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            • 1. 如图表示中国科研人员对树鼩精原干细胞进行遗传修饰后,通过自然交配获得世界首只转基因树鼩的过程.请回答下列问题:

              (1)培养精原干细胞时,定期更换培养液的目的是防止 ______ 对自身细胞代谢造成障碍,通入二氧化碳的作用是 ______
              (2)图中涉及的基因工程的核心步骤是 ______ ,通常采用 ______ 技术将GFP基因导入树鼩精原干细胞.
              (3)利用PCR技术扩增GFP基因需要 ______ 酶,外源的GFP基因能在树鼩体内表达的原因是 ______
              (4)图示过程与通过体外受精培育转基因动物相比,避免了将受精卵移入 ______ 中继续培养的麻烦,同时也克服了胚胎发育到 ______ 时期进行胚胎移植的难题.
            • 2. 请回答与动物细胞培养基胚胎工程有关的问题:
              (1)欲获得牛的单个体细胞,需用 ______ 处理动物组织,在体外培养时,通常需在培养液中添加 ______ 等天然成分.
              (2)获取的卵子需培养到 ______ 时期才能用于核移植,通过核移植获得的动物称为 ______
              (3)在胚胎分割技术中,需将牛囊胚的 ______ 均分,可利用囊胚的 ______ 细胞进行性别鉴定.
              (4)ES细胞在 ______ 上或含有抑制因子的培养基上培养时,不会发生分化;可用ES细胞分化出人造器官用于器官移植,优点是 ______
            • 3. 某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性.供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞.请回答下列有关动物细胞培养的问题:
              (1)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量 ______ .细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是 ______
              (2)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长 ______ .若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用 ______ 消化处理.
              (3)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的 ______
              (4)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入 ______ ,B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 ______ 合成水平的差异,确定Y的药效.
            • 4. 回答下列问题:
              如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:
              (1)OA段的培养称为 ______ 培养,AB段可能发生了 ______ 现象,需要用 ______ 酶处理,以使组织细胞分散开来.
              (2)为制备单克隆抗体,需将 ______ 注射到小鼠体内,以此获取 ______ 细胞,同时可选取图中 ______ 点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞,所选取细胞的细胞膜上的 ______ 比正常细胞显著减少.
              (3)为筛选出能够产生单克隆抗体的杂交细胞,可用 ______ 培养基达到目的.杂交瘤细胞具有 ______ (特点)
            • 5. 如图是动物细胞培养的基本过程示意图.请根据图回答:

              (1)容器B中的动物组织用 ______ 处理,是为了使细胞分散开制成细胞悬液.
              (2)培养首先在C瓶中进行,这时的细胞培养称为 ______ ,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为 ______ .细胞进行有丝分裂,数量不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 ______
              (3)细胞培养需满足的条件有:无菌无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理,通常在培养液中添加一定量的 ______ ,此外,应定期 ______ ,以便清除代谢产物.营养除了通过合成培养基满足已知的外,还需要添加 ______ 满足不知的成分.需要适宜的温度和酸碱度,满足气体条件,培养瓶或培养皿置于 ______ 的混合气体中培养.其中CO2的主要作用是维持培养液的 ______
            • 6. 随着生物科学技术的发展,动物的生殖方式变得越来越多样化.如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是健康的黄牛,请据图回答下列问题:

              (1)应用1中获得的良种小牛,细胞核遗传物质来源于 ______ 个体,性别为 ______
              (2)在应用2、3、4中,若要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其 ______ ,得到的卵母细胞需要发育至 ______ 时期才能受精.
              (3)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题;对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将 ______ 均等分割,否则将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育.之后的胚胎移植要保证成功,需对供、受体母畜注射相关激素进行 ______ ,移植时要选择发育良好,形态正常的 ______ 胚.
              (4)应用4中细胞进行定向诱导,可分化形成各种组织和器官.在胚胎干细胞培养过程中除需要适宜的温度、无菌、无毒等环境条件以外,营养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核苷酸,还要加入 ______ ;向培养液中通入95%空气和5%二氧化碳,空气中的氧气参与细胞的代谢,二氧化碳可以维持培养基的 ______
            • 7. 图1表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合,获得部分杂种细胞的过程(注:杂种细胞中人类的染色体会随机丢失,各种杂种细胞保留人类染色体的种类和数量是不同的).表1表示几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系.请回答下列问题:

              表1 几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系
              杂种细胞系
              A B C D E
              人体基因 1 - - -
              2 - - -
              3 - - -
              人体染色体 1 - - -
              2 - - -
              3 - - -
              注:“﹢”表示有,“-”表示无
              (1)图1中诱导动物细胞融合常用的诱导因素有 ______ (至少写出两种),再用特定的 ______ 培养基进行筛选,得到杂种细胞.
              (2)培养杂种细胞时,根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配制培养基,此外经常会在培养基中加入 ______ .培养过程细胞需置于含CO2的混合气体的培养箱中培养,CO2的主要作用是 ______
              (3)假如每种杂种细胞只保留了人的1条染色体,从染色体组成的角度考虑,杂种细胞可能有 ______ 种.
              (4)据表1 推测,第2染色体上有第 ______ 基因,可进一步证明萨顿的假说即基因在染色体上是正确的.
            • 8. 动物细胞培养常用于生理、病理、药理等方面的研究.如图示动物细胞培养的部分过程,据图回答下列问题:

              (1)图一中A与B处理所用的物质是 ______
              (2)图一中分装的过程为 ______ 培养,成活的细胞叫做 ______ ,一般能传40~50代,其遗传物质 ______ (填“改变”或“不变”).
              (3)在细胞的分裂增殖过程中,为了确定DNA合成的时间长短,加入以3H标记的 ______ (填“腺嘌呤”“鸟嘌呤”“胞嘧啶”或“胸腺嘧啶”)最合适.培养中的细胞数目的增加和培养时间的关系如图二所示,据图读出细胞完成一个细胞周期所需要的时间是 ______ h;若一个细胞中DNA的含量为2N,分裂期所需要的时间为5h,请在图三中画出一个细胞周期中DNA的量变. ______
            • 9. 回答下列有关动物细胞培养的问题.
              (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到表面 ______ 时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 ______ .此时,瓶壁上形成的细胞层数是 ______
              (2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 ______ 细胞,该种细胞的黏着性 ______
              (4)检查某种毒素是否能改变细胞染色体的数目,最好选用处于有丝分裂 ______ 期的细胞进行显微镜观察.
              (5)在细胞培养过程中,通常在 ______ 条件下保存细胞.因为在这种条件下,细胞 ______ 的速率降低.
            • 10. 动物细胞的培养常用于生理、病理、药理等方面的研究.如图示动物细胞培养的部分过程:
              (1)图示中A与B处理所用的物质是 ______
              (2)在细胞的分裂增殖过程中,为了确定DNA合成的时间长短,加入以3H标记的 ______ (腺嘌吟、鸟嘌吟、胞嘧啶、胸腺嘧啶).
              (3)图中分装的过程称为 ______ 培养(原代培养还是传代培养).
              (4)在细胞的贴壁生长过程中,正常情况下,到一定阶段会出现 ______ 现象.
              (5)在动物细胞培养液中,除了一般的营养物质外,往往还必须添加 ______
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