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            • 1． 干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白，具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性．回答下列问题：
              （1）干扰素的作用机理是：干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体，激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白，其中有些蛋白可通过激活    使病毒的RNA水解；有些则可与    （细胞器）结合，通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用．
              （2）利用基因工程生产干扰素的方法之一是：利用    酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起构建基因表达载体，采用    的方法导入牛的受精卵细胞中，经胚胎早期培养至    期，移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛．
              （3）利用细胞工程也能生产干扰素，其设计思路是：将相应的免疫细胞和瘤细胞利用电激、PEG、    等方法诱导融合，再利用    培养基筛选出杂交瘤细胞，经细胞培养可获得大量干扰素．由于干扰素在体外保存困难，可利用蛋白质工程对干扰素进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→    →推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核甘酸序列．
              难度：中等
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            • 2． （2016•盐城二模）用限制酶EcoRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1 000bp（1bp即1个碱基对）的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，凝胶电泳结果如下图所示．该DNA分子的酶切图谱（单位：bp）正确的是（　　）
              A．
              B．
              C．
              D．
              难度：中等
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            • 3． （2016•江苏二模）如图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径，下列有关叙述错误的是（　　）
              A．获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因
              B．奶牛2体内不同组织细胞的基因型可能不同
              C．成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性
              D．奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养
              难度：中等
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            • 4． 若某研究小组用普通绵羊通过转基因技术获得了转基因绵羊甲和乙各1头，具体见下表．
              绵羊性别转入的基因基因整合位置表现型
              普通绵羊♀、♂--白色粗毛
              绵羊甲♂1个A+1号常染色体黑色粗毛
              绵羊乙♂1个B+5号常染色体白色细毛
              注：普通绵羊不含A+，B+基因，基因型用A-A-B-B-表示．
              请回答：
              （1）A+基因转录时，在    的催化下，将游离核苷酸通过    键聚合成RNA分子．翻译时，核糖体移动到mRMA的    ，多肽合成结束．
              （2）为选育黑色细毛的绵羊，以绵羊甲、绵羊乙和普通绵羊为亲本杂交获得F1，选择F1中表现型为    的绵羊和    的绵羊杂交获得F2．用遗传图解表示由F1杂交获得F2的过程．
              （3）为获得稳定遗传的黑色细毛绵羊，从F2中选出合适的1对个体杂交得到F3，再从F3中选出2头黑色细毛绵羊（丙、丁）并分析A+和B+基因的表达产物，结果如图所示．不考虑其他基因对A+和B+基因表达产物量的影响，推测绵羊丙的基因型是    ，理论上绵羊丁在F3中占的比例是    ．
              难度：中等
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            • 5． 2015年，屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖．工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取，产量低，价格高．基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路．科学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，偶然发现一株高产植株．通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变．
              （1）提取了高产植株的全部DNA后，要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术，该技术的原理是    ．
              （2）如果用青蒿某个时期mRNA反转录产生的双链cDNA片段，用该双链cDNA进行PCR扩增，进行了30个循环后，理论上可以产生约为    个DNA分子，该双链与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做青蒿的    ，获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列    （填“相同”或“不同”）．
              （3）将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体，图l、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答：

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是    ，构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子，启动子是    识别结合位点．
              （4）检测目的基因是否表达出相应蛋白质，应采取    技术．目的基因导入组织细胞后，通过    技术培育出青蒿幼苗．
              难度：中等
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            • 6． 目前通过基因工程，科学家把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中能合成兔子的血红蛋白，这一事实证明（　　）
              A．所有生物共用一套遗传密码
              B．蛋白质合成并不复杂
              C．兔血红蛋白基因进入大肠杆菌使之出现合成系统
              D．兔子与大肠杆菌的亲缘关系较远
              难度：中等
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            • 7． 若婴幼儿生长激素分泌不足会导致侏儒症，某科学团队利用多种现代生物技术通过奶牛乳腺生物反应器来生产人的生长激素．请回答下列问题．
              （1）鉴别受体细胞中是否含有目的基因，需借助基因表达载体中的    筛选受体细胞．   若要检测牛奶中是否含有生长激素可通过    技术检测．
              （2）若将人的生长激素基因导入牛的精子中，通常采用    法使精子获能，与发育到    期的卵母细胞进行受精作用．在胚胎的培养液中添加一定量的    ，可以防止培养过程中的细菌污染．
              （3）当胚胎发育到囊胚阶段，选取囊胚的    细胞做DNA分析，进行性别鉴定，筛选出    胚胎．为了提高胚胎的利用率，可将所选胚胎的    均等分割，再进行胚胎移植．
              难度：中等
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            • 8． 普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏．科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞，培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄．图1为操作流程图．

              科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因细胞内的抗除草剂基因．其技术过程如下图2（图中的■代表基因前的启动子）．请据图回答：

              （1）图1中所用质粒是    ，其上的    可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的    上．
              （2）图1中步骤①→②使用的生物技术是    ．这种技术可保留番茄植株抗软化、保鲜时间长的优良性状，其原因是    ．
              （3）作为标记基因，抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是    ．
              （4）经检测成功后，抗除草剂基因已没有用途，继续留在植物体内可能会造成的安全问题是    ．经Cre酶处理后，质粒中的两个loxP序列分别被切开后，可得到如上图右侧的这两个DNA分子．由于    的原因，抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失．
              （5）根据转基因番茄细胞中的信息传递过程，分析转基因番茄抗软化的原因    ．
              （6）若将得到的二倍体转基因番茄植株自交，F1中抗软化与不抗软化的植株数量比为3：1，则可推测目的基因整合到了    ．
              A．一对同源染色体的一条上         B．一对同源染色体的两条上
              C．两条非同源染色体上             D．一对同源染色体的非姐妹染色体上．
              难度：中等
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            • 9． 多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损，成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜．利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期．科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图．据图回答下列问题：

              （1）提取目的基因①若已获取PG的mRNA，可通过    获取PG基因．②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有    结合位点．③重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是    ．
              （2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有    的培养基进行筛选，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞    现象来鉴别细胞壁是否再生．
              （3）由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与    互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达．若转基因番茄的保质期比非转基因番茄    ，则可确定转基因番茄培育成功．
              （4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用    方法使子代保持转基因番茄的优良性状．
              难度：中等
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            • 10． 逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一．运用逆转录病毒载体可以将外源基因插入到受体细胞染色体，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达．研究发现逆转录病毒基因组（RNA）的核心部分包括三个基因：gag基因（编码病毒的核心蛋白）、pol基因（编码逆转录酶）、env基因（编码病毒的表面糖蛋白）．位于这些基因的两端有LTR序列（含有启动子、调节基因等），控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移．如图是构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程．回答下列问题：
              （1）逆转录病毒的遗传信息储存在    ；过程①原料是    ．
              （2）过程②中，外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR序列中的启动子后，其主要目的    ．
              （3）过程③中，导入病毒蛋白编码基因（gag，pol和env）的目的是    ．
              （4）过程④中，逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细胞团细胞，因为这类细胞能    ．此时，早期胚胎处于    期．
              （5）在胚胎移植前，需要对代孕母鼠进行    处理，才能使其生殖器官（子宫）适于早期胚胎的植入和正常发育． 研究中必须对嵌合小鼠进行筛选，只有能产生    的嵌合小鼠才能将获得的新性状遗传给子代．
              难度：中等
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