知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

1．微生物的分离和培养
废水中含有多种难降解的有机污染物，研究者利用培养基分离出能降解部分有机污染物的微生物，如图1所示。

（1）据题意分析，图1中的培养基类型与接种方法分别是______
A．通用培养基，划线法
B．通用培养基，涂布法
C．选择培养基，划线法
D．选择培养基，涂布法
（2）为鉴定图1中微生物的种类，下列可作为鉴定依据的有______（多选）
A．菌落的大小 B．菌落的表面 C．菌落的颜色 D．菌落的形状
为了将图1培养基中的真菌与细菌分离，新制了 PDA 培养基（含马铃薯、葡萄糖、琼脂、蒸馏水）并加入青霉素（抑制细菌细胞壁的合成）。接种时用绒布轻按图1培养基表面，使绒布面沾上菌落，再将绒布轻按在新制培养基表面，培养结果如图2所示。
（3）比较图1、2可知，图1中菌落______（填编号）为细菌，判断理由是______。
（4）图2中出现菌落5的原因不可能不可能是______
A．绒布未灭菌
B．被抗青霉素细菌污染
C．培养基灭菌不彻底
D．由无菌培养基自然发生
经分离纯化后分别测定真菌、细菌对废水中有机污染物的降解作用，如图3所示。进一步研究发现，真菌能将所产生的降解酶分泌到胞外起作用，而细菌不能分泌，降解酶只在胞内起作用。
（5）据图3，说明两种菌降解有机污染物效率的差异。______
（6）从细胞器角度，分析说明细菌不能向胞外分泌降解酶的原因。______

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2．环境污染物多聚联苯难以降解，受其污染的土壤中常有重金属污染同时存在。研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。回答下列问题：
（1）为了从富含多聚联苯的环境中分离联苯降解菌，培养基中加入多聚联苯作为______，该培养基属于______（填“选择”或“鉴定”）培养基。用平板划线法纯化该细菌时，第2次划线及其以后划线总是从上次划线的末端开始是为了______。
（2）为了能够反复利用联苯水解酶，可以采用______技术，该技术的另一个优点是______。
（3）若从联苯降解菌中分离并得到纯度较高的联苯水解酶，纯化该酶常用的方法是______，采用该方法先分离出分子质量______的蛋白质。
（4）如图实线表示联苯水解酶催化的反应速度与酶浓度关系，虚线表示在其他条件不变情况下，底物浓度增加一倍，反应速度与酶浓度的关系，能正确表示两者关系的是______

难度：较易

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3．科学家发现土壤中的解磷微生物可通过分泌解磷酶将土壤中难溶磷酸盐转化为植物易吸收的可溶性磷，为开发利用沿海土壤提供了思路。如图是研究者从土壤中筛选具有较强解磷能力菌株过程中的一些操作，请回答下列问题：

（1）分离解磷菌株需配置合适的培养基，图①所示操作之前，应对培养基进行的正确操作步骤是______。
（2）图②所示接种方法为______，接种后的平板在培养时的放置应如图______（选填“a”或“b”）所示。这样放置的原因有______（多选）。
A．防止水分过快蒸发，导致培养基干裂
B．防止皿盖上的冷凝水滴落，造成培养基污染
C．有利于观察计数，辨别菌落特征
D．移动培养皿时，不容易造成皿盖打开而暴露培养基
（3）研究者对筛选得到的3株细菌分别采用了固体平板解磷能力测定法和液体培养基解磷能力测定法，结果如表1和表2。
表1

菌株菌落直径d/mm 透明圈直径D/mm

A 18 36

B 31 59

C 19 57

表2

菌株原液体培养基含
磷量/（mg•mL^-1）培养后含磷量
/（mg•mL^-1）

A 0.20 0.127

B 0.20 0.165

C 0.20 0.051

固体平板解磷能力测定法测量菌落和透明圈直径时应______（选填“打开皿盖测量”“直接在皿盖上测量”或“直接在皿底测量”）。结合表1和表2分析得到，解磷能力最强的菌株是______，理由是______。
（4）科研者选取能力最强的解磷菌放入锥形瓶中继续扩大培养，一段时间后欲通过稀释涂布平板法观察菌落并计数，他们从中挑选了以下三个平板，其中说明稀释操作比较成功、并能够用于菌落正确统计的平板是______（填字母）。

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4．科研人员利用腐烂的水果筛选产果胶酶的细菌，并对果胶酶进行分离纯化请回答：
（1）通过以______为唯一碳源的选择培养基，筛选出可降解果胶的细菌。观察筛选菌株的菌落的______（回答两点）等特征进行物种鉴定由于野生细菌自身产酶能力有限，可通过______（回答两点）等育种方式，得到酶活力较高的优良菌株。
（2）将含有高产果胶酶的分解菌培养液进行适度离心后，______即为产果胶酶菌株发酵产生的粗酶液。经初步纯化后，可通过凝胶色谱法进一步去除杂蛋白，在层析柱中相对分子质量较大的蛋白质移动速度______（填“较快”或“较慢”）。
（3）将纯化后的果胶酶固定化，用于果汁工业生产，与游离酶相比，具有的优点是______（回答两点）。

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5．生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮用水水质标准（GB5749-85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠菌群不得大于3个/L。
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为______。
（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？______。为什么？______。
（3）如分别取0.1 mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为______。
（4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用______法灭菌，______（可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。
（5）如果要用滤膜法测定大肠杆菌的数目，将已知体积的水过滤后，将滤膜放在______培养基上培养。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现______色，可以根据菌落数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。

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6．常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。回答下列问题：
（1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是______（填序号）。
①酒精灯　②接种环　③高压蒸汽灭菌锅　④培养皿
（2）将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中，在______（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
（3）测定微生物数量常用的方法有活菌计数法和______，前者的统计结果一般用______而不是用活菌数来表示。
（4）纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明______。
（5）生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在______（填“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A．一般来说，酶不适合采用______法固定化。

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7．分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基，成功筛选出能产生纤维素酶的微生物。回答下列问题：
（1）有些微生物能降解纤维素，有些微生物则不能，原因是前者能产生______，一般认为它至少包括三种组分，即______。
（2）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的______，及时对培养基进行分装，并进行______灭菌法灭菌。
（3）用来筛选降解纤维素的微生物的培养基含有硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、其作用是______、______。（答出两点即可）
（4）为在培养基表面形成单个菌落，若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是______。若用平板划线法进行接种，在第二次以及其后的划线操作时，需要从上一次划线的末端开始划线，原因是______。

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8．某种产脂肪酶菌常被用作饲料添加剂，如表是从土壤中初筛该菌的培养基配方，请回答下列问题：

（NH₄）₂SO₄ NaCl MgSO₄•7H₂O K₂HPO₄ 1%橄榄油蒸馏水 pH

0.1g 0.05g 0.01g 10g 4ml 定容至100ml 7.0g

（1）在上述培养基中，榄油能为产脂肪酶菌提供______。为增大产脂肪酶菌的浓度，需用该培养基进行富集培养，富集培养基宜选用液体培养基的原因是______。
（2）用涂布平板法分离产脂肪酶菌时，在上述培养基的基础上，还应加入______和溴甲酚紫（碱性条件下呈紫色，在酸性条件下为黄色）。在平板上产脂肪酶菌菌落的周围会出现黄色圈，原理是______。筛选时常选择菌落大黄色圈直径大的菌落，这说明此菌落______。
（3）菌落是指由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体。在平板上，有的菌落较小，呈乳白色，表面光滑，无丝状物，这些菌落可能为______（填“细菌”或“霉菌”）。有的菌落连成一片，形成原因最可能是______。
（4）研究发现在饲料中添加产脂肪酶菌剂后，动物的体重明显增加，这说明______。

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