生产实践中应用的菌种主要来土壤,从土壤中分离微生物的一般实验流程是：土壤収样—选择培养—梯度稀释—鉴別培养。请回答：

（1）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在      环境中采集土样，所选择的培养基应以       作为唯一碳源。

（2）Taq耐热菌的发现和分离为基因工程的发展作出了突出贡献。分离Taq耐热菌所需要的特殊培养条件是             ，在生物休内进行DNA复制所必需而PCR技术中不需要的酶是             。

（3）下图是纯化微生物培养的效果图。请冋答：

①先配制好的培养基在接种前都要进行             灭菌，在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在            条件下进行。

②获得图A效果的接种方法是            ,获得图B效果的接种方法是            。

如图是从酵母菌细胞内获取某植物需要的某种酶基因的流程，请回答下列问题：

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(1)图中cDNA文库含有酵母菌的________基因，与基因组文库中的基因相比无________、_________。

(2)①过程提取的DNA需要用限制酶，该酶能够识别_____________________，并且使_____________________断开。

(3)为在短时间内大量获得目的基因，可用PCR方法扩增，该反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含 )、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、________和________。

(4)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从________出发，通过设计蛋白质结构和推测相应的氨基酸序列，进而确定相对应的________，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质。

用农杆菌转化法可以获取转基因抗病植物，回答有关问题：

(1)若该抗病基因取自某种真菌的CDNA文库，转入植物细胞后，________(能、否)正常表达。若想得到大量的抗病基因，需用到________技术，中文全称为________，条件除了原料、能量、模板外还需要________、________。

(2)某培养基中的卡那霉素会抑制愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的植物细胞，应使基因表达载体中含有________基因，作为________基因。

(3)农杆菌是一种在________中生活的微生物，农杆菌转化法适用于________和________植物，其原因是该类植物受到损伤时，伤口的细胞会分泌大量的________。

(4)Ti质粒的T—DNA(可转移的DNA)可整合到植物细胞中________上，所以，构建基因表达载体时，将目的基因插入到________中。用到的工具酶有________。

(5)鉴定成功获得转基因植物的最简捷的方法是________。

“葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回。”这是唐诗中提及的葡萄酒。19世纪，法国的巴斯德发现葡萄汁变酒是酵母菌的发酵作用。
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（1）在无氧的条件下，酵母菌能进行酒精发酵，反应式是                          ，研究表明，酵母菌也可以在有氧条件下进行呼吸作用，说明酵母菌是一种    微生物。葡萄汁发酵后是否有酒精产生可以用重鉻酸钾来检验，在酸性条件下，重鉻酸钾与酒精反应的颜色变化情况是                 。

（2）酵母菌的酒精发酵过程一般控制在                温度范围，最适合酵母菌繁殖，请简要说明理由                                              。

（3）为了提高葡萄酒品质可以在葡萄汁中加入人工培养的酵母菌，可利用           培养基来分离获得较为纯净的酵母菌种。

（4）对野生酵母菌进行诱变可筛选出具有耐高糖和耐酸性的高产突变菌株，利用PCR技术可大量获得突变菌所携带的特殊基因，在PCR扩增反应中加入引物的作用是       ，加入DNA聚合酶的作用是                                      。