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            • 1. 在图所示的质粒PZHZ11(总长为3.6kb,1kb=1000对碱基因)中,lacZ基因编码β-半乳糖苷酶,后者催化生成的化合物能将变色的大肠杆菌染成蓝色.

              (1)若先用限制酶BamHⅠ切开pZHZ11,然后灭活BamHI酶,再加DNA连接酶进行连接,最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中,则含3.1kb质粒的细胞颜色为    ;含3.6kb质粒的细胞颜色为    
              (2)若将两段分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段,形成4.9kb的重组质粒,则目的基因长度为    kb.
              (3)上述4.9kb的重组质粒有两种形式,若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种,只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段;那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒,则可获得    kb和    kb两种DNA片段.
              (4)若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并坚定目的基因,然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达,最后将产物的药物单独注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥,那么上述过程属于    
              A.人类基因工程   B.动物基因工程     C.植物基因工程   D.微生物基因工程.
            • 2. 油菜由白菜(2n=AA=20)和甘蓝(2n=CC=18)天然杂交进化而来,如何在短时间内提高油菜籽的产油率、改善油菜籽的品质是科学家研究的热门话题.请分析回答下列问题:
              (1)在利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝体细胞融合前,需用    除去各自的细胞壁,常用化学促溶剂    促进二者融合成杂种植物细胞.在由杂种植物细胞生成再生植株的过程中,细胞内最多含有    个染色体组.
              (2)研究发现,油脂的生成量与蛋白质的合成量呈反相关,主要控制基因(独立遗传)及代谢路径如图1.
               ①叶肉细胞中的丙酮酸主要来自    
               ②高油油菜的基因型为    .基因型为MmNn的油菜自交,后代中宜于留种的纯合高油油菜占    
              (3)油酸为不饱和脂肪酸,能降低人体血液中胆固醇、减少患心血管病风险.F基因控制合成的油酸酯氢酶催化油酸形成饱和脂肪酸,转反义F基因油菜能提高菜籽油中油酸含量.
              ①利用油菜细胞的染色体DNA直接获取大量F基因的方法为    
              ②构建反义F基因表达载体时,需要    酶;将反义F基因表达载体导入油菜根细胞的方法除基因枪法外,还可利用    .从图2看出,构建反义F基因表达载体时没有设计标志基因,目的是    
              ③Le启动子为种子特异性启动子,将F基因反向连接在Le启动子之后构建了反义F基因.检测转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA含量,结果表明,因杂交形成双链RNA,细胞内F基因的mRNA水平下降.由此推测,反义F基因的转录抑制了F基因的    (填复制、转录或翻译)过程.若F基因转录时,两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链,推测反义F基因转录时的模板链为    
            • 3. 科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达,使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖.如图为构建工程菌的部分过程,其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上.请回答:

              (1)①过程中需要的工具酶是    ,②③过程中需要的工具酶是    
              (2)同尾酶是指切割DNA分子后能产生相同黏性末端的限制酶,图中4种限制酶中属于同尾酶的是    
              (3)重组表达载体中的介导序列引导目的基因整合到酵母菌的染色体DNA上,其意义在于    
              (4)①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时,科研人员设计了如下一对引物:GAATTCGACCTCAAATCAGGTAGG和TTGCATTGACTTACACCTAGG,其中下划线部分序列的设计依据是    ,方框部分序列的设计目的是    
              (5)对重组表达载体进行酶切鉴定,假设所用的酶均可将识别位点完全切开.若使用EcoRⅠ和SalⅠ酶切,得到    种DNA片断.若使用EcoRⅠ和BamHⅠ酶切,得到    种DNA片断.
            • 4. 目前第二、三代病毒疫苗的研制是基于DNA重组技术而建立的.请分析回答下列问题:
              (1)第二代疫苗是以编码病毒抗原蛋白的RNA为模板,经    酶的作用获得目的基因,再利用    等工具酶构建基因表达载体.
              (2)要将重组质粒导入大肠杆菌,应先用    处理大肠杆菌,使大肠杆菌转变为    态;再将    在缓冲液中混合培养完成转化过程.
              (3)第三代疫苗即“DNA疫苗”是将编码某种抗原蛋白的DNA注射到动物体内,该DNA可在生物体内    出相应的抗原蛋白.
              (4)对于基因工程产品安全性的争论越来越激烈,目前转基因生物的安全性主要体现在食物安全方面、        三个方面.
            • 5. 下列有关酶工程与基因工程的叙述中正确的是(  )
              A.酶工程是细胞水平(或性状水平)操作,基因工程是分子水平操作
              B.酶工程中通过层析提纯酶蛋白,基因工程中通过筛选获得受体细胞
              C.酶工程合成的是非天然存在的蛋白质,基因工程合成的是天然存在的蛋白质
              D.酶工程产品相对安全且应用广,基因工程产品安全性稍弱且可能影响生态环境
            • 6. 小鼠的某种抗体由轻链和重链组成,科学家将编码轻链和重链的基因分别导入两个不同的烟草植物体内,然后让两株植物进行杂交就能获得可同时编码轻链和重链两种多肽的植株,即合成小鼠抗体的转基因植物.回答下列问题:
              (1)若要获取小鼠的编码轻链和重链的基因,可以先提取小鼠浆细胞中编码两条链的mRNA,然后通过     过程获取小鼠的cDNA,并利用    技术对目的基因进行扩增.
              (2)在构建基因表达载体时,需要用到的工具酶有    ,基因表达载体中的目的基因两端的序列分别是        
              (3)用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中,常常将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的    
              上.检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术,一般用标记的    作探针.
              (4)若想大规模培育能合成小鼠抗体的转基因植物,可采用    技术.
            • 7. 某科研机构研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗,对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果,其有效成分是该菌的一种表面抗原蛋白质,请回答下列问题.
              (1)要获得编码该菌表面抗原的基因,可提取出该菌的mRNA,并将mRNA    .要大量获得表达特异抗原的基因,可采用    技术.
              (2)基因工程的核心步骤是构建    ,该结构除了抗原基因(目的基因)外,还必须有启动子、终止子以及    
              (3)目的基因进入受体细胞内,并且在变体细胞内稳定和表达的过程,称为    .在表达过程中,启动子需与    识别和结合,从而驱动转录过程.最终翻译是否成功,常用的检测方法是    
              (4)与传统疫苗相比,基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在,还可以诱导产生    (填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”).基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的.基因治疗是把    导入病人体内,使该基因表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的.
            • 8. Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因,因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因.请回答下列有关转基因抗虫植物的问题:
              (1)要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因,可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列,设计特异性    ,再利用    技术扩增出Bt毒蛋白基因.
              (2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有    ,它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)的    上.这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是    法.
              (3)要确定抗虫基因导入棉花细胞后,是否赋予了棉花抗虫特性,在个体水平上还需要做    实验;若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白,在分子水平上可利用    方法进行检测.
              (4)目前,转基因植物的安全性问题是社会争论的热点.如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全;但也有人认为转基因植物的种植减少了    的使用,有利于减轻污染.面对转基因技术的利弊,我们应持有的正确做法是    
            • 9. 如图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图,请分析回答:

              (1)中A、B分别表示        .由A得到的基因编码区的脱氧核苷酸序列有     (答“一种”或“多种”),这是因为    
              (2)常用的方法是    .通常将    时期的早期胚胎移植到受体内,为提高培育成功率,进行‚过程之前,对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行    检测.
              (3)要一次获得大量基因型相同的子代,可对早期胚胎进行    ,操作时需注意    
              (4)蛋白质工程中,需对蛋白质结构进行设计改造,必须通过基因修饰或基因合成来完成,而不直接改造蛋白质,原因是    
              (5)请说明转基因技术的利:    ,弊:    .(各答出一点即可)
            • 10. (1)在植物基因工程中,构建重组Ti质粒时,通常要用    分别切割    和Ti质粒,再用    进行连接.
              (2)动物细胞体外培养时,要保证被培养的细胞处于    的环境,在营养方面最终需在培养基中加入    等天然成分.细胞培养需在适宜的理化条件下进行,此外还需要一定的气体环境,其中C02的主要作用是    
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