知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．肥胖已经严重危害人类健康．为研究发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响，科研人员进行了相关实验．
（1）3T3-L1前脂肪细胞在胰岛素（INS）、地塞米松（DEX）和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤（IBMX）的诱导下，基因 ______ 表达，分化为成熟脂肪细胞，因此经过三种物质诱导的3T3-L1前脂肪细胞是肥胖研究常用的细胞模型．
（2）3T3-L1前脂肪细胞培养液中除了具有基本的营养外，还需加入一定量的 ______ ，并置于 ______ 中培养．
（3）将一定数目的植物乳杆菌接种到经过 ______ 处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中，制备发酵大麦提取物（LFBE）．除不接种植物乳杆菌外，其余操作方法相同，制备未发酵大麦提取物（RBE）．
（4）研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响，实验处理及结果如下．（表格中+表示加入了该物质，-表示未加入）

组别处理方法	模型组	空白组	对照组（提取物浓度ug/mL）			实验组（提取物浓度ug/mL）
组别处理方法	模型组	空白组	100	200	400	100	200	400
培养液	+	+	+	+	+	+	+	+
1 ______	+	-	-	-	-	-	-	-
2 ______	-	-	+	+	+	-	-	-
3 ______	-	-	-	-	-	+	+	+

①表格处理方法1、2、3分别是 ______ 、 ______ 、 ______ ．
②分析实验结果，说明 ______ ．
（5）为进一步研究LFBE抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的机理，科研人员提取各组细胞中总RNA，经 ______ 过程获得cDNA，再利用PCR技术扩增出肥胖相关基因．在相同条件下，PCR产物的量可以间接反映细胞中 ______ 的含量．若检测结果是 ______ ，则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3-L1前脂肪细胞分化．

难度：较易

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2．请回答下列问题：
（1）约翰格登于1962年通过实验把蝌蚪已分化体细胞的细胞核移植进入卵母细胞质中，并成功培育出“克隆青蛙”．由于动物细胞的全能性会随着动物细胞 ______ 程度的提高而逐渐受到限制，直到今天也还不能用类似 ______ （某种植物细胞工程的技术手段）的方法获得完整的动物个体．因此，约翰格登培育“克隆青蛙”，实际是通过 ______ （某种动物细胞工程的技术手段）来实现的．“克隆青蛙”和“试管婴儿”所共需的胚胎工程技术有 ______ ．
（2）山中伸弥于2006年把4个关键基因通过逆转录病毒转入小鼠的成纤维细胞，使其变成多功能干细胞．在该技术中，逆转录病毒是这4个关键基因进入成纤维细胞的 ______ （基因工程的工具），它能够携带外源基因进入受体细胞，并整合到其染色体的DNA上．该操作过程中，除了需要逆转录病毒外，还需要的操作工具有 ______ 、 ______ ．
（3）卡罗琳斯卡医学院2012年10月8日宣布，将2012年诺贝尔生理学或医学奖授予约翰格登和山中伸弥，以表彰他在“体细胞重编程技术”领域作出的革命性贡献．所谓“体细胞重编程技术”即将成年体细胞重新诱导同早期干细胞状态，即获得iPS细胞，iPS细胞与胚胎干细胞一样，具有发育的 ______ ，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞．目前获得iPS细胞的方法除上述两种之外，常见的还有以下两种：一是诱导成年体细胞与胚胎干细胞 ______ 产生四倍体细胞；二是应用 ______ 技术（动物细胞工程的技术手段）将生殖细胞置于特定条件下进行培养．

难度：较易

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3．华蟾素注射液是将蟾蜍的全皮阴干后，提炼而成的中药复方制剂，是我国经典抗肿瘤药物．研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，进行了一系列实验．请根据题中信息回答下列问题．

Ⅰ．肝癌HepG-2细胞的培养：
（1）培养肝癌HepG-2细胞时，在培养基中加入适量的 ______ 以补充合成培养基中缺乏的物质，为防止培养过程发生污染要加入 ______ ．此外，每48h更换1次培养液，目的是 ______ ．同时还要提供适宜的温度、 ______ 、氧气和二氧化碳等环境条件．
Ⅱ．探究华蟾素药效作用机理的实验：
（2）用不同浓度的华蟾素注射液分别处理HepG-2细胞12h、24h和48h，测定华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的影响，结果如下图．图1由图甲可知，华蟾素能有效地 ______ 肝癌HepG-2细胞增殖，且与 ______ 呈正相关．图乙的结果进一步表明，华蟾素对肝癌HepG-2细胞增殖的影响体现在 ______ ．
（3）DNA拓扑异构酶Ⅱ（简称TopoⅡ）为真核生物所必需，在DNA复制、转录、重组及形成正确的染色体结构、染色体分离、浓缩等方面发挥重要作用，TopoⅡ在肿瘤细胞中含量明显高于正常细胞．华蟾素注射液处理HepG-2细胞48h后，采用RT-PCR技术检测TopoⅡ基因的表达情况，结果如图丙．
①RT-PCR即逆转录-聚合酶链反应．其主要原理是：提取HepG-2细胞中的总RNA，以一段 ______ 作为引物，在 ______ 酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板进行 ______ ．
②由图丙可知，华蟾素注射液在基因水平上影响肝癌HepG-2细胞的机理是 ______ ．

难度：较易

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4．动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础，在动物细胞工程的其他技术中都得广泛应用（如图）．下面是与动物细胞工程相关的问题，请分析回答：

（1）在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用 ______ 处理，以分散成单个细胞，制成细胞悬液．
（2）动物细胞培养时，要保证细胞必需的营养、适宜的温度　和pH条件，还要提供无菌、无毒和适宜的气体环境．为达到无菌、无毒的环境条件，除了要对培养液和培养器具进行消毒外，还要① ______ ，② ______ ．气体环境中CO₂的作用是 ______ ．
（3）应用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是 ______ ．
（4）如图表示单克隆抗体的制备过程，给小鼠注射特定抗原后产生的、与骨髓瘤细胞融合的细胞是 ______ ．在细胞融合的过程中，常用的化学诱导剂是 ______ ；筛选出的杂交瘤细胞所表现出的优良性状是 ______ ．

难度：较易

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5．科学家培育转乳糖分解酶基因奶牛的过程如图所示．请回答下列问题：

（1）图中细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有 ______ ．在进行细胞原代培养时会出现 ______ 和细胞接触抑制现象．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 ______ ．
（2）图中将乳糖分解酶基因导入胚胎呈纤维细胞中，最常用的方法是 ______ ．
（3）图中的核移植操作需要将经过细胞培养获得的供体细胞的细胞核注入去核的卵母细胞中，去掉卵母细胞细胞核的目的是保证克隆动物的核遗传物质全部来自 ______ ，而所用的供体细胞一般都选用传代培养10代以内的细胞，原因是传代培养10代以内的细胞能保持正常的 ______ ．
（4）重组细胞2在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛体内会生出与图中的黑白花奶牛性状并不完全相同的犊牛，原因可能有 ______ ．（至少答出两点）
（5）单克隆抗体的制备也需要构建重组细胞，该重组细胞是将 ______ 融合而成的．

难度：较易

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6．我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因．请回答：
（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理 ______ ，并用 ______ 酶使两者结合．将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞．
（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有 ______ 现象，需要定期使用 ______ 酶处理，以便于分瓶培养．
（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不需采用的是 ______ ．
A．取单个细胞进行培养 B．加入胰岛素
C．二氧化碳培养箱 D．加入动物血清
（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品．在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是 ______ ．

难度：较易

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7．染色体的断裂片段在有丝分裂时不能进入子细胞核中，而在细胞溶胶中形成圆形结构，称为微核．通过染色可观察到微核，常用含微核的细胞数占观察细胞总数的比例（微核率）来检测有毒物质对细胞的危害程度．某研究小组应用微核检测技术探究不同浓度的氯苯对人类细胞的危害程度．请根据以下提供的实验材料与用具，补充完成实验思路及其它小题．
材料和用具：人成纤维细胞悬浮液、培养液、0.1mg/L氯苯溶液、染色液、显微镜、细胞培养瓶、二氧化碳培养箱等．（染色和制作装片的具体方法不作要求）
（1）实验步骤：
①配制 ______ ，分别等量加入到细胞培养瓶中，另设一只培养瓶不加氯苯化合物，并编号；
②向各培养瓶中加入 ______ ；
③取各培养瓶中培养液， ______ ．
（2）绘制一个用于呈现实验数据的坐标系，并画出最可能的实验结果．
______ ．
（3）检测微核时可用 ______ 溶液作染色剂．

难度：较易

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8．如图为动物细胞工程操作的流程图．请据图分析回答：

（1）将动物组织中的细胞分散开来获得单个细胞A和B通常用 ______ 来处理．将A、B细胞融合形成C细胞的过程，常用的方法有 ______ ．
（2）如果该图表示单克隆抗体的制备过程，A细胞是骨髓瘤细胞，则B细胞是从小鼠体内获得的 ______ ，在获得该细胞之前，需要向小鼠注射 ______ ．获得D细胞需要经过2次筛选，最终得到 ______ ．单克隆抗体的优点是 ______ ．
（3）如果该图表示克隆羊的培育过程，①过程中涉及的生物技术有 ______ （写出两种）．

难度：较易

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9．一切生命活动都离不开蛋白质，图示部分细胞结构和多种蛋白质，请回答下列有关问题．
（1）A蛋白参与细胞间的相互粘连，所以在动物细胞工程中常用 ______ 处理组织碎块，使细胞分散开．
（2）B蛋白与物质跨膜运输有关，如果运输过程需ATP供能，则运输方式称为 ______ ，若运输过程不消耗ATP，则运输方式称为 ______ ．
（3）C蛋白只能与特定分子结合，结合后使蛋白质的 ______ 发生变化，像“分子开关”一样，引起细胞内一系列变化，是细胞膜完成 ______ 功能的分子基础．
（4）E蛋白具有催化功能，因其只能与 ______ 结合，所以E蛋白的功能具有专一性的特点．
（5）F蛋白的功能是与DNA分子的某一部位结合，以DNA分子的一条链为模板合成RNA分子，F蛋白的名称是 ______ ．

难度：较易

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10．在动物细胞培养过程中，通过一系列技术方法，就能测得一个细胞周期以及周期中各个时期所需的时间．下图一表示一个细胞周期，其中分裂间期包含G₁、S、G₂三个阶段（其中G₁期主要合成RNA与DNA复制相关的酶，G₂期主要合成另一些RNA和分裂期相关的酶，设G₁期细胞核中的DNA含量为2c）图二表示动物细胞培养过程．

请据图作答：
（1）用图一中字母的先后顺序表示一个完整的细胞周期 ______ ．
（2）制作动物细胞悬浮液，应先剪碎组织，再用使细胞分开．在图二的细胞培养中（培养条件正常），在何种情况下细胞就会停止分裂增殖？答： ______ ．
（3）相对正常的细胞培养，若用DNA合成抑制剂处理所培养的细胞，DNA含量为c的细胞比例会增加；若用秋水仙素处理，则DNA含量为c的细胞比例会增加．
（4）图二中的器皿轻加振荡，分裂期细胞就会脱离器皿壁而悬浮于培养液中，从而收集到分裂期细胞．某实验小组通过一定的方法，测得下列数据：对器皿轻加震荡后，获得悬浮于培养液中的细胞1千个；另获得贴壁生长的细胞数为9千个，其中DNA含量为2c的细胞数为6千个，DNA含量为4c的细胞数为2千个．已知该细胞分裂一个周期（T）为10h，细胞周期中各时期所需时间的计算公式为t= $%20%5Cfrac%20%7BT*n%7D%7BN%7D$ （n为各时期的细胞数，N为所获得的细胞总数），则G₂期所需的时间约为 ______ h．

难度：中等

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