5.
内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽,具有强烈的促进血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。内皮素(ET)主要通过与靶细胞膜上的ET受体(ET
A)结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体,实现ET
A基因在大肠杆菌细胞中的高效表达,其过程如下图所示,图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶
ApaⅠ的识别序列为
限制酶
XhoⅠ的识别序列为
。请据图分析回答:
(1)进行过程①时,需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和___酶等。
(2)过程③和⑤中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使___键断开,形成的黏性末端是__ __。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是__。
(3)构建的重组表达载体,目的基因上游的启动子是___的部位,进而可驱动基因的转录。
(4)过程⑥要用CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为容易吸收外界DNA的___细胞。
(5)将SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,其目的是有利于检测____。
(6)基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中,不仅能有效改良植物的品质,还由于叶绿体转基因不会随___(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物。