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            • 1. 已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。
              Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。
              Ⅱ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。
              Ⅲ号培养基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)。
              回答下列问题。
              (1)在Ⅰ号培养基中,为微生物提供氮源的是______。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是______。
              (2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会______,其原因是______。
              (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是______。
              (4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供______和______。
            • 2. (12分)现有一种细菌M,能够合成某种酶,并能分泌到细胞外。为了研究其培养时间与细胞数、细胞外酶浓度和总酶浓度的变化关系,请根据以下提供的实验材料写出实验思路,并预测实验结果。


              实验材料:若干个培养瓶、培养液、细菌M

              (要求与说明:实验仅设一组;实验仪器、试剂、用具及操作不作具体要求;实验条件适宜)

              请回答:

              (1)实验思路:


              (2)预测实验结果(设计一个坐标系,并绘制预测的细胞数、细胞外酶浓度和总酶浓度的变化曲线):

               

               

               

               

               

              (3)测定总酶浓度时,应对细胞做 处理。 

            • 3. 为了探索海藻酸钠固定化对绿球藻生长的影响,以及固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,科研人员用筛选到的一株绿球藻进行试验,流程及结果如下.请回答下列问题:

              (1)实验中的海藻酸钠作用是 ______ ,CaCl2的作用是 ______ .
              (2)为洗去凝胶球上残余的CaCl2和其他污染物,并保持绿球藻活性,宜采用 ______ 洗涤.图1中1.0%海藻酸钠组培养24h后,移去凝胶球,溶液呈绿色,原因是 ______ .
              (3)为探索固定化藻对含Zn2+污水的净化作用,映选用浓度为 ______ 海藻酸钠制备凝胶球.
              (4)图2中空白凝胶球组Zn2+浓度下降的原因是 ______ .结合图1和图2分析,固定化藻的实验组24~48h间Zn2+浓度下降速度较快的主要原因是 ______ ;72~96h间Zn2+浓度下降速度较慢的原因有 ______ .
            • 4. 回答下列有关微生物和酶工程的问题.
              枯草芽孢杆菌盛产蛋白酶,后者在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值,且已大规模产业化应用.
              (1)在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时,培养基营养成分应包括水和______(用序号组合回答).
              ①淀粉  ②蛋白质   ③生长因子  ④葡萄糖   ⑤无机盐
              为筛选枯草芽孢杆菌的蛋白酶高产株,将分别浸过不同菌株(a~e)的分泌物提取液及无菌水(f) 的无菌圆纸片置于含某种高浓度蛋白质的平板培养基表面;在37℃恒温箱中放置2~3天,结果如图1.

              (2)大规模产业化首选的菌株是______;菌株b提取物周围没有形成明显清晰区的原因是______.
              图2显示枯草芽孢杆菌的蛋白酶和其它酶的热稳定性数据,即酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其酶活性.在该蛋白酶的工业化生产过程中,通常需对发酵液在60~70℃保温一定时间,再制备酶制剂.
              (3)在60~70℃保温一定时间的作用是______.
              A.诱导蛋白酶的热稳定性
              B.有利于发挥蛋白酶的最佳活性
              C.裂解枯草芽孢杆菌细胞
              D.大幅度降低发酵液中其他酶的活性
              (4)枯草芽孢杆菌蛋白酶制备的合理工艺步骤应为______(选择正确的序号并排序).
              ①过滤   ②干燥   ③破碎   ④浓缩.
            • 5.
              人血清白蛋白(HSA) 具有重要的医用价值,只能从血浆中制备.如图1是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径.

              (1)为获取HSA基因,首先需采集人的血液,提取 ______ 合成总cDNA,然后以cDNA为模板,采用PCR技术扩增HSA基因.如图2中箭头箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向.

              (2)启动子通常具有物种及组织特异性,构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体,需要选择的启动子是 ______ (填写字母,单选).
              A.人血细胞启动子   B.水稻胚乳细胞启动子  C.大肠杆菌启动子 D.农杆菌启动子
              (3)利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质,其目的是 ______ .
              (4)人体合成的初始HSA多肽,需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性.与途径Ⅱ相比,选择途径I获取rHSA的优势是 ______ .
              (5)为证明rHSA具有医用价值,须确认rHSA与 ______ 的生物学功能一致.
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