某校课外兴趣小组同学以未成熟香蕉（绿色）和成熟香蕉（黄色）为实验材料，进行了相关探究实验（如图）。请回答下列问题：

（1）过程①中加入无水乙醇的作用是________。纸层析法分离两种果皮中的色素后，两个滤纸条上共有的色素带的颜色最可能是________。

（2）通过过程②获得的果肉提取液用斐林试剂检测，与未成熟香蕉相比，成熟香蕉果肉提取液中砖红色沉淀更多，说明其中还原糖含量较高，分析其原因________。

（3）过程③如需提取果肉细胞中的DNA，是提取出了果肉细胞中________DNA，经过溶解、研磨，再进行充分地搅拌和研磨进行分离。该提取方法主要实验思路是将DNA和另一种有机物________分离开。

（4）生产实践中，过程④通常将未成熟香蕉在一定浓度的________溶液中浸泡1min后取出催熟。研究表明，香蕉成熟过程中必须经过一个呼吸速率急剧上升，达到高峰后又急剧下降的阶段。因此，为保证香蕉的品质，催熟时应注意________。

某校课外兴趣小组同学以未成熟香蕉（绿色）和成熟香蕉（黄色）为实验材料，进行了相关探究实验（如下图）。请回答下列问题：

（1）过程①中加入无水乙醇的作用是            。纸层析法分离两种果皮中的色素后，两个滤纸条上共有的色素带的颜色最可能是               。

（2）通过过程②获得的果肉提取液用斐林试剂检测，与未成熟香蕉相比，成熟香蕉果肉提取液中砖红色沉淀更多，说明其中还原糖含量较高，分析其原因                。

（3）过程③需加入食盐和              ，再进行充分地搅拌和研磨。若要进一步探究一定量的果肉与食盐用量的最佳比例，主要实验思路是           。

（4）生产实践中，过程④通常将未成熟香蕉在一定浓度的                 溶液中浸泡1min后取出催熟。研究表明，香蕉成熟过程中必须经过一个呼吸速率急剧上升，达到高峰后又急剧下降的阶段。因此，为保证香蕉的品质，催熟时应注意            。

（1）用图甲的装置制作果酒时，在营养充足的条件下，为适当提高果酒生产速率，进气口应先打开后关闭，写出该装置发酵时产生酒精的化学反应式：                     ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是                  。

（2）乙图中加入蒸馏水的目的是                  ，粗提取得到的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解后，与         试剂共热，冷却后可观察到溶液呈蓝色。

（3）丙、丁用于提取和分离血红蛋白，先对样品进行处理要用图丙装置进行       ；丁图装置所示的方法称为           ，底端试管中首先收集到的是相对分子质量较        (大／小)的蛋白质。

（4）如果用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳处理丁实验中获得的蛋白质，蛋白质迁移的取决于            。

Ⅰ、

（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即______和从_______中获取。

（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是cDNA文库中只含有叶细

胞            的基因，而基因组文库中含有该植物的         基因。

（3）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有_____和______颗粒。

Ⅱ、在“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，有同学按书本知识和自己的思路，试做了如下实验，请你判断实验结果。 

（1）他把与柠檬酸钠混合的新鲜血液放在几层纱布上过滤，纱布上最主要的结构是_________。 

（2）他在含有DNA、RNA及蛋白质等的混合物中加入大量的物质的量浓度为2.0 mol/L的氯化钠溶液后，通过搅拌后，放在几层纱布上过滤，他得到的滤液中一定含有实验目的中需要提取的成分是_________。 

（3）他在上述滤液中加入冷酒精（体积分数为95%），并用玻璃棒向一个方向搅拌，溶液中的丝状物的主要成分是_________。 

（4）他把含有DNA、RNA、蛋白质与氯化钠的混合溶液稀释成物质的量浓度为0.14 mol/L的氯化钠溶液后，放在几层纱布上过滤，他得到的滤液中含量最多的成分是______。

29. （9分）临床上常常利用血液中DNA进行身份鉴定、基因诊断等，但血液中DNA含量少、不易提取。为了从血液中获取更多的DNA，科研人员以大鼠血液为材料，尝试比较两种提取DNA的方法，主要操作如下：

实验结果（表中OD260反映溶液中核酸的浓度，OD280反映溶液中蛋白质或氨基酸的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8）：

试回答下列问题：

（1）补全相关实验步骤：①        ，②       。

（2）实验中 利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是                            。

（3）与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的DNA总是很少，这是因为        。

（4）两种方法中OD₂₆₀/OD₂₈₀均低于1.8，主要原因是       ；其中方法A的OD₂₆₀/OD₂₈₀更接近1.8，原因是                。

（5）根据实验结果，从人血液中提取DNA时应优先选择方法        （“A”、“B”）。

如图甲为细胞中某一结构的模式图，图乙表示图甲中3的成分及其各级结构。据图回答下列问题。

 (1)图甲所示结构为________的亚显微结构。图甲中1所示的结构由________层磷脂分子构成。

(2)图甲中2所示结构是________，代谢旺盛的细胞中该结构数目多。

(3)细胞有丝分裂过程中出现周期性变化的结构是__________________(用数字表示)。

(4)图乙中①控制②的合成，①是________分子，鉴定的试剂为____________，鉴定②的试剂为____________。

(5)图乙中④转化成③发生在细胞有丝分裂的________期。遗传物质呈④状态时，不能发生DNA分子转录的原因是____________________________________________________。

(6)图乙中①在动物细胞中除了在④上外，还分布在________________中。

    下图表示的是“DNA的粗提取和鉴定”实验的实验步骤。请回答下列问题：

（1）取鸡血时，需要在容器中加入一定量的柠檬酸钠，目的是              。

（2）步骤①和步骤⑤中加蒸馏水的目的分别是               和             。

（3）步骤⑥应该弃去的是        ，步骤⑧加入冷酒精的作用是               。

（4）如果步骤⑩中的A试管加入含DNA的NaCl溶液和二苯胺，则B试管中加入的是

                                      。A试管的现象是                     。

40【生物——选修3：现代生物科技专题】（15）

    EPSPS是叶绿体中的一种酶，它能催化芳香族氨基酸的合成；草甘膦是一种除草剂，它能竞争性抑制EPSPS的作用，而使植物死亡，科学家将EPSPS基因转入大豆，使其在大豆细胞表达更多的EPSPS。下图为转基因大豆在研发过程中步骤和转化过程如图所示，回答相关问题：

（1）EPSPS基因导入大豆细胞的方法是                        。

（2）EPSPS基因应转移至土壤农杆菌的            ，将重组质粒导入土壤农杆菌时，一般要用         处理土壤农杆菌。然后在一定条件下将外植体接种在含              培养基上培养，EPSPS基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。

（3）将上述过程获得的外植体接种在含            的培养基中培养形成抗性外植体，经过               形成愈伤组织。

（4）可用                方法测定EPSPS基因是否整合到大豆基因组中；如何检测转基因植株是否具有抗药性状                             。

【步骤一】称取 30g菜花，去梗取花，切碎。

【步骤二】将碎菜花放入研钵中，倒入10mL研磨液，充分研磨10min。

【步骤三】在漏斗中垫上滤纸，将菜花研磨液过滤到烧杯中。在冰箱中放置几分钟，取上清液。

【步骤四】将一倍体积的上清液倒入等体积的某溶液中，并用玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液。将絮状物缠绕在玻璃棒上。

请回答下列问题：

(1)请指出并改正该同学实验操作中的一处错误：  ▲  。

(2)【步骤二】的目的是使菜花细胞破碎，释放DNA，加入研磨液的主要成分有  ▲  和  ▲  等。

(3)如要使【步骤三】中所得上清液杂质减少，可进行  ▲  操作后再置于冰箱。

(4)【步骤四】中所用等体积的某溶液为  ▲  ，需“缓缓、轻轻地”搅拌溶液的原因是  ▲  。

(5)简要说明鉴定【步骤四】所得丝状物是DNA的基本实验设计思路：  ▲  。

（1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用__________。

（2）Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。

①Taq DNA聚合酶的功能是催化脱氧核苷酸之间形成____________________。

②Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用________法和__________法进行分离。

（3）相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。

①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是____________、_____________。

②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？为什么？__________________。

（4）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在________________中才能进行，并且要严格控制________条件。

（5）PCR中加入的引物有____________种，加入引物的作用是作为______________________的起点。

(1)步骤①中苹果组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是________。在常温条件下，也可向切碎的组织材料中加入一定量的________，再进行充分搅拌和研磨。

(2)根据实验流程可推知，步骤③、④所依据的原理是________。

(3)步骤⑤加入2～3倍体积的95％乙醇的目的是________。

(4)下面是某同学设计的DNA鉴定实验的主要步骤：

①取1支20mL试管，向其中先后加入2mol·L^-1的NaCl溶液5mL和少量絮状DNA沉淀，用玻棒搅拌使其溶解。

②向试管中加入4mL二苯胺试剂，混匀后将试管置于50～60℃水浴中加热5min，待试管冷却后，观察溶液是否变蓝。

请指出上面实验步骤中的两个错误：________、________。

(5)兴趣小组成员还以同种苹果的不同组织器官为材料，测定不同组织细胞中DNA的含量，结果如下表(表中数值为每克生物材料干重中DNA含量)：

试从细胞分裂的角度，解释不同生物材料中DNA含量差异明显的原因________。