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            • 1.

              日前,英国研究人员利用最新的3D打印技术,“打印”出了活体胚胎干细胞。实验证明,这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力。科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞,在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎,进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞。请回答:

              (1)自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或_____中分离出来的一类细胞。

              (2)上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有________、_________。胚胎干细胞在功能上具有_________。

              (3)将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变,在分子水平上需要采用

              ______________技术。

              (4)若选用囊胚进行胚胎分割,要注意对其__________做到均等分割。

              (5)胚胎移植是否成功,与供体和受体的生理状况有关。大量的研究已经证明,为胚胎在受体内存活提供可能的生理基础是_____________

            • 2. 如图表示人体内部分结缔组织细胞的形成过程.成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分,其形成过程未经人为调控;A细胞到单核细胞、红细胞的几种途径中部分属于人为调控过程,PU、GATA为两种蛋白质,是细胞内的调控因子.请回答下列问题:
              (1)过程①发生的根本原因是______,过程②中,染色体组数目发生倍增的时期是______.
              (2)为长期培养胚胎干细胞,需建立一种培养体系,可按过程③途径操作.首先在培养皿底部用胚胎成纤维细胞制备饲养层,当饲养层细胞分裂生长到细胞表面相互接触时,细胞会停止增殖.此时,培养皿底部形成的细胞层数是______.然后将干细胞接种在饲养层上进行培养,由此推测,胚胎成纤维细胞可以分泌______物质.
              (3)图中A、B、C、D四类细胞,有可能在骨髓中完成细胞分化的是______.
              (4)研究发现,PU和GATA可以识别基因的特定序列,由此推测,其结构更接近下列物质中的______.
              ①DNA聚合酶 ②DNA连接酶 ③逆转录酶 ④限制酶
              (5)若要使血红细胞前体直接转变成单核细胞,可行的人为调控措施是______.
            • 3. 科学家发现了一种能够专一分化为心脏组织细胞的干细胞,利用心脏病患者自身的这种干细胞,人们将可能修复心脏病患者的心脏受损部位,最终治愈心脏病。根据以上资料提供的信息,回答下列问题:
              (1)利用此类干细胞修复心脏病患者受损部位的过程不能体现细胞的全能性,原因是______。该医学科研成果的优点是______
              (2)干细胞是研究细胞分化机理的理想材料,在______细胞上培养,能誃维持其不分化状态;而在培养液中加入______因子,可以使其向不同类型的组织钿胞分化,同时在培养液中需要添加定量的______,以防培养过程中的污染。
              (3)基因治疗是治疗遗传病的最有效的手段,若此类干细胞为受体细胞,使用______的方法将目的基因导入干细胞。但是目前基因治疗不能治愈大多数先天性心脏病,原因是______
            • 4. 人的血清白蛋白在临床上需求量很大,通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致步骤如下:
              a.将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞,形成重组细胞①;
              b.取出重组细胞①的细胞核,注入去核牛卵细胞中,形成重组细胞②;
              c.电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎;
              d.将胚胎移植到母牛的子宫内,最终发育成转基因小牛。
              请回答下列问题:
              (1)形成重组细胞①的关键技术是______;形成重组细胞②的关键技术是______。
              (2)运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞(ES细胞),培养如下:早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中,必须用胰蛋白酶处理内细胞团,目的是______。
              (3)胚胎移植一般选择发育良好、形态正常的______;胚胎移植成功与否与供体和受体的生理状况有关:哺乳动物发情排卵后不管是否妊娠,在一段时间内,同种动物供、受体生殖器官的生理变化是相同的,为胚胎提供了相同的______;早期胚胎没有与母体子宫建立组织联系,为胚胎______提供了可能。
              (4)如果牛N(由于线粒体发达)为高产奶牛,牛D为高产肉牛,那么将牛N的细胞核移植到牛D的去核的卵细胞中,形成重组细胞C,再将重组细胞培养成牛C,那么牛C是高产奶牛吗?______,原因是______。
            • 5. 2006年山中伸弥等科学家把4个与胚胎发育相关的特异性基因导入成年小鼠细胞,使其变成胚胎干细胞样细胞,他们把这些细胞命名为诱导多潜能干细胞(iPS细胞).某科研小组将某一胚胎的ES细胞和小鼠成纤维细胞诱导形成的iPS细胞分别移入遗传背景相同的小鼠体内,结果如图所示.

              (1)图一中的ES细胞来源于囊胚中的______(填数字);图二中成纤维细胞转变为iPS细胞,类似于植物组织培养中的______过程,成纤维细胞一般选择传代培养10代以内的细胞,其原因是______.
              (2)与图一相比,图二中将导入特异性外源基因的细胞种植于饲养层细胞上获得iPS细胞团,从伦理学角度分析,其优势是______.
              (3)克隆培养iPS细胞时,需要加入一定量的______,以防止杂菌污染.早期研究发现在 iPS 细胞诱导培养的过程中会出现大量不具备干细胞功能的细胞,若用维生素 C 处理,能显著提高iPS细胞的诱导成功率,其原因是______.
              (4)研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内,细胞团能继续生长.由此可推测图二中iPS细胞团逐渐退化的原因是______.
            • 6. 在治疗人类某些疾病时,人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的组织器官后,可用于组织器官的移植,操作流程如图所示.请回答:
              (1)进行图中过程①时,需将体内取出的卵母细胞在体外培养至______期,该期卵母细胞核的位置靠近______,可用微型吸管将之与细胞核一并吸出.
              (2)图中过程②表示将用物理或化学方法激活重组细胞,使其在发育培养液中完成______,最终形成囊胚的过程.
              (3)图中过程③④表示从囊胚中取出______细胞,将其培养在______细胞上,形成大量胚胎干细胞的过程.胚胎干细胞在形态上的特性表现为______.
              (4)图中过程⑤表示在培养液中加入______,就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化,用于患者的组织器官移植.
            • 7.

              近日中科院公布了一项名为“NS1笫三代免疫缺陷小鼠”的技术。这意味着在不久之后,肿瘤患者在选择治疗、用药方案时,可以拥有一名小白鼠“替身”,用以提高治疗精准率,降低患者痛苦。请回答:

                (1)通常制备免疫缺陷小鼠时,要去掉骨髓、吞噬细胞和NK细胞(自然杀伤细胞,机体重要的免疫细胞)。此外,还需要全去掉小鼠体内的________________________(答两种)等特异性免疫细胞。

                (2)该“免疫缺陷小鼠”是通过基因敲除来实现的。首先选取老鼠的____________________________(填“早期胚胎干细胞”或“T细胞”),去掉_________________________(填“免疫基因”或“免疫抑制基因”),再将该细胞移植到代孕母鼠体内,获得第一只基因缺陷小鼠。

                (3)构建多只带有癌症患者等量肿瘤细胞的NS1小鼠,均分为甲、乙、丙三组。通过检测小鼠肿瘤细胞的数量,可评估不同药物抗肿瘤的效果。方案见下表。已知药物1和药物2均有一定抗肿瘤活性,请补充预期结果和结论:

              甲组

              注入等量小分子药物1

              乙组

              注入等量小分子药物2

              丙组

              注入等量的生理盐水

              若甲、乙、丙组中肿瘤细胞的数量关系表现为______________(用“<”“>”或“=”表示),则小分子药物1的抗肿瘤效果更强。

              若甲、乙、丙组中肿瘤细胞的数量关系表现为______________(用“<”“>”或“=”表示),则小分子药物2的抗肿瘤效果更强。

            • 8.

              利用一定方法使细胞群体处于细胞周期的同一阶段,称为细胞周期同步化。以下是能够实现动物细胞周期同步化的三种方法(注:对数生长期是指细胞在一定的环境下,经过短暂的适应期,进而快速生长的时期,此时期营养充足,细胞会以对数生长)。回答下列问题:

              (1)DNA合成阻断法:在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的DNA合成可逆抑制剂,处于细胞周期的________期的细胞不受影响而继续细胞周期的运转,最终细胞会停滞在细胞周期的_______期,以达到细胞周期同步化的目的。

              (2)秋水仙素阻断法:在细胞处于对数生长期的培养液中添加适量的秋水仙素,秋水仙素能够抑制_______________,使细胞周期被阻断,即可实现细胞周期同步化。经秋水仙素处理的细胞________(填“会”或“不会”)被阻断在间期。

              (3)血清饥饿法:培养液中缺少血清可以使细胞周期停滞在间期,以实现细胞周期同步化。从分子水平上讲,分裂间期的特点是_____________。

              (4)通常在体外培养动物细胞,为了提高细胞克隆形成率,需要在适宜的培养基中添加_________激素来促进葡萄糖的吸收,并且以经射线照射本身失去增殖力的小鼠成纤维细胞作为__________来支持细胞生长。

            • 9.

              供体细胞的抗原决定基因能编码抗原或与抗原形成有关的酶,导致器官移植过程中出现免疫排斥。科学家利用基因工程方法对猪的基因组进行改造,以解决人体移植器官的短缺和免疫排斥问题。回答下列问题:

              (1)对猪基因组进行改造,可以选择某种有调控作用的目的基因,重组后导入受体细胞,以达到抑制猪抗原决定基因                     的目的。进行DNA重组时需要使用的工具酶是                    

              (2)选择猪胚胎干细胞作为受体细胞,胚胎干细胞是由                     中分离出来的一类细胞。将目的基因导入后,利用标记基因的作用             含有目的基因的受体细胞。

              (3)将含目的基因的胚胎干细胞注入猪的囊胚,而后将囊胚通过              技术移入受体子宫,获得转基因猪。

              (4)采用核移植技术克隆转基因猪时,应选用处于              期的卵母细胞作为受体细胞;随后从构建的重组胚胎中分离得到胚胎干细胞,经诱导分化形成多种器官,这是利用了胚胎干细胞的                  

            • 10. 如图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所作的一系列研究,请据图分析回答:

              (1)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上,并加入动物血清、抗生素等物质,维持细胞不分化的状态.在此过程中,饲养层提供干细胞增殖所需的,加入抗生素是为了______,这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义.
              (2)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔,通过组织化学染色,用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素,这项研究利用了胚胎干细胞具有______的特点.在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是______.
              (3)过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是______,将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体,其目的是______.
              (4)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等组织和器官.实验时,必须用X射线照射去除胸腺的小鼠,获得免疫缺陷小鼠,其目的是______,该过程研究的意义在于解决______问题.
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