回答下列（一）、（二）小题。

(一）某研究小组欲用苹果汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋，请分析回答：

(1)将苹果汁放入发酵瓶，要预留约________的空间。为得到酒精和糖含量较高的果酒，可在果汁中加入一定比例的______。若发酵瓶内持续无气泡产生，则需加入更多的_______，使发酵作用尽快发生。

(2)变酸的果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜，若要在该菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株，可通过获得_______的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目，则常采用_________法。对获得的优质醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基______上低温保存。

(3)下图是果酒和果醋的发酵装置，关于果醋发酵叙述错误的是_______

A.发酵前，瓶内酒—冰混合物的pH需调至7.0

B.发酵过程中，充气口要适时适量充气

C.发酵过程中，排气口排出醋酸发酵产生的CO₂

D.发酵完成后，出料口的pH值不再减少

 (二）请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。

(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时，利用一定的物质，如生物诱  导剂_____作介导，使经免疫的小鼠脾细胞与________细胞融合，筛选出融合的细胞再进行细胞的______培养，获得纯系细胞，同时还要进行________检验，以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。

(2)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述，正确的是________

A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长

C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物

(3)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体，科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞，该技术的核心步骤是______________,噬菌体是这些关键基因的___________。

为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响，分析回答：

①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在恒温的培养箱中培养22-24h。

②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表。

③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。

④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44-48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5-9天观察囊胚发育情况。

如表亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO₂的作用是____________。

（2）步骤②中，卵母细胞发育到____________时期才能与获能的精子受精；步骤③中，判断是否受精的依据是____________。

（3）步骤④中，受精卵经过卵裂期、____________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是____________。

（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L^-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起____________作用（填“促进”、“抑制”）。

（5）将囊胚移植到受体（代孕母牛）子宫内，最终生出的犊牛和受体遗传上有无亲缘关系？____________原因是___________

____________。

用医学手段培育“三亲婴儿”可以解决遗传基因带来的缺陷，其培养过程如图所示．请据图回答有关问题：

（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前需要注射________激素，促使一次有更多的卵泡发育。重组细胞体外培养所需的气体主要是O₂和CO₂，CO₂的主要作用是___________________。

（2）从受精卵到三亲婴儿的培养还需要______和______等技术。三亲婴儿的培育方式属于____________生殖．

（3）三亲婴儿的培育技术______（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。三亲婴儿的染色体______（填比例）来自母亲提供的细胞核．设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行_____________________。

下图为单克隆抗体制备流程示意图。

(1)单克隆抗体制备技术的基础是 ____________________________。

(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是______________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的____________________ ，以保证生命活动的正常进行。    

(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是_______________ 。

(4)若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是____________________________________________________。

现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱，请完成下列实验报告。

I．实验材料：小白鼠胚胎。

Ⅱ．药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。

Ⅲ．实验原理：________________________________________________，根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。

Ⅳ．实验步骤：

（1）制备细胞悬液：把小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬液。

（2）进行细胞培养：

①取标记好的A、B、C三个洁净的培养瓶，______________________________。

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，___________，并将培养瓶摇匀。

③把三个培养瓶放在37℃（适宜温度）的细胞培养箱中培养。

（3）制作临时装片：

①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从细胞培养箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液迅速杀死细胞，将细胞固定在不同的分裂时期。

②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片中央，加1-2滴一定浓度的 __________ 染色，3-5 min后，盖上盖玻片，制成临时装片。

（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于 _______  期的细胞，并与 小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占细胞总数的百分数（Q值）。

V．实验结果：

Ⅵ．实验结论： ___________________________________________

下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程，请据图回答问题:

【加试题】蓝莓果实中富含花青素，研究表明花青素对癌细胞的增殖具有一定的抑制作用。为了研究不同浓度、不同时间的花青素的抑制效果，请利用以下材料进行探究。

实验材料：癌细胞悬液（含培养液）、蓝莓花青素（浓度200μg/ml)、生理盐水、卡氏瓶、血细胞计数板、显微镜等。

(要求与说明：2天内每隔12小时计数一次，计数具体操作过程不作要求；癌细胞置于卡氏瓶中培养；实验条件适宜）

(1)实验思路：

……

(2)请设计一个表格用于记录实验数据。

(3)①除了利用血细胞计数板对癌细胞进行计数外，也可以利用__________测定癌细胞培养液的浑浊度。

②分析数据时，发现某个花青素浓度下的一组实验数据存在明显的偏差，如何处理？__________。

A.保留，继续求平均值B.舍弃，其他组别求平均值

C.重新实验得到实验数据D.取中间值