知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．精子载体法是以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精形成受精卵，在体外培养成胚胎后移入代孕母体，从而获得转基因动物．请回答下列问题．
（1）将目的基因导入精子之前需要构建基因表达载体，基因表达载体包括目的基因、    ．目的基因导入精子的方法常用    ．
（2）外源基因能够整合到精子的    上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的    才能进入卵细胞中，受精之前需要对精子进行    处理．
（3）胚胎移植时，受体应处于适合的生理状况，此时可利用激素对受体进行处理，一般采用的激素是    ．此外，受体对移入子宫的外来胚胎    ，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．

难度：中等

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2．（2016•天津模拟）科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因．其技术过程如图（图中的■代表基因前的启动子，启动子是基因（gene）的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度．启动子就像“开关”，决定基因的活动．）据图1回答：
（1）loxP是一种只有34个碱基对构成的小型DNA片段，是有两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列共同组成，自身不会表达，插入质粒后也不影响原有基因的表达，其碱基序列如下：
Cre酶能特异性地识别此序列并在箭头处切开loxP，其功能类似于基因工程中的    酶．从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的    ．
（2）将重组质粒导入到植物细胞后，通过    和    两个过程可以形成完整的植株．作为标记基因，抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是    ．
（3）经检测成功后，抗除草剂基因已没有用途，继续留在植物体内可能会造成的安全问题是    ．经Cre酶处理后，质粒中的两个loxP序列分别被切开后，可得到如上图右侧的这两个DNA分子．由于    的原因，抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失．
（4）loxP序列是有方向性的．如果经Cre酶处理后，发现抗除草剂基因反向连接在质粒-上，则原来质粒一中这两个loxP序列的方向是    ．
A．两个都是正向       B．两个都是反向      C．一个正向一个反向      D．与方向无关．

难度：中等

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3．请回答下列现代生物科技问题：
（1）基因工程的工具之一限制酶主要是从    中分离纯化出来的．将目的基因导入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为    ，从分子水平检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是    ．
（2）将目的基因导人动物细胞培育转基因动物常用的受体细胞是    ，经早期胚胎培养和    ，使其发育成具有新性状个体．
（3）胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在功能上具有    ，在    细胞上或在添加抑制因子的培养液中培养可以增殖而不发生分化．
（4）转基因产品的安全性问题一直是争论的焦点，原因之一是由于科学发展水平的限制，目前科学家对基因的    、基因间的相互作用以及基因的调控机制等都了解的相当有限．

难度：中等

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4．回答下列有关基因工程和遗传表达的问题：
图1所示的酶M和酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．

（1）限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是    ．
（2）酶M特异性剪切的DNA片段是，则酶N的识别序列是    ．
（3）图2的A和B分别表示两段DNA序列．表格分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点．

据图2：假设位于某基因两侧的DNA序列均如图A所示，则应选择表格中酶    进行酶切；若位于某基因两侧的DNA序列分别如图A和B所示，则应选择表中酶    进行酶切．
（4）图3质粒中不能和图2中片段B发生重组的是    （多选）

（5）下列关于质粒运载体的说法正确的是    （多选）．
A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达
F．没有限制酶就无法使用质粒运载体
基因工程除改造微生物外，还可以改造动植物细胞，图4显示是一种外源基因导入受体细胞的方法．

（6）基因工程中图4所示的导入方法称为    ．
（7）若想在山羊的乳汁中收获人的生长激素，则需将人生长激素基因导入至山羊受精卵的    中．

难度：中等

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5．临床上治疗大面积创伤时，可将经特殊处理的猪皮移植到患者的创面处，并在猪皮上开若干个小口植入患者的自体皮，待其生长并最终替换猪皮．研究表明，导入人P基因的转基因猪提供的“皮肤”可在移植后存活更长时间，能够保证自体皮充分生长．请回答问题：
（1）如果将P基因通过    法直接导入猪受精卵中，一般情况下，猪不会表达P基因，原因是P基因在猪细胞中不能    ，因此需要构建基因表达载体．
（2）操作成功的受精卵品要在无菌无毒的环境中培养，如何创造无菌无毒的环境    ．
（3）通过    技术将早期胚胎移入代孕母猪的子宫内，可获得转基因猪．检测猪体细胞中P基因是否表达，在分子水平上采用的检测方法是    ．
（4）若应用得到的早期胚胎，并从中分离出    ，用于医学硏究和治疗，则这种方法称为    ．

难度：中等

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6．下列有关基因工程操作的叙述中，正确的是（　　）

A．用同种限制酶切割载体与目的基因可获得相同的粘性末端

B．检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功

C．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同

D．用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接

难度：中等

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7．请根据所学知识回答下列现代生物科技专题中的有关问题：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是    ；PCR技术扩增目的基因是基因工程中常用的技术手段，这一技术的原理是    ．
（2）目前在生产中应用较多的胚胎工程技术是    、    和体外生产胚胎技术．大量的研究已经证明，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生    反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能．
（3）克隆动物实际上是用    方法得到的动物，该方法是将一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的    细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体．
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，它所遵循的基本原理是    、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理等．

难度：中等

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8．回答下列关于基因工程的问题．
外源基因需要导入受体细胞才能实现其表达功能．下图示一种外源基因导入受体细胞的方法，请据图分析回答：

（1）图所示的导入方法称为    ．在动物基因工程中，受体细胞通常采用    ．
基因工程操作步骤中，需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞，下图①-③示一种筛选方法的过程．
pBR322质粒含有两个抗性基因，分别是Amp（氨苄青霉素）抗性基因和Tet（四环素）抗性基因，其中在Tet抗性基因上有下列目的基因的插入位点（插入将导致Tet抗性基因功能性失活），请据图分析回答：

（2）图中①过程所需的酶是    ．
（3）经过①过程，pBR322质粒可能出现的两种结果A是    、    ．
（4）②过程表示用含四环素（使细胞停止生长，但不致死）和环丝氨酸（使生长的细胞致死）的培养基中培养细菌甲，则培养结果C表示在培养基中可能存活的细菌包括    ．
（5）若要进一步筛选出符合要求的受体细胞D，则③过程需要做的处理是（请参照过程②的方法）    ．
基因工程中使用的Ⅱ型限制性核酸内切酶通常可以识别长度为4-8个核苷酸的特异序列．下列图示限制酶Sau3AⅠ对DNA片段切割的结果．

（6）请据图分析，Sau3AⅠ的识别序列以及切割位点（用“↓”表示）是    ．
下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1（含两个抗性基因的质粒）和图2（含目的基因的外源DNA）中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请据图分析回答：
限制酶 XhoⅠ BclⅠ SalⅠ BamHⅠ XbaⅠ
识别序列及酶切位点 C↓TCGAG T↓GATCA G↓TCGAC G↓GATCC T↓CTAGA

（7）为了使目的基因和质粒实现定向连接和便于受体细胞的筛选，切割质粒的限制酶应选用    ，切割含目的基因的外源DNA的酶应选用    ．

难度：较难

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9．毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关．获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图．

（1）过程①中最常用的运载工具是    ，所需要的酶是    ．
（2）在过程②中，用    处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞．在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO₂的气体环境中，CO₂的作用是    ．
（3）在过程③中，用    处理以获取更多的卵（母）细胞．
（4）在过程④中，对成熟卵（母）细胞进行    处理．
（5）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是    ．在胚胎移植前，通过    技术可获得较多胚胎．

难度：中等

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10．图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．

（1）若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段，其产物长度分为    ．若图1DNA分子中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从隐形纯合子中分离出图示对应的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，产物中共有    种不同长度的DNA片段．
（2）为了提高试验成功率，需要通过    技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝．在目的基因进行扩增时，加入的引物有A、B两种，若该目的基因扩增n代，则其中含有A、B引物的DNA分子有    个．
（3）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是    ．
（4）为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在含    的培养基上培养，得到如图2示的菌落．
再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含    的培养基上培养，得到如图4的结果（空圈表示与图3对照无菌落的位置）．挑选目的菌的位置为    ．

（5）若目的基因在工程菌中表达产物是一条多肽链，如考虑终止密码，则其至少含有的氧原子数为    ．

难度：中等

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限制酶	XhoⅠ	BclⅠ	SalⅠ	BamHⅠ	XbaⅠ
识别序列及酶切位点	C↓TCGAG	T↓GATCA	G↓TCGAC	G↓GATCC	T↓CTAGA