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          50条信息

            • 1.
              在遗传病监测及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题:

              (1)在PCR中先用95℃高温处理的目的是 ______ ;而这一过程中在细胞内DNA复制时是通过 ______ 实现的。
              (2)在PCR技术中所需要的引物实质上是一种 ______ ,在相应的橫线上写出引物Ⅱ ______ 。
              (3)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA: ______ (写出①、②中的一种即可)。
              (4)若将1个DNA分子拷贝10次,则需要在缓冲液中至少加入 ______ 个引物。
              (5)在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是 ______ 。
            • 2.
              已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.

              请回答:
              (1)①代表的是______过程.为获得A基因表达载体,需用______酶对A基因和运载体进行切割.将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是______.
              (2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是______,加入引物的作用是______.
              (3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制______等条件.
              (4)过程③采用的技术是______,获得的X叫______ 细胞.
            • 3.
              研究人员将人工丝蛋白基因导入到蚕卵内,对蚕卵的基因改造获得成功.含有人工丝蛋白的蚕茧发出绿色荧光,比正常的蚕茧更加轻薄.请回答下列问题:
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.将人工丝蛋白基因导入到蚕卵体内,常用的方法是 ______ .
              (2)绿色荧光蛋白基因可以作为 ______ ,用于鉴别和筛选蚕卵中是否含有人工丝蛋白基因.
              (3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导人家蚕细胞.PCR技术利用的原理是 ______ ,该PCR 反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、 ______ 和 ______ .
              (4)生物反应器培养家香细胞时会产生接触抑制,所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器 中,这样可以通过 ______ 来增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
            • 4. 家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时间处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ ______ 之间;若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,可以采用的方法是 ______
              (3)通过PCR技术可大量获取目的基因.PCR反应体系主要包括:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、 ______ 和与干扰素基因特异性配对的DNA引物.
              (4)培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ ,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
              (5)“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成“无废弃物农业”,这主要是遵循生态工程的 ______ 原理.同时,通过饲养家禽、家畜,栽培食用菌,提高农民经济收入,使保护环境和发展经济相互协调,这又体现了生态工程的 ______ 原理.
            • 5. 科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG),该基因能激发细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了新思想.某国家重点实验室准备探索利用基因工程生产单克隆抗体,请回答下列问题:
              (1)实验室已获得无限增殖调控基因(prG).在体外,可采用 ______ 技术大量扩增该目的基因.该技术的基本反应过程:目的基因DNA受热 ______ 后解链为单链,与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶的作用下进行 ______ ,如此重复循环多次.该技术的前提是要有 ______ ,以便根据这一序列合成引物.
              (2)该基因工程操作的核心是 ______ .本研究中,受体细胞为 ______ ,欲将目的基因转入受体细胞,常采用 ______ 方法.若实验成功,则受体细胞既能 ______ ,又能 ______
              (3)制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术,使 ______ 细胞与 ______ 细胞融合,融合成功的细胞经过筛选就是所需要的 ______ 细胞.
            • 6.
              RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示:

              (1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、 ______ 、 ______  和引物A等.
              (2)过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95℃,其目的是 ______ ,该反应体系中所用的Taq酶至少应能耐受 ______ ℃.
              (3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要 ______  个引物B.
              (4)利用RT-PCR技术获取的目的基因 ______  (填“能”或“不能”)在物种之间交流;该技术还可用于对某些微量RNA病毒的检测,可提高检测的灵敏度,原因是 ______ .
              (5)RT-PCR过程中主要借助对 ______  的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应有序高效地进行.
            • 7.
              黑麦草具有抗除草剂草甘麟的能力,是因为黑麦草拥有编码抗草甘麟酶的基因.科学家利用该基因.通过转基因技术获得了抗除草剂草甘磷的玉米新品种.培育新品种过程中用到了PCR技术(如图所示),请回答下列问题:
              (1)通过反转录法得到 ______ 文库,从中选取抗草甘磷酶的基因.该方法获得的目的基因缺少基因表达所需的调控序列,即 ______ .
              (2)体外获得大量编码抗草甘麟酶的基因要利用PCR技术,该技术所依据的原理为 ______ ,图中物质A是 ______ ,B酶是 ______ .
              (3)将目的基因导入植物细胞有多种方法,最常用的是 ______ .
              (4)若需要对转入抗草甘麟基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定,需要对玉米做 ______ 操作.
              (5)若实验结果不理想,为了提高抗草甘麟酶活性,可以通过 ______ 工程设计和改造编码抗草甘麟酶的基因.
            • 8.
              基因工程在农业中的应用发展迅速,基因可导入农作物中,用于改良该农作物的性状.通过多重PCR技术可扩增并检测转基因农作物的外源基因成分.多重PCR是在一个PCR 反应体系中加入多对引物,针对多个DNA模板或同一模板的不同区域,扩增多个目的基因的PCR 技术.请回答:
              (1)我国科学家将Bt毒蛋白基因、鱼的抗冻蛋白基因、控制果实成熟的基因导入农作物,可获得 ______ 、 ______ 、延熟的转基因作物.
              (2)引物是根据 ______ 的一段核苷酸序列合成的,每种基因扩增需要一对引物的原因是 ______ .表是A、B、C三种基因的引物,据表分析,引物特异性主要体现在 ______ .
              A基因 引物1 5′GCTCCTACAAATGCCATCATTGC3′
              引物2 5′GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC3′
              B基因 引物1 5′TGAATCCTGTTGCCGGTCTT3′
              引物2 5′AAATGTATAATTGCGGGACTCTAATC3′
              C基因 引物1 5′CCTTCATGTTCGGCGGTCTCG3′
              引物2 5′GCGTCATGATCGGCTCGATG3′
              (3)PCR过程中温度从90℃降到55-60℃的目的是 ______ .
              (4)检测人员通过多重PCR技术确定农作物中是否含有A、B、C三种转基因.将A、B、C三种基因和待测的农作物基因样品进行PCR,扩增后的产物再进行电泳,结果如图.据图分析:含有三种转基因的农作物是 ______ ,判断依据是 ______ .

              (5)与PCR技术相比,多重PCR技术的优势是 ______ .
            • 9.
              科学家利用PCR技术分别从抗根结线虫的番茄和辣椒中克降抗性基因SIMi及Ca-Mi,并利用遗传转化方法将它们转入对根结线虫敏感的番茄中,获得抗根结线虫的番茄转基因株系应用于植物抗根结线虫育种.请回答相关问题:
              (1)PCR技术是扩增目的基因的常用手段.扩增过程中,目的基因DNA ______ 后解链为单链, ______ 与单链相应互补序列结合,在酶的作用下进行延伸.
              (2) ______ 是实施基因工程的核心.
              (3)将目的基因转入对根结线虫敏感的番茄中,最常用的方法是 ______ .通过转化,目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内 ______ .
              (4)为了检测对根结线虫敏感的番茄中是否插入目的基因,可采用 ______ 技术.检测目的基因在分子层面是否表达则可以用 ______ 的方法.
              (5)为了比较两种抗性基因(SIMi和CaMi)在转基因后的抗根结线虫的效果,可分别取等量的两种成功表达的转基因番茄植株 ______ ,比较其抗虫效果.
            • 10.
              家蚕细胞具有高效表达外源基因能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ 和 ______ 之间;若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,可以采用的分子检测方法有 ______ 、 ______ .
              (3)通过PCR技术可大量获取目的基因.PCR反应体系主要包括:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ 和 ______ .
              (4)培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ ,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
              (5)“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成“无废弃物农业”,这主要是遵循生态工程的 ______ 原理.同时,通过饲养家禽、家畜,栽培食用菌,提高农民经济收入,使保护环境和发展经济相互协调,这又体现了生态工程的 ______ 原理.
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