“DNA的粗提取与鉴定”实验中，A、B、C、D、E五个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均相同，而且正确，但实验结果却不同。

(1)实验材料选择错误的组别是__________。

(2)E实验过程中第一次所用NaCl溶液的浓度是___________

(3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是___________；蓝色较淡的是____________，其中原因是__________________________。

(4)B组实验不成功的最主要原因是________________________。

(5)DNA在2 mol／LNaCl的溶液中溶解度比0.14mol／L NaCl溶液中__________

了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA，科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物）、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性）、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果，主要实验步骤和相关检测结果如下，其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇，蛋白质等溶于氯仿-异戊醇。分析回答：

①将液氮冷冻的组织研磨成粉末

            ↓

②分别用A、B、C三种不同方法处理

            ↓

③DNA粗提液在65℃水浴保温60min，搅拌均匀

            ↓

④加氯仿-异戊醇，离心取____________？，加冷酒精，收集沉淀

            ↓

⑤加入RNA酶，37℃水浴保温20min，重复步骤④

            ↓

⑥将沉淀室温干燥后，溶于超纯水中，-20℃保存备用

结果检测

③得率是指每毫克组织所提取的DNA量。

(1)本实验不选择哺乳动物血液为实验材料的原因是_________________________．

（2）步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是_________________。步骤④“? ”表示__________________________。步骤⑤中加RNA酶的作用是_______________。

（3）影响DNA纯度的物质主要有______________。提取的DNA中RNA残留较多的方法是______________。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高，原因是______________。

某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后，尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验。通过查阅资料，制订了以下的实验方案：

【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定

【实验目的】1．从酵母中提取RNA；2．鉴定RNA。

【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料，其中以酵母尤为理想，因为酵母核酸中主要是RNA，DNA很少，菌体易收集，RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醚。利用稀碱法（稀碱能使细胞壁溶解）或高盐法（高浓度的盐改变细胞膜的通透性）来释放RNA。RNA水解液（加硫酸、加热）+苔黑酚-FeCl₃试剂加热直到沸腾1分钟，会呈现墨绿色。

【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等；0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl₃试剂等。

【实验步骤】

①称6克干酵母

②加0.2%氢氧化钠45mL，沸水加热20分钟，搅拌，后加乙酸7滴

③离心10分钟后取上清液

④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟

⑤离心后先用95%乙醇洗两次，再用无水乙醚洗两次

⑥获得RNA粗制品

⑦RNA鉴定

请根据实验方案，思考并回答下列问题：

（1）酵母菌细胞中含有RNA的结构有细胞核、     、       和       。酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料，理由是             。

（2）实验步骤⑤中，离心后取     用乙醇、无水乙醚进行洗涤。

（3）RNA提取过程要注意温度的控制，在20～70℃的温度范围内停留的时间不能太长，其原因是     ，

（4）稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的，一是     ，二是     ，以便获得更多更纯净的RNA。

（5）若用花椰菜来提取DNA，可用       瓦解细胞膜，然后充分研磨，实验中研磨速度要     。

[生物—选修3现代生物科技专题]

阅读如下资料：

资料甲：试管婴儿技术是指采用人工方法将卵子与精子从人体内取出并在体外受精，发育成胚胎后，再移植回母体子宫内，以达到受孕目的一种技术。

资料乙：干扰素α—1b是我国第一个批准生产的基因工程药物，该药物利用大肠杆菌作为受体获得，具有抗病毒、抑制肿瘤细胞增生、调节人体免疫功能的作用，广泛用于病毒性疾病和多种肿瘤的治疗，是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤生物治疗的主要药物。

资料丙：DNA的粗提取的原理就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分；可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，鉴定DNA的存在。

回答下列问题：

（1）资料甲：顺利受精必须满足两个条件：来自父方的精子要进行________，来自母方的卵母细胞要培养至________。

（2）资料乙：为使干扰素基因在大肠杆菌细胞内表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。

（3）资料丙：在DNA的析出与鉴定步骤中，析出DNA时应将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的________（写出体积分数），静置后溶液中会析出DNA。鉴定时所用的试剂为________。

生物兴趣小组以苹果为材料开展细胞中DNA含量测定研究，主要实验流程如下图，其中SDS（十二烷基硫酸钠）具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性等作用，苯酚和氯仿不溶或微溶于水，它们的密度均大水。请分析回答：

（1）步骤①中苹果组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是      .在常温条件下,也可向切碎的组织材料中加入一定量的     ,再进行充分搅拌和研磨。

（2）根据实验流程可推知，步骤③、④所依据的原理是      。

（3）步骤⑤加入2～3倍体积的95%乙醇的目的是       。

（4）下面是某同学设计的DNA鉴定实验的主要步骤：

①取1支20mL试管，向其中先后加入2mol·L^-1的NaCl溶液5mL和少量絮状DNA沉淀，用玻棒搅拌使其溶解。

②向试管中加入4mL二苯胺试剂，混匀后将试管置于50～60℃水浴中加热5min，待试管冷却后，观察溶液是否变蓝。

请指出上面实验步骤中的两个错误：       、         。

（5）兴趣小组成员还以同种苹果的不同组织器官为材料,测定不同组织细胞中DNA的含量，结果如下表（表中数值为每克生物材料干重中DNA含量）：

试从细胞分裂的角度，解释不同生物材料中DNA含量差异明显的原因           。

（1）在实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是 （    )

A．稀释血液、冲洗样品

B．使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出

C．使血细胞破裂、增大DNA溶解量

D．使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA。

（2）生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若它们按实验要求完成实验步骤后，结果是很难提取到DNA，原因是______________________________。

（3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液浓度是_______________时，DNA的溶解度最小。

（4）DNA的析出和鉴定时，析出DNA时应将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的______________（写出体积分数），静置后溶液中将析出DNA。鉴定时所用的试剂为______________。

43、萝卜贮藏根组织细胞中是否存在蛋白质和DNA？某生物小组对此进行了研究。他们查阅了有关资料得知：①蛋白质在lO％NaCl溶液中可沉淀析出；②在蛋白质溶液中，加入双缩脲试剂，溶液呈现特有的颜色；③DNA溶于10％NaCl溶液，但在95％酒精中呈白色絮状沉淀析出。请你根据所提供的条件参与实验设计并回答问题：

实验材料：白萝卜。

实验用具：粉碎机、烧杯、漏斗、试管、滤纸、玻棒、镊子、载玻片、天平、纱布。

实验药品及试剂：蒸馏水、NaCl、95％酒精、甲基绿染液、双缩脲试剂、蛋白质标准样品。

(1)材料处理：称取50 g             洗净切块，加水30 mL，用粉碎机粉碎，将匀浆经纱布过滤。

(2)提取：①向经纱布过滤得到的滤液中加入                 直至沉淀析出。经滤纸过滤，将滤纸上的沉淀物放入试管中，加入1mL蒸馏水，振荡，用于           鉴定。②除去蛋白质的滤液中，加入        ，用玻棒轻轻搅拌，有白色絮状沉淀产生。经滤纸过滤，用镊子将滤纸上的絮状沉淀置于载玻片，用于             鉴定。

(3)鉴定及结果：

①在用于蛋白质鉴定的试管中，加入双缩脲试剂产生紫色反应；说明                             

②在用于DNA鉴定的载玻片上，滴加             染液，白色絮状沉淀呈现蓝绿色， 说明                                 。

③通过对白萝卜贮藏根匀浆液的检测，说明                               。

32.真核生物细胞内，大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起，难以分离。生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究。下图是根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线，请据图分析：

（1）分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法，如图是从各种物质之间________的差异角度开展研究：

a、取鸡血细胞悬液10ml，加蒸馏水20ml，同时用玻璃棒________（填“轻轻搅拌”或填“快速搅拌”）。过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中。

b、沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻棒沿一个方向________（填“轻轻搅拌”或填“快速搅拌”），同时不断收集析出的物质。

c、如果只要收集纤维蛋白，可采取的措施是________。

d、先用饱和度40%的硫酸铵溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白， 再在饱和度约为________的硫酸铵溶液中析出DNA（既保证DNA提取量较大又避免其他杂质过多），与此同时析出的物质还有________。

（2）如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的两种办法有：

将DNA与球蛋白的混合物加入到________中，收集再次析出物；用________处理溶有DNA与蛋白质的溶液。

（1）本实验材料选用鸡血细胞液而不用鸡的全血，主要原因是由于鸡血细胞液中含有较高含量的              。

（2）图A中加入蒸馏水的目的是                              。

 （3）通过图B所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是                        。并在坐标系内画出DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的变化的图像

（4）图C所示加入蒸馏水的目的是                        。

（5）为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可用       试剂进行检验，颜色反应为        色。

某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后，尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验。通过查阅资料，制订了以下的实验方案：

【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定

【实验目的】1．从酵母中提取RNA；2．鉴定RNA。

【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料，其中以酵母尤为理想，因为酵母核酸中主要是RNA，DNA很少，菌体易收集，RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醚。利用稀碱法（稀碱能使细胞壁溶解）或高盐法（高浓度的盐改变细胞膜的通透性）来释放RNA。RNA水解液（加硫酸、加热）+苔黑酚-FeCl₃试剂加热直到沸腾1分钟，会呈现墨绿色。

【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等；0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl₃试剂等。

【实验步骤】

①称6克干酵母

②加0.2%氢氧化钠45mL，沸水加热20分钟，搅拌，后加乙酸7滴

③离心10分钟后取上清液

④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟

⑤离心后先用95%乙醇洗两次，再用无水乙醚洗两次

⑥获得RNA粗制品

⑦RNA鉴定

请根据实验方案，思考并回答下列问题：

（1）酵母菌细胞中含有RNA的结构有细胞核、     、       和       。酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料，理由是             。

（2）实验步骤⑤中，离心后取     用乙醇、无水乙醚进行洗涤。

（3）RNA提取过程要注意温度的控制，在20～70℃的温度范围内停留的时间不能太长，其原因是     ，

（4）稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的，一是     ，二是     ，以便获得更多更纯净的RNA。

（5）若用花椰菜来提取DNA，可用       瓦解细胞膜，然后充分研磨，实验中研磨速度要     。