回答下列(一)、(二)小题。

(一)请回答下列有关微生物培养、发酵过程中的相关问题。

(1)在“分离以尿素为氮源的微生物”的实验中，配制好的尿素固体培养基加上封口膜后用高压蒸汽灭菌方法灭菌，冷却后加入用_________漏斗过滤的尿素溶液。漏斗用后需用适宜浓度的___浸泡，再用蒸馏水冲洗，干燥后保存。 

(2)在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中，可以用___(A.50%乙醇　B.70%乙醇　C.90%乙醇　D.95%乙醇)鉴别果胶。果胶酶可以从黑曲霉或______中提取，配制这些微生物的培养基时需要将pH调至____。

(3)果酒制作果醋过程中，通入空气需要经过_____过滤。果醋发酵结束的标志是pH_____。 

(二)下图表示动物细胞克隆和制备单克隆抗体的相关过程，请回答相关问题：

(1)过程①常应用____方法导入重组诱导基因后得到干细胞；部分干细胞经过诱导可分化成全身的不同组织或器官，说明这些细胞具有____性。在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是__________。

(2)该过程中甲和乙细胞可经过生物诱导剂______的作用形成丙细胞。取一个丙细胞，放在含大量失去____的小鼠成纤维细胞的特定培养体系中培养，最后产生大量的细胞群，这种方法为____法。 

(3)下列关于经③和④过程得到单克隆抗体的叙述，错误的是_____。

A.该过程应用了细胞膜具有流动性的原理    B.该过程应用了动物细胞融合和动物细胞培养技术

C.丙细胞要具有分泌多种抗体的能力   D.丙细胞的形成先通过筛选得到杂交瘤细胞，再进行抗体检验

苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。请回答下列问题:

（1）苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K₂HPO₄、MgSO₄、苯酚和水，其中可作为碳源的有_____________。

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_____________，以达到富集苯酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____________。

（3）下图为连续划线法示意图，在图中_____________ （填图中序号）区域更易获得单菌落。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________________（单位省略）。

如果废水为50 mg/ L 苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释____________（填序号：①5   ②10   ③20）倍后，再进行比色。

金黄色葡萄球菌是一种耐高浓度食盐的致病菌,为探究某天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,某兴趣小组利用高压蒸汽灭菌锅(如下图)等器材进行了相关实验。请分析回答下列问题:

（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是          ；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该          。

（2）上图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是     。(填序号)

①安全阀、放气阀、压力表              ②放气阀、安全阀、压力表

③安全阀、放气阀、温度表              ④放气阀、安全阀、温度表

（3）下列关于高压蒸汽灭菌法的叙述错误的是         。

A.将装有培养基的灭菌包装入灭菌锅时,注意不要太挤,以免因影响蒸汽流通从而影响灭菌的效果

B.拧紧固定盖子的螺栓,要同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,不漏气

C.加热初期,必须把灭菌锅内的冷空气排尽

D.灭菌结束后,切断热源,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品

（4）将灭菌后的多组培养基均分为甲、乙两组,甲组加入适量的天然植物抗菌液,乙组加入等量的蒸馏水。将金黄色葡萄球菌菌液进行一系列的         后,采用       法分别接种到甲乙两组对应的培养基上,在适宜条件下培养一段时间后,观察比较不同组别的菌落数。由于金黄色葡萄球菌具有致病性,因此严格进行无菌操作,一方面是防止培养基被外界环境中的杂菌污染,另一方面也是为了防止         。

（5）在基本培养基中加入         可筛选出金黄色葡萄球菌。按照培养基的功能分类,

该培养基属于         培养基。

影响酱油卫生指标的细菌主要有耐热的芽孢杆菌和耐盐菌。某生物兴趣小组欲从酿制的酱油中筛选出耐盐菌，请结合所学知识回答下列问题：

（1）在筛选过程中，应将酱油接种于含有_________的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于______培养基。

（2）对该培养基灭菌的方法是_____________，接种过程需在__________________附近进行。

（3）若要统计活的耐盐菌的数目，把酱油接种到培养基上常采用的方法为__________；统计结果一般用菌落来表示，统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________，原因是_________________________________。

（4）在纯化耐盐菌的过程中，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是______________________________

下表是微生物培养基成分。请据图回答:

(1)上述培养基可培养的微生物类型是             。

(2)此培养液能否用于植物的无土栽培？          ，理由是                   。若用于无土栽培，还应注意培养液中          的含量。

(3)若除去成分①，加入蔗糖，该培养基可用于培养                   。

(4)表中营养成分共有        类。

(5)不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是                 。

生物技术实践]某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）.培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答：

（1）培养基中加入尿素的目的是        ，原理是                                  。

（2）实验需要振荡培养，原因是                             。转为固体培养时，常采用                的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体。其中需要灭菌是                 （填序号）。

（4）分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落.甲同学实验结果差异的原因可能有        

①取样不同    ②培养基污染    ③操作失误    ④没有设置对照

（5）以上表培养基培养“目的菌”后，加入指示剂酚红后变红色，说明“目的菌”能分解尿素。得出该实验结论的理由是                    

（6）为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37°C恒温培养箱中培养24h～48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中           倍的稀释比较合适。

（2）图中所示方法为稀释培养法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是___________________。

（3）消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死，若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量，则在操作步骤上应做什么改动？________________________________    ___。

（4）人们利用酵母菌酿制果酒、醋酸菌制醋、毛霉制作腐乳，以及乳酸菌制作泡菜。

①没有经过严格的灭菌过程，却能够获得传统发酵产品。请说出两点理由：_________________________________；___________________________________。

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有：高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和________________。

(2)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______________进行操作。接种后的培养皿____________于37℃的________________中培养。

(3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于____________培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的____________使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力______________。

(4)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数( )

A．多     B．少    C．相等      D．几乎为零

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等。某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如下图。（注:培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，获得纯净培养物的关键是                    。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________、     、     和     等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。