为分离纯化优良酵母菌品种，采用平板划线法进行如下操作，排序最合理的是

下图表示微生物实验室培养中的部分操作。请分析回答：

(3) 甲同学按步骤④进行操作，据图分析，采用的接种方法称为          ，其操作的两处不当之处分别是         、         。在老师的指导下，该同学按正确的方法重新操作，则经培养后菌落的分布情况最可能是下图中的         。

(4) 乙同学尝试采用不同于甲同学的接种方法进行实验，其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示，推测该同学接种时可能的操作失误是        。

为了调查某城市自来水的水质情况，某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌进行了分离和含量测定，请回答下列问题：

（1）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，每次划线之前都要对接种环进行灭菌目的是_____________。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是____________________。

（2）在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，结果发现空白对照组的平板上出现了5个菌落，请分析说明可能的原因（写出两点）：①________；②_______。

（3）检测自来水中大肠杆菌的数量，可采用稀释涂布平板法，选用__________鉴别培养基。该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因___________而遗漏菌落的数目。

（4）稀释涂布平板法测定细菌数量，实际活菌数量要比测得的数量______，因为________。

培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础，下列有关微生物培养及培养基的描述错误的是

某些土壤细菌可将尿素分解成CO₂和NH₃，供植物吸收和利用。回答下列问题：

（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO₂作为碳源，原因是________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_______________________。

（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择____________________（填“尿素”“NH₄NO₃”或“尿素+NH₄NO₃”）作为氮源，不选择其他两组的原因是________________________。

（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH₂PO₄和Na₂ HPO₄，其中KH₂PO₄和Na₂HPO₄即可构成缓冲液，维持培养基的_________相对稳定；又能为微生物生长提供______________。

（4）筛选出的能分解尿素的细菌可用含有____________指示剂的培养基鉴定，从功能上划分该培养基属于______培养基。这是由于尿素被分解产生的 ______使pH升高，指示剂将____________，且变色区域越大，表明该菌株分解利用尿素的能力 _______。

泡菜是很多人喜爱的美食，泡菜的制作过程离不开乳酸菌。请回答以下相关问题。

(1)制作泡菜时可用陈年泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。首先用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是________。制作泡菜时常用比色法对亚硝酸盐含量进行测定，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色化合物。

(2)分离纯化所用的固体培养基中往往加入碳酸钙，推测其作用有___________和中和产生的乳酸(或酸)。分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。

(3) 要测定泡菜液中乳酸菌的数量，可以用抽样检测法或________法，用后一种方法接种培养后可得到下图中_______（A / B）所示的结果。

下列关于微生物的培养和分离实验的叙述，错误的是

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的培养基中应加入_____作为碳源，从功能上讲，该培养基属于

_________培养基。②中不同浓度碳源的培养基________ (填“影响”或“不影响”)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用______________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于____________________________________________________；使用______________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是__________________________________________________________。

(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？

_______________________________________________________（至少填两种方法）。

选修1：生物技术实践]

 临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。                           

回答下列问题：

（1） 为了从样本中获取致病菌菌落，可用_______法或_________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2） 取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3） 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______（填“敏感”或“不敏感”）；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____（填“敏感”或“不敏感”）；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。

为探究大肠杆菌CV101菌株和CV103菌株的营养需求，某团队在营养成分相同的含醋酸盐的培养液中分别接种CV101菌株和CV103菌株，并置于相同且适宜的环境中培养，每隔一段时间统计两种菌株的生长状况。实验数据如下图所示，回答下列问题：

（1）醋酸盐培养基从物理性质上来看属于________培养基，该培养基主要应用是________；从功能上来看属于________培养基。

（2）由图可知：更适应醋酸盐培养基环境的菌株是________，其依据是________。

（3）若要统计培养30小时后醋酸盐培养基中的CV101活菌数，为保证能在固体培养基上获得单个菌落，接种前，需取1mL该菌液进行________处理。