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            • 1． 回答与果胶和果胶酶有关的问题：
              （1）通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为______。
              （2）为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行______。
              （3）在某种果汁生产中，用果胶醇处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使______。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入______使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。
              （4）常用固定化果胶醇处理含果胶的污水，其主要优点有______和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有______和______。
              难度：较易
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            • 2． 回答下列与细菌培养相关的问题。
              （1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是______（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是______。硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够”或“不能”）生长，原因是______。
              （2）用平板培养细菌时一般需要将平板______（填“倒置”或“正置”）。
              （3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是______。
              （4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过______处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
              难度：较易
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            • 3．
              将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。
              回答下列问题：
              （1）M培养基着用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制 ______ 的生长，加入了链霉素的培养基属于 ______ 培养基。
              （2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有 ______ （答出两点即可）。氮源进入细胞后，可参与台成的生物大分子有 ______ （答出两点即可）。
              （3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 ______ 。
              （4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
              甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133；
              乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。
              有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是 ______ 。
              难度：中等
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            • 4．
              为生产具有特定性能的α-淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因（1656个碱基对），利用基因工程大量制备α-淀粉酶，实验流程见右图。请回答下列问题：

              （1）利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前，需先获得细菌的 ______ 。
              （2）为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的 ______ 端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的是 ______ 。
              （3）进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中 ______ 的设定引物有关， ______ 的设定与扩增片段的长度有关。（填序号）
               ①变性温度 ②退火温度  ③延伸温度 ④变性时间 ⑤退火时间  ⑥延伸时间
               （4）下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：

              图中虚线框内mRNA片段包含 ______ 个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有 ______ 种。
              （5）获得工程菌表达的α-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下：
              缓冲液 50mmol/L Na2HPO4-KH2PO4 50mmol/L Tris-HCl 50mmol/L Gly-NaOH
              pH 6.0 6.5 7.0 7.5 7.5 8.0 8.5 9.0 9.0 9.5 10.0 10.5
              酶相对活性% 25.4 40.2 49.8 63.2 70.1 95.5 99.5 85.3 68.1 63.7 41.5 20.8
              根据上述实验结果，初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为 ______ 。
              难度：较易
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            • 5． (12分)[生物――生物技术实践]


              乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

              产乳糖酶微生物L的筛选 产乳糖酶微生物L的培养 乳糖酶的提取纯化 乳糖酶的固定化

              (1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用          作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是            。从功能上讲,这种培养基属于              。 

              (2)培养微生物L前,宜采用            方法对接种环进行灭菌。 

              (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越              。 

              (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的            确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括              、               、离子吸附法及交联法等。

              难度：中等
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            • 6． 回答下列有关微生物的问题．
              霍乱弧菌（如图1）经口感染，通过胃到达小肠，在小肠黏膜细胞的表面生长繁殖并产生霍乱肠毒素，后者导致感染人群腹泻甚至死亡．

              （1）霍乱弧菌能穿透粘液层（分布于小肠黏膜细胞表面）通常借助于______．
              A．肠道的蠕动　　 B．消化液的流动　　 C．细菌鞭毛的运动　　 D．小肠上皮细胞微绒毛的摆动
              用含硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆酸纳、蔗糖的TCBS培养基（pH8.6）能从天然样品中有效地分离出霍乱弧菌．
              （2）这种TCBS培养基属于______．
              A．酸性通用　　   B．碱性通用　     　C．酸性选择　      　D．碱性选择
              研究显示、霍乱肠毒素为蛋白质，其编码基因位于CTX噬菌体基因组中．无毒型霍乱弧菌经CTX噬菌体感染后，会转变为产毒素的菌株，且其子代细菌即便在无噬菌体感染的条件下，同样能稳定维持其产毒素特性．
              （3）造成霍乱弧菌这一特点的机制可能是______．
              A．霍乱肠毒素在霍乱弧菌细胞分裂时分裂子代细胞
              B．霍乱肠毒素能选择性杀死不含毒素编码基因的霍乱弧菌
              C．CTX噬菌体感染霍乱弧菌后增殖了大量且稳定的噬菌体
              D．CTX噬菌体在感染霍乱弧菌期间将其基因组插入至宿主基因组上
              （4）不食不洁生水和生贝壳类海产品是防止霍乱发生措施之一，这属于传染病预防措施中的______．
              （5）图2中，能准确反映霍乱弧菌疫苗接种者血清中抗霍乱弧菌抗体的浓度随时间变化趋势的是______．
              难度：中等
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            • 7． 天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如图1．

              （1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶 ______ ．
              （2）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌．在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭．通气能提高 ______ 的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物．
              （3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天．工艺如图2．

              ①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如图．据图3分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是 ______ ．

               ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因．发酵过程中，发酵缸中 ______ 层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸．
              ③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的 ______ ，淘汰了部分乳酸菌种类．
              难度：较易
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