谁是该小孩真正生物学上的父亲?______________为什么?_______________________________________________________________________。

              (4)电泳过程中分子的迁移速率除了与本身所带的净电荷的多少有关外,你认为还与什么因素有关?(至少列出一种)________________________________________________________。

            • 9. 下列有关PCR过程的叙述正确的是(  )
              A.变性过程中破坏的是DNA分子内磷酸二酯键
              B.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
              C.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
              D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度相同
            • 10.

              含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶,这两种酶对DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰,使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题:

              (1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是从_________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是____________________。(填字母A:基因组文库、B:cDNA文库、C:基因组文库和cDNA文库)。

              (2)含有某种限制酶的细胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破坏细胞自身的DNA,其原因可能有①______________;②___________。

              (3)利用PCR技术扩增目的基因的过程由高温变性(90~95℃)、低温复性(55~60℃)、适温延伸(70~75℃)三个步骤构成一个循环,为使得DNA聚合酶能够重复利用,选用的酶应在____________℃处理后仍然具备催化活性。

              (4)在PCR扩增目的基因时,为实现序列中的腺嘌呤被放射性同位素标记,反应体系中添加的原料应包括碱基已被标记的____________(填"腺嘌呤核糖核苷酸"、"dATP"或"ATP")。

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