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            • 1. 野生猕猴桃是一种多年生的富含VC的二倍体(2N=58)小野果。下图是某科研小组以野生猕猴桃种子(aa)为实验材料培育抗虫猕猴桃无子新品种的过程,据图回答:


              (1)各代号表示的育种类型中:①表示________,③表示________。

              (2)③⑦过程用到的药剂是________,原理是______________________________。

              (3)若⑤过程是杂交,产生的AAA植株,其体细胞含染色体数目是________,该植株所结果实无子的原因是____________________。

              (4)⑥过程中用到的工具酶是____________________________。AAA的细胞成功接受抗虫基因B后,经植物组织培养产生幼苗,移栽后长成AAAB的抗虫新品种植株,这种变异属于________。

            • 2.

              绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV,蛋白,叶片对TMV具有抗感染性。烟草是具有重要经济价值的双子叶植物,由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如下图所示。

              (1)理论上,基因组文库含有生物的________________基因;而cDNA文库中含有生物的________________基因。

              (2)科学家从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中①过程表示____________。

              (3)基因工程最核心的步骤是____________,④过程将重组Ti质粒导入烟草体细胞的常用方法____________。

              (4)由图分析,在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是____________基因,它的作用是____________。

              (5)过程⑥可采取____________的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过____________的方法来确定植株是否具有抗性。

            • 3.

              假设A、b代表玉米的优良基因,这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种,为培育出优良品种AAbb,可采用的方法如图所示:

              (1)由①→⑤→⑥的育种方法的原理是_________,该育种方法的优点是_________。

              (2)由①→②→③的育种方法虽然育种时间长,但是可以将多种优良性状集中在一个生物体身上,③步骤具体的操作方法是__________________。

              (3)⑦育种方法往往不一定能达到目标,原因是__________________________。

              (4)④过程必需要用到的一种特异性的工具酶是_____________________。

            • 4.

              回答下列(一)、(二)小题:

              (一)天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。

              (1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度,这是因为酶         

              (2)在酒精发酵阶段,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高        的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。若在酒精发酵环节中温度过低,带来的弊端是           

              (3)在醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵30天。工艺如图2:

              ①发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如图3。据图2、3分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是         ,由此推测,影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是        (至少答出两项)。

              ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵缸中         (答出什么时期的什么层)的醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。

              ③成熟醋醅中乳酸菌的种类、数量均明显减少,主要原因可能是        

              (二)如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程,请据图回答下列问题。

              (1)克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比,特有的技术手段是       ,动物的这两种繁殖类型,实质性的区别在于后者仍是        

              (2)对供体母牛做超数排卵处理时,一般可采用         激素。

              (3)如果要培育能产生某种药用蛋白的转基因荷斯坦奶牛,可采用具体的          技术将目的基因导入到受精卵中,并采用“         ”杂交的方法检测受体细胞中的目的基因是否表达。

              (4)在转基因技术中,常需要对相关DNA的碱基序列进行测序。下图中甲、乙为DNA测序仪显示的图像,已知甲图显示的碱基顺序为TCGAAT,则乙图显示的碱基顺序为(   )

              A.TCGCAC        B.ACCGTG        C.ATTCAG        D.TCCGGA

            • 5.

              下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素(由人垂体细胞产生的一种蛋白质类激素)的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个,且三种酶切割形成的黏性末端各不相同,而Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。请据图回答以下相关问题:

              (1)过程①所用细胞是________________,过程②所用的酶分别是___________________。

              (2)人生长激素基因在经③处理之前需经过PCR扩增,扩增时应在PCR扩增仪中加入_______________________酶用以催化互补链的合成。

              (3)过程④所用的酶是___________________________。

              (4)若用限制酶PstⅠ切割,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上,再将甲培养基上的单个大肠杆菌接种到丙培养基上,待形成12个菌落后,将相应菌落的一部分转接到乙培养基的相同位置上。一段时间后,菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到培养基乙上能存活的是导入含_____________质粒的大肠杆菌。生产人生长激素的工程菌应从丙培养基的菌落中选取,选取的依据是_____________________。

            • 6.

              如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHI、HindⅢ、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点.据图回答:

              (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用________________(限制酶)同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含__________的培养基上进行。
              (2)过程②代表的生物技术是__________,此技术对供体母牛、代孕牛进行选择后,并用激素进行的处理是_____________。如对囊胚阶段的胚胎进行切割,应注意____________________,以免影响胚胎的恢复和进一步发育。
              (3)若转基因牛的乳汁中不含人乳铁蛋白,根据中心法则分析,其可能的原因是_______________________________。

            • 7.

              豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图,图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子,neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题:

              (1)该培养过程涉及多种现代生物工程技术,属于分子水平的是___________,其原理是______________________。

              (2)PCR过程中,除了要加DNA模板以外,还需加________ 和________,以及所需的酶是_________。温度降低到55℃的目的是__________。

              (3)PSP是______________识别和结合的部位,步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。

              (4)若要获得大量的卵母细胞需要对成年母猪采用___________法以获得大量的卵细胞。

              (5)进行早期胚胎培养时,通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是____________________;另外,需定期更换培养液,目的是___________________。

              (6)步骤⑥中,通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。

              (7)与饲养普通猪相比,饲养转基因猪的优势是____________________________。

            • 8.

              下图表示“华恢l号”抗虫水稻主要培育流程,据图回答:



              (1)杀虫基因(crylA)是根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于______________工程技术范畴。

              (2)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析:



              ①人工改造质粒时,要使抗虫基因能成功表达,还应插入________________。

              ②人工改造质粒时,用限制酶Ⅰ处理,其目的是:第一,去除质粒上的____________(基因),保证T-DNA进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长;第二,使每种限制酶在质粒上只有单一作用位点,有利于__________。第三,使质粒大小合适,可以提高转化效率等。

              ③若用限制酶Ⅱ分别切割经过②过程改造的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子,并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞,观察到的细胞生长的情况是:在含四环素的培养基中____________,含卡那霉素的培养基中______________。

              (3)“华恢l号”抗虫水稻主要培育流程④过程中,需使用的生物技术是__________。要确定杀虫基因(crylA)导入受体细胞后,是否能表达,需进行检测和鉴定,请写出在个体水平上的鉴定过程:________________________________。

            • 9. 绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV蛋白,叶片对TMV具有抗感染性。烟草是重要的经济作物,由于TMV的感染会导致大幅度减产,研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如图所示。

              (1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中过程①表示________________。

              (2)过程③构建重组Ti质粒时,必须使用____________和________________两种工具酶。

              (3)由图分析,在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为____________,重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是________________________。

              (4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加________________________,以保证受体细胞能培养成再生植株。

              (5)过程⑥可采取____________________的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中,可通过____________________的方法来确定植株是否具有抗性。
            • 10.

              假设A、b代表玉米的优良基因,这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种,为培育出优良品种AAbb,可采用的方法如图所示。请据图回答问题:

               (1)由品种AABB、aabb经过①②③过程培育出新品种的育种方式称为____________,其原理是__________。 

              (2)若经过过程②产生的子代总数为1 552株,则其中基因型为AAbb的植株在理论上有________株。基因型为Aabb的植株经过过程③,子代中AAbb与aabb的比例为_________。

               (3)过程⑤常采用________________方法得到Ab个体。与过程①②③的育种方法相比,过程⑤⑥的优势是________________________________。

               (4)过程⑦的育种方式是________,与过程⑦比较,过程④的明显优势是____________。

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