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            • 1. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的    (结构).
              (2)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体.可以根据Rag2基因的    设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.用Hind III和Pst I限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有    酶的酶切位点.
              (3)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的    ,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.
            • 2. 为治疗某种遗传性糖尿病,研究人员完成如图工作.

              (1)图1中①是取自患者体细胞的    
              (2)图1中过程②表示    技术.过程③表示    技术.
              (3)重组细胞在体外培养时,培养液中除了加入诱导物外,还应加入水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、    等必需的营养成分.
              (4)定向诱导使重组细胞B发生    ,从而形成功能专一的胰岛样细胞.为检测胰岛样细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能,研究人员分别控制甲、乙两组培养液中    的浓度,将胰岛样细胞先后放在甲、乙两组培养液中,保温相同时间后检测胰岛素的分泌量.若诱导成功,则图2中甲组应为    情况下测得的胰岛素分泌量,理由是    
            • 3. 如图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程,请据图作答.

              (1)人类“治疗性克隆”属于生物工程中的    技术.
              (2)科学家为何不直接用体细胞进行细胞培养?    
              (3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有    .相同的胚胎干细胞,“克隆”的结果各种各样,如有的是胰岛细胞,有的是血细胞,有的是心肌细胞,究其本质原因是基因    的结果,上述“克隆”过程是建立在胚胎干细胞的        的基础上的.
              (4)若将上述结果用于白血病人的骨髓移植,如图中患者是A型血,提供卵细胞的女性是AB型血的,则骨髓移植成功后患者的血型是    型.
              (5)按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是    
            • 4. 我国研究人员创造出一种新型干细胞--异种杂合二倍体胚胎干细胞,具体研究过程如下图所示,请据图回答问题:

              (1)图中的单倍体囊胚1最可能是由小鼠的    发育而来,所采用的技术应为    技术,培养过程中使用的培养液处含有一些无机盐和有机盐外,还需添加微生素、激素、    等营养成分以及血清等物质.
              (2)图中的单倍体ES应取自囊胚的    细胞,ES在形态上表现为    
              (3)由于物种间存在    ,因此自然情况下哺乳动物远亲物种间的配子往往无法完成    作用,或者即便能完成也不能发育.但是人们为了生物学研究的便利,创造出了各类远亲物种间的杂合细胞,如小鼠-大鼠、人-鼠等杂交细胞,由于这些细胞都是由体细胞融合产生,因此杂交细胞通常含有     个三色体组.
            • 5. 图1为动物的克隆研究过程,其中Ⅰ~Ⅶ代表有关过程,a~h代表有关结构或个体.

              (1)Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ过程证明了    
              (2)过程Ⅴ取出的细胞f是    ,它在功能上的特点是    
              (3)动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加    
              (4)Ⅳ过程用的技术是    .若d为囊胚时期,可以取    对克隆早期胚胎进行性别鉴定.
              (5)若不考虑环境因素影响,克隆羊的性状全部像提供细胞核的绵羊吗?    .原因是    
            • 6. 角膜缘干细胞能更新角膜上皮细胞,角膜上皮细胞对维持角膜的透明性至关重要.回答下列问题:
              (1)将角膜缘组织剪碎,加入    处理,可获得大量游离分散的细胞.细胞悬液在培养瓶中培养,当贴壁生长的细胞发生    现象时停止增殖.
              (2)通常角膜缘干细胞的培养控制在10代以内,原因是    
              (3)离体培养角膜缘干细胞时,一般需要在合成培养基中加入    等天然成分,培养时所需的气体主要有    
              (4)研究发现,细胞因子能够调控角膜缘干细胞分化.放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的功能进而抑制细胞因子的调控,由此推断该抑制过程发生在    (选填“复制”、“转录”或“翻译”)水平.
              (5)研究还发现,皮肤干细胞可以诱导分化为角膜缘干细胞,这体现了皮肤干细胞具有    .临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官,从而解决了    问题.
            • 7. 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

              (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为    ,培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为    
              (2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为    ;也可从灰鼠体内取出卵子,通过    后进行早期胚胎培养获得.
              (3)图中重组囊胚通过    技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用    方法保存.
              (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的    分离培养获得.iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向    后用于疾病的细胞治疗.
              (5)哺乳动物胚胎干细胞的特点    
            • 8. 图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)的示意图,图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)的示意图.

              (1)图一所示,制备细胞悬液时,常用    酶来消化剪碎的组织块.配制培养液时,通常需要在合成培养基的基础上添加    等一些天然成分.当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂,这种现象称为细胞的    
              (2)ES细胞是由    中分离出来的一类细胞,ES细胞在功能上具有发育的    
              (3)MEF细胞能够分泌某些蛋白质,其合成到分泌至细胞外的过程是:核糖体→    →囊泡→    →囊泡,再通过    方式分泌到细胞外.在培养液中单独培养ES细胞时,ES细胞容易发生分化,结合图二可推知MEF细胞的作用是    
              (4)在治疗性克隆过程中,细胞核取自患者细胞,这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生    反应.
            • 9. 科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理,成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞,并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞(GiPS细胞).图是利用GiPS细胞对镰刀形细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程:

              请据图回答:
              (1)过程①中,在培养液中加入胰蛋白酶使上皮组织细胞彼此分散,若用传代培养的细胞应不超过10代,以保证细胞的    不发生变化.
              (2)科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理,促使已经    的成纤维细胞“重新编程”产生GiPS细胞,这些GiPS细胞与囊胚中的    细胞性质相同.
              (3)过程③中,导入的重组质粒中调控目的基因表达的组件是            的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞.
              (4)若利用GiPS细胞诱导分化形成    ,再经    技术,可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体.
              (5)GiPS细胞经体外诱导分化,可以直接培育出人造组织器官.图中培育骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比,最大的优点是    
            • 10. (2016•陕西校级模拟)目前,器官移植面临的世界性难题是器官短缺.现代生物工程技术的兴起迎来了解决这一难题的曙光.
              (1)利用转基因动物作器官移植的供体.科学家将目光集中在小型猪身上,实现这一目标的最大难题是    .科学家试图用基因工程方法对动物器官进行改造:向器官    (填“供体”或“受体”)基因组中导入某种调节因子,以抑制    (抗原或抗体)决定基因的表达,或设法除去该基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪.
              (2)利用克隆技术获得器官.据图回答下列问题
              1、图示过程应用到的生物技术主要有    
              2、若将上述技术用于白血病病人的骨髓移植,图中患者是O型血,提供卵细胞的女性是AB型血,则骨髓移植成功后患者的血型是    型.
              3、按上述方法克隆器官在器官移植方面的主要优点是    
              4、在克隆人的问题上,中国政府的态度是    
              ①禁止生殖性克隆人②坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验) ③不反对治疗性克隆 ④不反对生殖性克隆和治疗性克隆
              A.①②B.①②③C.②③④D.①②③④
              (3)利用ES细胞培养技术获得移植器官.ES细胞在培养液中加入    可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化.如果要移植自身ES细胞培育出的器官,患者还是否需要长期使用免疫抑制药物?    (是或否)
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