知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用分别切割和Ti质粒，再用进行连接．
（2）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于的环境，在营养方面最终需在培养基中加入等天然成分．细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C0₂的主要作用是．

难度：中等

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2．（2016•大兴区一模）近年来，癌症等疾病高发，严重影响着人类健康．
（1）海兔素是从黑斑海兔体内分离获得的一种含溴倍半萜，有学者以人肺癌细胞系A549作为体外肿瘤模型，研究了海兔素与TRAIL（肿瘤凋亡诱导因子）对肿瘤细胞的作用．如图1．
①配置动物细胞培养液，同时加入胎牛    ，以满足细胞代谢所需的营养物质及调节因子．
②将A549置于适宜温度条件下培养．待细胞密度达到90%时，加入    ，将细胞分散至单细胞悬液．
③用一定浓度的海兔素、TRAIL处理上述细胞悬液后，采用流式细胞仪计数．
实验中每个浓度的TRAIL处理下都设置了对照，其处理是    ，目的是    ．根据结果可知，在不同条件组合的处理之下，随着处理浓度的增加，A549肿瘤细胞的存活率    ，这表明，海兔素能够    （填“增强”或“减弱”）TRAIL的抗肿瘤作用．
（2）肿瘤细胞往往存在对TRAIL作用的抗性，其主要原因是肿瘤细胞内抗凋亡蛋白基因的高表达．为进一步研究海兔素对TRAIL抗肿瘤作用的机制，研究者又进行了相关实验．
用凝胶电泳方法测定相关蛋白质的含量，结果见图2（β微管蛋白为对照）．结果表明，海兔素可能抑制    ，从而减轻其对TRAIL的抗性．
（3）综上所述，海兔素对于癌症的治疗有一定的效果，且这种作用与    和    呈现出相关性．

难度：中等

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3．（2016•菏泽一模）P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变．科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
（1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用    消化30～40分钟，用培养液制成细胞悬液在培养箱中培养，培养液是模拟了人体    的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素，其目的是    ．
（2）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀．最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞．脂质体在这个操作中的作用是    ．
（3）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成如图所示的生长曲线．请分析曲线    代表转入P53基因的肝癌细胞．

难度：中等

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4．为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养．下列说法正确的是（　　）

A．在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时，也可用胃蛋白酶处理

B．细胞培养过程中加入的O₂和CO₂作用相同

C．甲、乙细胞在持续的原代培养过程中，乙会出现停止增殖的现象

D．仅用该培养液也能用来培养乙肝病毒

难度：中等

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5．为研究双氢青篙素（DHA）对人结肠癌HCT116细胞的作用，科研人员提出以下实验思路：
（1）取HCT116细胞用胰酶消化后，再用含血清的培养液制成细胞悬液，分别接种于4块培养板（一种多孔的细胞培养器具）的培养孔内，置于CO₂培养箱内培养12h．
（2）取出培养板，吸弃培养孔内上清液后向每孔中加入含有不同浓度DHA的培养液（浓度分别为0、125、250、500nmol/L），每个浓度加3个培养孔，置于培养箱内培养．其它培养板也做相同处理．
（3）分别于加药后12、24、48、72h后，各取一块培养板，采用MTT检测法测定各孔内培养液的光吸收值（OD值），计算抑制率[抑制率=（1-
加药组OD
对照组OD
）×100%]．
（说明：MTT，即四唑氮蓝，它能被活细胞线粒体中一种与柠檬酸循环有关的酶还原成不溶于水的蓝紫色结晶，而死细胞中此酶无活性，不能产生蓝紫色结晶．故可经相关处理后测OD值反映细胞存活率和抑制率．）
请回答：
（1）实验目的是：
（2）请设计一张表格用于记录实验时所测得的数据，便于抑制率的计算．
（3）实验中需要控制的无关变量有    （至少写出两个）．每个DHA浓度需加3个培养孔，是为了    ．
（4）若最终的实验结果以坐标图呈现，则纵坐标应标识为    ．

难度：中等

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6．研究人员利用成年鼠嗅粘膜制备的嗅鞘细胞，在添加不同血清浓度下培养并测量其细胞生长（增殖）情况，获得实验结果如图，请据图分析回答：

（1）将获取的嗅粘膜加入0.25%酶液中，用剪刀充分剪碎，并用吸管吹吸多次，该操作的生物学意义是
    ，以便制成嗅粘膜细胞悬液．该过程中，所使用酶液的主要成分是    ．
（2）将获得的嗅粘膜细胞悬液及时离心，将分离获得的嗅粘膜细胞加入适量的培养液，摇匀后再离心获取嗅粘膜细胞，这样操作的意义主要是去除    ，以避免其对嗅粘膜细胞正常的生命活动造成影响．将获得的嗅粘膜细胞用特定培养基置于培养箱内培养．进行原代培养时，细胞增殖的方式是    ．
（3）根据实验可知，当培养液中血清浓度为40%-80%时，随血清浓度升高，对细胞的生长的促进作用表现为    ．据图推测，与40%的血清浓度培养条件相比，10%的血清浓度对细胞生长的促进作用可能表现为    ．

难度：中等

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7．角膜缘干细胞能更新角膜上皮细胞，角膜上皮细胞对维持角膜的透明性至关重要．回答下列问题：
（1）将角膜缘组织剪碎，加入    处理，可获得大量游离分散的细胞．细胞悬液在培养瓶中培养，当贴壁生长的细胞发生    现象时停止增殖．
（2）通常角膜缘干细胞的培养控制在10代以内，原因是    ．
（3）离体培养角膜缘干细胞时，一般需要在合成培养基中加入    等天然成分，培养时所需的气体主要有    ．
（4）研究发现，细胞因子能够调控角膜缘干细胞分化．放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的功能进而抑制细胞因子的调控，由此推断该抑制过程发生在    （选填“复制”、“转录”或“翻译”）水平．
（5）研究还发现，皮肤干细胞可以诱导分化为角膜缘干细胞，这体现了皮肤干细胞具有    ．临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官，从而解决了    问题．

难度：中等

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8．美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛，年产奶量达30.8t，我国奶牛产奶量年平均水平仅为3～4t．某人用该高产奶牛的耳朵细胞，采用核移植技术获得高产奶牛（如下图）．

（1）动物细胞培养的原理是    ，在此过程中为了防止培养液被污染，还需在培养液中添加一定量的    ，此外还应定期    ，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害．
（2）用于核移植的供体细胞，一般都选用    代以内的细胞，采集的卵母细胞也需在体外培养至    期后，再去核．
（3）核移植中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是    ．
（4）将重组胚胎移入代孕母牛子宫内的最佳时期是    ．胚胎移植实质上是    ．

难度：中等

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9．现代生物工程技术推动了免疫学和畜牧业的发展．
（1）制备单克隆抗体需要借助动物细胞融合技术，其过程中与植物不同的方法是使用    诱导，融合细胞首先需要经过    培养获得杂交瘤细胞；还需进行    化培养和抗体检测，经多次筛选，用专一抗体检验呈阳性才可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，再进行体内或体外培养，大量制备单克隆抗体．
（2）对大面积烧伤病人，借助    技术可获取大量自身健康皮肤用于移植．培养的条件需要    、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO₂混合气体（维持培养液的pH）．
（3）用细胞核移植技术繁育良种牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植前需要对受体牛进行    技术处理，对外来胚胎基本不发生    ，为胚胎在受体内的存活提供了可能．

难度：中等

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10．人的内皮抑素（一种蛋白质）能诱导血管内皮细胞凋亡，进而抑制新血管的产生．临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞，使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素，抑制新生血管的形成，使肿瘤细胞进入休眠状态并诱导其凋亡．
回答下列问题：
（1）从肝细胞中提取总mRNA，利用逆转录酶合成    ，根据内皮抑素基因的    设计并合成引物，利用PCR技术得到大量内皮抑素基因．
（2）在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导人受体细胞的过程中，以    作为工具酶，以    作为载体．
（3）在进入临床使用前，需用体外培养的血管内皮细胞进行生理、病理检测．为获得大量的血管内皮细胞，首先用    酶处理血管内皮组织，使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，然后将其放人含    等一些天然成分的合成培养基中培养．
（4）血管内皮细胞被重组腺病毒感染后，若通过    方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性．
（5）临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞，使肿瘤生长受到抑制，这种治疗方法属于    （填“体内”或“体外”）基因治疗．

难度：中等

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