知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用分别切割和Ti质粒，再用进行连接．
（2）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于的环境，在营养方面最终需在培养基中加入等天然成分．细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C0₂的主要作用是．

难度：中等

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2．研究表明毛兰素对肝癌细胞体外分裂和生长有抑制作用，而且随着浓度增加，时间延长，抑制作用加强．根据以下提供的实验材料和用具验证上述结论，请你补充实验思路和预测实验结果．
材料与用具：人肝癌细胞、细胞培养液、毛兰素、0.1%DMSO溶液（用于配制毛兰素溶液）、培养瓶等．（要求与说明：实验仪器、试剂、用具操作、培养条件、检测活细胞方法等不做具体要求）
请回答：
（1）实验思路：
①实验分组：
甲组：细胞培养液+人肝癌细胞+适量低浓度毛兰素溶液
乙组：细胞培养液+人肝癌细胞+等量高浓度毛兰素溶液
丙组：细胞培养液+人肝癌细胞+    ．
每组设置若干个重复样品．
②    ．
③
④
⑤
（2）以细胞存活率（细胞存活率=实验组活细胞数/对照组活细胞数，对照组细胞存活率为1）为指标，设计一坐标系，预期实验结果；

（3）人体内癌细胞凋亡     会/不会）引起炎症．

难度：中等

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3．将毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因导入绒山羊，能提高羊绒的质量．
（1）转基因常用的运载工具除了质粒外，还可以使用    ．
（2）为获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊，先将KIFⅡ基因转入羊胎儿皮肤成纤维细胞中，使其结合到细胞核的    上．培养转基因成纤维细胞，培养液需添加    以维持无菌状态．细胞很快的贴附在瓶壁上，称为    ．生长到一定阶段，细胞因发生    而停止生长，可使用    处理，然后继续分瓶培养．
（3）取培养的转基因成纤维细胞注入去核的    ，获得重组细胞，经激活使其分裂发育成早期胚胎．一般情况下，动物早期胚胎培养到    时期，可进行胚胎移植．

难度：中等

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4．某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性．供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞．
请回答下列有关动物细胞培养的问题．
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同．一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量    ．
（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是    细胞培养应在含5%的CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长    ．药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更    ．若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用    处理．
（4）为了防止基因培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的
（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入    ，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的    或    合成水平的差异，确定Y的药效．

难度：中等

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5．回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面    时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的    ．此时，瓶壁上形成的细胞层数是    ．要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是    ．
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现    现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成    细胞，该种细胞的黏着性    ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量    ．
（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是    ．
（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到    期的细胞用显微镜进行观察．
（5）在细胞培养过程中，通常在    条件下保存细胞．因为在这种条件下，细胞中    的活性降低，细胞    的速率降低．
（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作    进行攻击．

难度：中等

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6．血管内皮生长因子（VEGF）是目前发现的诱导肿瘤血管生成的最强烈的血锌生成因子，针对VEGF生产的抗肿瘤药物，是治疗癌症的一个方向；芝加哥大学的Katherine Knight博士成功地在转基因兔中获得骨髄瘤样肿瘤，经技术改进，能高产量地生产兔单克隆抗体：我国江苏省某公司首次在全球成功开发出人源化兔单抗药物“注射用人源化抗VEGF单克隆抗体”（SIM63），有效打破了跨国公司的技术垄断．人源化抗体可以大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应．请回答下列相关问题：
（1）动物细胞在体外培养的技术属于    工程，由于人们对动物细胞所需的营养物质没有完全搞淸楚，在使用合成培养基时，通常需要加入    等一些天然成分：在培养时除提供细胞所需的O₂外，还需要CO2，其作用是    ．
（2）在基因工程中，将目的基因导入动物细胞现今极常用、极有效的方法是    ，要在短时间内扩增大量的目的基因采用    技术，这个技术中的关键酶是    ．
（3）当VEGF作为抗原进入动物体内时，动物体内的某些B细胞分化为浆细胞，这种浆细胞只分泌针对VEGF的一种抗体，但B细胞在体外培养不会无限增殖，解决这一问题的方法是通过动物细胞融合技术得到杂交瘤细胞，常用的化学诱导融合试剂为    ，要分离出杂交瘤细胞，应该用    培养基进行筛选，单克隆抗体最主要的优点是它的    ，并可大量制备．

难度：中等

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7．现代生物工程技术推动了免疫学和畜牧业的发展．
（1）制备单克隆抗体需要借助动物细胞融合技术，其过程中与植物不同的方法是使用    诱导，融合细胞首先需要经过    培养获得杂交瘤细胞；还需进行    化培养和抗体检测，经多次筛选，用专一抗体检验呈阳性才可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，再进行体内或体外培养，大量制备单克隆抗体．
（2）对大面积烧伤病人，借助    技术可获取大量自身健康皮肤用于移植．培养的条件需要    、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO₂混合气体（维持培养液的pH）．
（3）用细胞核移植技术繁育良种牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植前需要对受体牛进行    技术处理，对外来胚胎基本不发生    ，为胚胎在受体内的存活提供了可能．

难度：中等

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8．自闭症并不是神经系统的严重的、明显的损伤，而是与神经突触功能与调节息息相关，MeCP2基因表达异常与自闭症发生密切相关．中国科学家通过构建携带MeCP2的转基因食蟹猴模型，为深入研究自闭症的病理与探索可能的治疗干预方法提供了重要基础．
（1）突触是神经元之间在功能上发生联系的部位，在突触后膜上发生的信号变化为    ，这种变化体现了细胞膜具有    功能．
（2）将MeCP2基因导入食蟹猴细胞最为有效的方法是    技术，其受体细胞是    ．
（3）在体外进行试管胚胎培养时，除了给予一定量的O₂以维持    外，还需要提供    维持培养液的PH．
（4）若要同时获得多只与模式猴相同的小猴，可对    时期的胚胎胚胎进行    操作，操作过程需要特别注意的问题是    ．

难度：中等

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9．根据生物科学技术有关知识，回答下列问题：
（1）动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础．动物细胞培养需要提供无菌、无毒环境，因此除了要对培养液和培养用具进行灭菌外，通常还要在培养液中添加一定量的    ，以防培养过程中的污染；采用    方法，防止代谢产物积累对细胞造成危害．
（2）在基因工程构建基因表达载体时，需要把来自cDNA文库的目的基因片段正确插入到表达载体的    和    之间．检测目的基因在受体细胞中是否表达，可采用的方法是    杂交．
（3）应用胚胎工程技术培育“试管牛”，需要经过体外受精、    、    以及在母体中发育和分娩过程．若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体，则表明    过程已完成．

难度：中等

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10．欲进行小鼠肝细胞在不同浓度NaCl溶液中发生体积和数量变化的实验，请根据以下提供的实验材料与用具，提出实验思路，预测实验结果并进行分析．
材料与用具：小鼠肝细胞悬液（用质量分数为0.9%NaCI溶液配制）、质量分数为1.3% NaCl溶液、蒸馏水、试管若干支、血细胞计数板、显微镜（具有测距功能）等．
（要求与说明：对NaCl溶液的具体稀释过程、细胞计数的具体操作过程不作要求．不考虑细胞体积变化对计数的影响．绘制曲线时的细胞体积指细胞的平均体积．）请回答：
（1）实验思路：
（2）预测实验结果（在以下坐标系中，绘制细胞体积和细胞数量变化示意曲线）：

（3）分析与讨论：
①当NaCl溶液浓度大于0.9%时，细胞体积与数量发生的变化及其原因是什么？
②基于上述实验，怎样才能用肝细胞分离得到纯度较高的细胞膜？    ．

难度：中等

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