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          50条信息

            • 1.
              研究人员利用小鼠(2N=40)的单倍体ES细胞(只有一个染色体组),成功培育出转基因小鼠,其主要技术流程如图所示:

              注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶,箭头指向的位置为限制酶的切割位置;Amp′是氨苄青霉素抗性基因,Neo′是G418抗性基因.
              (1)重组质粒上的抗生素抗性基因可作为 ______ ,其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞,氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞,而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo′的小鼠细胞,结合如图推测,过程①选用的2种限制酶是 ______ (选填图中的编号),图中③处的培养液应添加 ______ (填“氨苄青霉素”或“G418”).
              (2)若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是,则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是 ______ ,此时,图中过程②应选用 ______ (填“E•coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”).
              (3)据图分析,细胞乙内除线粒体DNA外,还有 ______ 个DNA分子;细胞乙发育成桑椹胚的过程中细胞分裂方式是 ______ ,将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为 ______ 技术.
            • 2. ④中的尿糖试纸上含有过氧化氢酶和           

              A.淀粉酶       B.脂肪酶      C.纤维素酶    D.葡萄糖氧化酶

            • 3. 医学上还利用生物工程技术将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合,融合后细胞经培养可产生单克隆抗体,其理论依据有             。(填编号)

              ①骨髓瘤细胞可以产生抗体,但不能无限增殖

              ②骨髓瘤细胞可以无限增殖,但不能产生抗体

              ③B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖

              ④B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合才能产生抗体

            • 4. 基因工程的第四步是筛选出导入重组质粒的受体细胞。

              (1)如用大肠杆菌作为受体细胞,则该大肠杆菌中不应含有青霉素抗性基因,请阐述其原因?                                   

              (2)培养导入了重组质粒的大肠杆菌时,需配制培养基。该培养基除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入的物质有(    )(多选)

              A.细胞分裂素 B.琼脂 C.噬菌体 D.青霉素 

              (3)培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是         ;一般对配制的培养液采用

                       法灭菌。

              (4)微生物接种培养时,可采用两种方法。下图为接种后微生物培养的效果图,那么,获得图A效果的接种方法是______________,获得图B效果的接种方法是_____________。

              (5)与大肠杆菌相比,嗜热菌具有的特点是         。(多选)

            • 5.

              I.随着肿瘤增长超过了其血管供应,它的内部会缺氧,缺氧能够诱导肿瘤细胞产生一种特异性的转录因子(即能激活特定基因表达的蛋白质—HIF—1),进而促进血管生成。科学家为了探究HIF—1的作用,进行了相关实验,结果如下表,分析并回答问题︰

               

              肿瘤质量(g)

              注射物

              培养9天

              培养21天

              实验鼠

              HIF—1基因缺陷型胚胎干细胞

              0.7

              0.8

              对照鼠

              野生型胚胎干细胞

              1.7

              5.2

              (1)由于肿瘤细胞具有________特点,对营养物质和氧气的需求量较大。在实验过程中可以通过________技术检测HIF—1是否存在,保证实验鼠注入的胚胎干细胞HIF—1基因被成功敲除。

              (2)上表结果表明HIF—1可以________(促进或抑制)肿瘤生长。

              (3)为进一步研究HIF—1作用机理,检测两组鼠血液中血管内皮生长因子(VECF)含量,结果如下表。(注︰VECF是促进血管生成的生长因子)

               

              VECF(p9/ml)

              0天

              4天

              72天

              A组鼠

              25

              25

              50

              100

              B组鼠

              75

              125

              125

              250

              表格中A、B两组鼠中实验组是________组鼠。缺氧情况下,HIF—1可以明显促进________合成,进而促进________生成,增加对肿瘤细胞的快速氧供应,进一步促进肿瘤的生长。

              Ⅱ.目前认为化疗通过多种途径介导细胞凋亡来杀死癌细胞。顺铂是常用的化疗药物,但癌细胞易产生顺铂耐药;双氢青蒿素也具有抗癌作用。为研究双氢青蒿素对顺铂耐药性的影响及其机制,研究者进行了如下实验。

              (1)本实验选用患者的耐顺铂肺腺癌细胞。在________培养箱中进行恒温培养,培养液中除抗生素和一般营养物质外还应含有________,此外培养液中加入一定浓度顺铂,目的是_______________________________________________________________________。

              (2)将上述培养的细胞分为对照组和实验组。实验组用二甲基亚砜溶解的双氢青蒿素处理,对照组的处理应为________,其它条件相同且适宜。24小时后均换为含1μg/ml顺铂的细胞培养液,培养36小时后收集细胞,观察并测定细胞凋亡率,结果如图一。

               

              对照组

              实验组

              抗凋亡蛋白Bcl—2

              135.2

              93.8

              促凋亡蛋白Bax

              82.6

              114.8

              分析图一结果说明________。

              (3)为进一步揭示双氢青蒿素对顺铂耐药性影响的机制,研究者检测了肺腺癌细胞中与凋亡有关的两种蛋白表达量的相对值,结果如图二。分析图二实验结果,推测双氢青蒿素可能通过________(促进或抑制)Bcl—2基因表达和________(促进或抑制)Bax基因表达,从而逆转顺铂耐药。

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