美国新希望生殖医学中心张进团队于2016年10月19日在美国生殖医学学会会议上正式宣布，世界首个细胞核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生。如图是该男婴的培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)上述“三亲婴儿”的核DNA由_________提供，质DNA由_________提供。由此可见，“三亲婴儿”的意义在于可以避免子代_________遗传病的发生。

(2)过程③在体外进行时需要对精子进行________处理，卵母细胞应处于_________期。

(3)过程④是早期胚胎培养，需将受精卵移入_________继续培养。体外培养需要满足的条件有：_________、营养、适宜的温度和pH，并置于_________混合气体的培养箱中进行培养。

(4)过程⑤是_________技术，取_________的滋养层细胞可以对移植前的胚胎进行性别鉴定，采用SRY-PCR的鉴定方法，在该PCR扩增过程中若消耗引物分子14个，则DNA扩增了_________次。

聚合酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是

嗜热菌可以生活在98℃的高温环境中，研究发现其耐热性与基因H的表达产物有关。下图表示某研究小组利用大肠杆菌对H基因实行的克隆和表达过程，其中NdeⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、SalⅠ四种限制酶的识别序列和酶切位点分别为CA^↓TATG、G^↓AATTC、A^↓AGCTT、G^↓TCGAC。请分析回答：

(1)图中的结构A是________，其主要作用是________。一个完整的基因表达载体组成，除了质粒1中所示结构以外，还应该含有________。

(2)用图中质粒1和H基因构建重组质粒，应选用________两种限制酶进行切割，影响限制酶处理效果的因素可能有________(多选)。

①反应温度 ②缓冲液pH ③限制酶的浓度 ④DNA样品的纯度

(3)实验中发现，重组质粒导入大肠杆菌后H基因的表达效率很低，但在含有质粒2(辅助性质粒)的细胞中，H基因可以高效表达。为了筛选出转入了两种质粒的受体菌，应在筛选平板培养基中添加________，整个实验过程应保持________操作。

(4)PCR反应中引物的设计非常关键，据图分析，扩增H基因时应选择的一对引物是________。

A.引物Ⅰ：···GGGAATTC···；引物Ⅱ：···CTCATATG···

B.引物Ⅰ：···GAATTCCC···；引物Ⅱ：···CATATGAG···

C.引物Ⅰ：···GGAAGCTT···；引物Ⅱ：···AAGCTTCC···

D.引物Ⅰ：···CTCATATG···；引物Ⅱ：···AAGCTTAAGCTT···

下列关于基因工程技术的叙述，正确的是( )

（1）进行DNA亲子鉴定时，首先需要用__________________将待测的样品DNA切成片段，然后用电泳的方法将这些片段分开，最后形成DNA指纹帮助确认身份。

（2）PCR技术的原理是______________，甲过程所需要的条件是______________，完成乙、丙过程需要反应体系提供___________、___________、___________等物质。

（3）利用PCR技术扩增目的基因，要有一段____________________，以便合成a、b。下图为第一轮循环产生的产物。若继续循环，该DNA片段共经过________次循环后刚好能形成所需目的基因。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。

下例各项不属于克隆的是

某实验小组以洋葱组织为实验材料，进行DNA粗提取和鉴定的实验，实验主要过程如下图，回答下列问题：

（1）步骤一中需加入一定量的洗涤剂和    对洋葱组织进行处理，加入前者是的目的是               ，加入后者的目的是            。将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有DNA的滤液。

（2）步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤，可以采用以下几种不同的方法：

①滤液中NaCl浓度在      mol／L时可分离出DNA，若要再次提纯，需要将其溶解在2mol／L的NaCl溶液中；

②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，其目的是         ；

（3）步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是___     _，得到纯净的DNA后，可利用DNA与            在沸水浴条件下会被染成    色，来对其进行鉴定。

（4）提取出的DNA继续进行PCR，一般经过    次循环，每次循环经过     、            、       三步。

基因表达载体的构建是基因工程的核心。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。请回答下列问题

（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是                               之间相连的化学键。

（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是 。

A．若图中右侧碱基序列为ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子

B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于①②处

C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种

D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基

（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取   作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。该DNA分子在PCR仪中经过第_______次循环会产生等长的目的基因，该次循环能产生           个这样的片段。

（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是           。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有              种。

（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含          基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是                   。