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            • 1. 研究表明毛兰素对肝癌细胞体外分裂和生长有抑制作用,而且随着浓度增加,时间延长,抑制作用加强.根据以下提供的实验材料和用具验证上述结论,请你补充实验思路和预测实验结果.
              材料与用具:人肝癌细胞、细胞培养液、毛兰素、0.1%DMSO溶液(用于配制毛兰素溶液)、培养瓶等.(要求与说明:实验仪器、试剂、用具操作、培养条件、检测活细胞方法等不做具体要求)
              请回答:
              (1)实验思路:
              ①实验分组:
              甲组:细胞培养液+人肝癌细胞+适量低浓度毛兰素溶液
              乙组:细胞培养液+人肝癌细胞+等量高浓度毛兰素溶液
              丙组:细胞培养液+人肝癌细胞+    
              每组设置若干个重复样品.
                  
                  
                  
                  
              (2)以细胞存活率(细胞存活率=实验组活细胞数/对照组活细胞数,对照组细胞存活率为1)为指标,设计一坐标系,预期实验结果;
                  
              (3)人体内癌细胞凋亡     会/不会)引起炎症.
            • 2. “探究”是高中生物学习的重要内容,是以设计实验和进行实验为核心的实践活动.请回答下列问题:
              (1)探究酵母菌在氧气充足条件下不能进行酒精发酵的原因是氧气抑制了酵母菌的无氧呼吸,还是有氧呼吸产生的ATP抑制了酵母菌的无氧呼吸的实验:
              材料用具:锥形瓶、含酵母菌的培养液(试剂1)、酵母菌破碎后经离心处理得到的只含有酵母菌细胞质基质的上清液(试剂2)和只含有酵母菌细胞器的沉淀物(试剂3)、质量分数5%的葡萄糖溶液、ATP溶液、蒸馏水、橡皮管夹若干、其他常用器材和试剂.

              实验步骤:
              ①取锥形瓶等连接成如图1所示的装置三套,依次编号为A、B、C,设定A套为对照组.锥形瓶1中都加入等量的质量分数为10%的NaOH溶液,锥形瓶3中都加入等量的澄清的石灰水.
              ②A装置的锥形瓶2中加入    ;B装置的锥形瓶2中加入10mL试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mL ATP溶液; C装置的锥形瓶2中加入10mL试剂2、10mL质量分数5%的葡萄糖溶液、2mL蒸馏水.
              ③A、B、C三套装置均先持续通入氮气1min,除去锥形瓶中的氧气,再将A、B、C三套装置分别作如下处理:A套持续通入氮气,B套持续通入    ,C套持续通入    
              ④将三套装置放在相同且适宜条件下培养10h.
              ⑤观察    ,判断酵母菌是否进行无氧呼吸.
              (2)探究二氯二乙胺能否抑制癌细胞增殖的实验:
              材料用具:肝部长有肿瘤的小鼠,不同浓度的二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管等.
              实验步骤:
              a.取洁净的培养皿一个,加入适量培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用胰蛋白酶处理,使其分散开来,置于培养皿中培养;
              b.取洁净的试管5支,加入等量培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入    
              c.从培养皿中吸取等量的培养液置于1~5号试管中,振荡后,在适宜条件下培养-段时间;
              d.从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于血球计数板上,在显微镜下计数,记录数据.
              实验分析:
              ①该实验的实验组是    号试管.上述实验步骤d中测量到的数据是否准确,请判断并作出解释:    
              ②另有同学按照正确的方法进行实验,得到如下结果:
              根据以上实验结果,你能得出的结论有:二氯二乙胺能抑制癌细胞增殖,且在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用    
            • 3. 将毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因导入绒山羊,能提高羊绒的质量.
              (1)转基因常用的运载工具除了质粒外,还可以使用    
              (2)为获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊,先将KIFⅡ基因转入羊胎儿皮肤成纤维细胞中,使其结合到细胞核的    上.培养转基因成纤维细胞,培养液需添加    以维持无菌状态.细胞很快的贴附在瓶壁上,称为    .生长到一定阶段,细胞因发生    而停止生长,可使用    处理,然后继续分瓶培养.
              (3)取培养的转基因成纤维细胞注入去核的    ,获得重组细胞,经激活使其分裂发育成早期胚胎.一般情况下,动物早期胚胎培养到    时期,可进行胚胎移植.
            • 4. 血管内皮生长因子(VEGF)是目前发现的诱导肿瘤血管生成的最强烈的血锌生成因子,针对VEGF生产的抗肿瘤药物,是治疗癌症的一个方向;芝加哥大学的Katherine Knight博士成功地在转基因兔中获得骨髄瘤样肿瘤,经技术改进,能高产量地生产兔单克隆抗体:我国江苏省某公司首次在全球成功开发出人源化兔单抗药物“注射用人源化抗VEGF单克隆抗体”(SIM63),有效打破了跨国公司的技术垄断.人源化抗体可以大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应.请回答下列相关问题:
              (1)动物细胞在体外培养的技术属于    工程,由于人们对动物细胞所需的营养物质没有完全搞淸楚,在使用合成培养基时,通常需要加入    等一些天然成分:在培养时除提供细胞所需的O2外,还需要CO2,其作用是    
              (2)在基因工程中,将目的基因导入动物细胞现今极常用、极有效的方法是    ,要在短时间内扩增大量的目的基因采用    技术,这个技术中的关键酶是    
              (3)当VEGF作为抗原进入动物体内时,动物体内的某些B细胞分化为浆细胞,这种浆细胞只分泌针对VEGF的一种抗体,但B细胞在体外培养不会无限增殖,解决这一问题的方法是通过动物细胞融合技术得到杂交瘤细胞,常用的化学诱导融合试剂为    ,要分离出杂交瘤细胞,应该用    培养基进行筛选,单克隆抗体最主要的优点是它的    ,并可大量制备.
            • 5. 在动物细胞培养过程中,下列处理恰当的是(  )
              A.培养液和培养用具要进行无菌处理
              B.提供种类齐全的营养物质
              C.提供纯氧以保证细胞的呼吸作用
              D.保证提供适宜的温度和pH
            • 6. 丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物,其作用机制之一是诱导细胞凋亡.以下是相关的实验研究过程及结果:
              实验材料:人肝癌细胞(HepG2),培养液,W溶液(作为溶剂),用W溶液溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液,培养瓶等.
              步骤如下:
              ①将等量的人肝癌细胞(HepG2)悬液,分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中;将培养瓶放于适宜条件下培养24h,静置、去掉上清液;
              ②_ _ _,再加入等量的培养液,于相同且适宜的条件下继续培养;
              ③培养72h,每24h 用细胞计数仪检测癌细胞数.
              请完善上述实验步骤中相关内容:
              (1)本实验的自变量是    .实验验中,每组细胞培养瓶不止一个,统计后    ,目的是减小误差.
              (2)设对照组癌细胞增殖率为 100%,用下面公式计算各给药组癌细胞增殖率:
              增殖率(% )=[(给药组各时段癌细胞数-给药组开始癌细胞数):(对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数)]×100.得到如表数据:
              表1  丹参酮  对HepG2细胞增殖率的影响%
              组别
               
              培养时间/h 
              244872
              对照组100100100
              100给药组ug/mL0.5
              1.0
              1.5
              78
              68
              48
              62
              26
              12
              48
              21
              5
              通过数据分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是:        
              (3)将培养48h的培养液离心,去除上清液后经过一系列的处理及分析,得到对照组和给药组48h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量如表所示:
              组别G1SG2+M凋亡率baxBcl-2
              对照组55%36%9%5.6%28%53%
              实验组67%24%9%32.6%37%38%
              据此推测,丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于    期.丹参酮可能通过促进HepG2内    的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长.
              (4)顺铂(DDP)是一种DNA损伤药物,也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物.若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响,应还需设置        给药组才能得出结论.
            • 7. 根据生物科学技术有关知识,回答下列问题:
              (1)动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础.动物细胞培养需要提供无菌、无毒环境,因此除了要对培养液和培养用具进行灭菌外,通常还要在培养液中添加一定量的    ,以防培养过程中的污染;采用    方法,防止代谢产物积累对细胞造成危害.
              (2)在基因工程构建基因表达载体时,需要把来自cDNA文库的目的基因片段正确插入到表达载体的        之间.检测目的基因在受体细胞中是否表达,可采用的方法是    杂交.
              (3)应用胚胎工程技术培育“试管牛”,需要经过体外受精、        以及在母体中发育和分娩过程.若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体,则表明    过程已完成.
            • 8. 如图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图,图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图.

              (1)图一所示,制备细胞悬液时,常用    酶来消化剪碎的组织块.配制培养液时,通常需要在合成培养基的基础上添加    等一些天然成分.当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂,这种现象称为细胞的    
              (2)ES细胞是由中分离出来的一类细胞,ES细胞在功能上具有发育的    
              (3)MEF细胞能够分泌某些蛋白质,其合成到分泌至细胞外的过程是:核糖体→    →囊泡→    →囊泡,再通过    方式分泌到细胞外.在培养液中单独培养ES细胞时,ES细胞容易发生分化,结合图二可推知MEF细胞的作用是    
              (4)在治疗性克隆过程中,细胞核取自患者细胞,这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生    反应.
            • 9. 白血病是由于造血干细胞增殖分化异常而引起的恶性增殖性疾病.目前治疗白血病的主要方法是骨髓移植,但骨髓配型的成功率较低,大大限制了白血病的治疗.随着基因工程的日渐兴起,迎来了基因治疗白血病的曙光.请回答下列相关问题:
              (1)骨髓移植必须进行骨髓配型实验,原因是    .目前,临床上通常通过使用    来提高造血干细胞移植的成活率.
              (2)造血干细胞移植之前先要进行培养.动物细胞培养一般分为        两个阶段.对于培养的环境条件,除需要适宜的温度、无菌无毒等以外,还要向培养液中通人氧气和二氧化碳,通人氧气的目的是    ,通人二氧化碳的目的是    ;对子所用的培养液,应定期更换,其目的是    
              (3)在进行细胞移植前,有时需对移植的细胞进行基因改造.要了解基因改造是否成功,可在分子水平上检测是否翻译成了相应的蛋白质,常用的方法是    
              (4)上述使用的正常细胞,通常为    代以内,以保持细胞正常的二倍体核型.
              (5)哺乳动物的胚胎干细胞是从    中分离出来的一类细胞,可以在体外被诱导    形成新的组织细胞,这使科学家进一步培育人造骨髓成为可能.
            • 10. 实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示.下列叙述错误的是(  )
              实验小鼠
              皮肤组织
              皮肤细胞
              培养细胞1
              培养细胞2.
              A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒
              B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化
              C.丙过程得到的细胞大多具有异常二倍体核型
              D.丁过程得到的部分细胞失去贴壁粘附性
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