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            • 1. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解,回答下列问题

              (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中葡萄糖苷酶可将___________。纤维素分解菌的筛选方法叫_________法。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_________。

              (2)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲,乙两种培养(成分见下表);培养基甲______(填"能"或"不能")用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是______________。



              (3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高________的利用率。

              (4)在用稀释涂布平板计数法对纤维素分解菌数目进行统计时,统计的菌落数往往比活菌的实际_______________________。如果探究温度对纤维素酶活性的影响,应该保持______________、______________等不变(至少答两项)

            • 2. 苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1) 酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有_______。 


              (2) 将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐______,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步_____,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加____。 

              (3) 图为连续划线法示意图,在图中____(填图中标号)区域更易获得单菌落。 


              (4) 采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中15号比色管的苯酚浓度应分别为____________。 

              管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度/(mg·L-1)

               

               

               

               

               

              1


              如果废水为50 mg·L-1苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释____(填标号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。 

            • 3.

              某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

              (1)培养基中加入化合物A的目的是筛选_  _______,这种培养基属于________培养基。

              (2)目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____  ____,实验需要振荡培养,由此推测目的菌的代谢类型是异养________型。(填“需氧”或“厌氧”)

              (3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液,接入新的培养液中连续培养,使目的菌的数量________。(两空均填“增加”或“减少”)

              (4)在上述实验操作过程中,获得纯净目的菌的关键是防止____            ___。

              (5)转为固体培养基时,常采用                        进行接种,所用的接种工具分别是________________和               。

              (6)实验结束后,使用过的培养基应该进行__________处理才能倒掉,以防止微生物的扩散。

              (7)通常情况下,培养基用                  方法灭菌,培养皿用         灭菌。待培养基冷却到        ℃(填20、30、40、50)左右时,在                     附近倒平板,等平板冷却凝固后将平板倒置,可以防止                     ,以免造成污染。
            • 4. 腐乳是我国独特的传统发酵食品,是用豆腐发酵制成,民间老法生产腐乳均为自然发酵,现代腐乳生产多采用优良的毛霉菌种进行发酵。现代化生产流程如下:

              (1)毛霉的生长需要豆腐提供水、无机盐、________________四大类基本营养物质。此外,还需要一定的温度、湿度等环境条件。

              (2)民间制作腐乳时__________(填“需要”或“不需要”)灭菌,发酵好的豆腐上布满了菌落,这些菌落___________(填“属于”或“不属于”)同一物种。

              (3)流程中扩大培养时使用的培养基与毛霉菌种分离时使用的培养基最大的区别是后者培养基中加入了________________________。

              (4)当豆腐上长出毛霉后,对豆腐要进行____________________。腐乳制作的后期要加入酒精和多种香辛料配制的卤汤,酒精的浓度要控制在12%,原因是______________________________________________________________________。

            • 5.

              为获取可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌,研究人员进行了如下实验:

              ①制备含3%NaCl的固体培养基,以及含3%、5%和7%Nacl以高盐度工业废水中有机物为碳源的液体培养基;

              ②将高盐度废水采用平板划线法接种到含3%NaCl的固体培养基,如图一。然后置于适宜条件下培养一段时间,观察形成的菌落特征;

              ③将分离纯化后的菌株接种到固体斜面培养基上,适宜条件下培养适当时间,将试管置于4℃冰箱中保藏待用;
              ④取固体斜面上的菌株制成菌液,取等量菌液,分别加入到步骤①中制备的3组液体培养基中摇床培养35小时,定时取样统计活菌数目。测定结果如图二所示。

              回答下列问题:
              (1)配制培养基时,灭菌、添加NaCl溶液和调节pH的先后顺序是________________________。
              (2)步骤②平板划线操作过程中,第一次划线前灼烧接种环的目的是防止杂菌污染,第二次及之后的几次划线前灼烧接种环的目的是________________。完成图一所示操作,至少需要灼烧接种环__________次。
              (3)步骤④中常采用_____________法统计活菌数目。直接从静置的培养液中取样计数的做法是错误的,正确的操作是_____________________________________。若每种浓度设3个重复实验,每次统计活菌数目时,需要从_____________个培养瓶中取样。

              (4)由图二可知,该耐盐菌最适合处理含________(浓度)NaCl的废水。用该耐盐菌处理较高盐度工业废水时,需要_________________(合理措施),才能达到理想效果。

            • 6.

              人们的日常生活与发酵技术密切相关。柿子经过发酵可制成柿子醋,以下是柿子醋制作的流程:柿果→挑选→清洗→去皮→去核→脱涩处理→切块→压榨→柿汁→灭菌→酒精发酵→醋酸发酵→灭菌→陈酿→淋醋→过滤→成品。请回答:

              (1)脱涩过程可以用成熟的苹果、梨等水果释放的____________(气体)促进柿子成熟。

              (2)将压榨后的柿汁加热到80℃保持10~20分钟的目的是                                      。酒精发酵可添加活性干酵母进行,发酵的原理是                                                                                           (写出反应式)。

              (3)若醋酸发酵时需扩大培养醋酸菌种,实验室常用的接种方法是____________和______________。接种前应对培养皿、接种环和培养基进行灭菌,方法分别是​                                      ,接种时应在火焰附近进行,同时需设置空白培养基做对照,原因是                                                                                                                  

            • 7.

              尿素是一种重要的农业氮肥,不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。回答下列问题:

              成分

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              含量

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              (1)该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供_________________。

              (2)该培养基可以选择出分解尿素的细菌,原因是___________________________。

              (3)某同学用0.1ml的稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数(取10克该土壤加90ml无菌水制成稀释液)。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为:231、212、256,则每克该土壤样品中的菌落数为___________。

              (4)若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,可以向培养基中加入__________________。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中pH升高,pH升高的原因是__________________________。

              (5)细菌的数目可以通过滤膜法来测定,例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,在该培养基上,大肠杆菌的菌落呈现__________,根据培养基菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。

            • 8. 回答下列(一)、(二)小题:

                  (一)要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种,一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题:

                  (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养,一般用LB培养基,在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是__________,为调节渗透压,要加入一定量的___________。为进行大肠杆菌的分离,还要加入琼脂配制成固体培养基,并进行倒平板的操作。

                  (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________,为此,必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用_____________________法灭菌,接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时,除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外,还必须_________________________,以防止空气中的杂菌污染。

                  (3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基,接种后将培养基置于37℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离时一般在固体培养基上采用____________法,并将培养皿_______________状态。

                  (二)科学家将蜘蛛的蛛丝基因导入山羊体内,创造出转基因山羊,使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。生产原理如下图。请回答:

                  (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____________。如果选取的受体细胞为体细胞,当在培养过程中出现接触抑制现象时,需要进行____________培养。要使重组细胞具有发育的全能性,乙过程需要的技术操作是____________。

                  (2)下列关于丙过程的叙述,正确的是______。

                  A.该过程为动物细胞培养,目的是获得更多的重组细胞

                  B.该过程所用培养液的成分往往是相同的

                  C.该过程在无菌条件下进行,需要提供CO2来调节pH

                  D.通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

                  (3)为了快速繁殖转基因山羊,还可在丁过程前对早期胚胎进行____________,经培养后再分别移植到____________________的代孕母羊的相应部位。

            • 9. 橙子的果肉可供食用或制作果酒等,皮可用于提取精油,请回答下列相关问题:

              (1)利用橙子的果肉制作果酒时,酵母菌能将葡萄糖等糖类在________________等条件下转化成酒精,另外发酵装置应定时________________。

              (2)将等量的酵母菌接种到几组相同的培养基,相同时间后,可通过比较实验前后________进行发酵能力的测试。

              (3)某同学在制作果酒之后,欲进一步制作果醋,他先在有氧条件下接种优良的醋酸杆菌,再持续通入无菌空气,进一步发酵几乎未能得到果醋。原因最可能是_________________。

              (4)研究发现橙皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,如图是提取橙皮精油和乳酸菌素及抑菌实验的示意图,请据图回答:

              ①橙皮易焦糊,不适用于提取橙皮精油的方法是________________。

              ②筛选乳酸菌A时;所用培养基须经________法进行灭菌。

              ③图中进行抑菌实验时,接种的方法最可能是________________,最终可通过________________来比较橙皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

            • 10. [生物——选修l:生物技术实践](15分)

              将没有吃完的西瓜,盖上保鲜膜后放入冰箱,是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上,有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液,研究细菌的种类和数量。

              (1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基,配制的培养基一般都含有水、碳源、                   。一般采用            法对培养基进行灭菌。

              (2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板           (填“正置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用          法接种。接种时,为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在         附近进行。

              (3)在培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,说明西瓜的浸出液中有                    (填“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多,说明西瓜被细菌污染的程度越         (填“高”或“低”)。

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