有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________，该实验设计是否合理？为什么？_________________________________________________________________。

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，是一种常用的生物学实验材料，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色

（1）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分，该培养基属于__________（填“选择”或“鉴别”）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中__________换成__________，若要鉴定是否为分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成________________。

（2）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为_____________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是_________________________________________。

纤维素分子不能进入酵母细胞．为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图．

A．①②

B．①③

C．②④

D．③④

（3）纤维素酶基因的表达包括__________和___________过程，与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有__________

（4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株__________不能存活，原因是____________________________．

（5）酵母菌生产酒精的细胞部位是_______________,产生酒精时细胞的呼吸方式是________________．在利用纤维素生产酒精时,菌株Ⅳ更具有优势，因为导入的中重组质粒含有_________，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率．

微生物与人类生产生活越来越密切，如酵母菌可以用于酿酒，醋酸菌可以用来制醋，毛霉可以制作腐乳。请回答下列相关问题。

（1）酵母菌与醋酸杆菌相比，在结构上的主要区别是        。

（2）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明原因。                             。

（3）为了获得高纯度的果酒，需要对酵母菌进行分离和纯化，其过程为：第一步：配制培养基：该培养基必须含有微生物生长所需要的______________________等基本营养成分，原料称重溶解后需进行______________________，然后进行灭菌操作，常用的灭菌方法是____________。第二步：接种。微生物常用的接种方法有___________________。第三步：培养。温度控制在____________。 第四步：挑选符合要求的菌落。

(4)若要测定发酵罐中酵母菌的菌体数，可在显微镜下用___________________直接计数。

回答下列有关微生物培养的问题。

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。

（1）培养基中加入化合物A的目的是________，这种培养基属于________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________，同时，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________。

（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________。

（4）转为固体培养基培养时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（5）在培养基的配制过程中，操作方法包括以下步骤，其正确顺序为________。

①溶解 ②调pH值 ③定容 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量 ⑦灭菌

A.①②⑥⑤⑦③④                 B.⑥①③②⑤④⑦

C.⑥①②⑤④⑦③                D.①②⑤④⑥⑦③

（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉，这样处理的目的是________。

（1）酸菜制作过程中，起主要作用的微生物是___________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_____________。

（2）实验室可采用__________法进行菌种纯化，在对该菌种进行培养时，与常规培养基相比，还需要额外在培养基中添加_________________。

（3）为了保持所获得的菌种纯净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，需将菌种接种在___________上。放入4℃冰箱中可保藏3-6个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的_______ ___混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

（4）在市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学认为是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持_______的观点，理由是______________。