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            • 1. 由于工作和生活的需要,每年都会产生大量的废纸,其主要成分是木质纤维.木质纤维可以转化为一种新的资源-乙醇.如图是工业上利用微生物有纤维素生产乙醇的基本流程.
              (1)从土壤中筛选能分解纤维素的微生物,需要在培养基中加入 ______ 作为唯一碳源.纯化菌种时,为了得到单一菌落,常采用的接种方法有两种,即 ______ 和稀释涂布平板法.
              (2)经过梯度稀释后,需将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解军的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊燃料是 ______
              (3)如上所述的筛选中获得了三个菌落,对它们分别培养,并完成环节②,三种等量酶液的活性 ______ (填“一定相同”、“不一定相同”或“一定不同”).影响酶活性的因素除了温度、pH还有 ______
              (4)如果想对酶液重复利用,可采用 ______ ______ 方法进行酶的固定化.如果固定酵母菌,通常用 ______ 法.
            • 2.

              下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( )。

              A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基
              B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理
              C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段
              D.分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源
            • 3.

              植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。刚果红(CR溶液)可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用含有CR的培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈 。

              为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了如下培养基(成分见下表):注:“+”表示有,“-”表示无。

               

              氨基酸

              无机盐

              纤维素粉

              琼脂

              CR溶液

              维生素

              培养基

              +

              +

              +

              -

              +

              +

              +

              (1) 据表判断,培养基      (“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是                                 ;配制培养基的步骤应为:称量、熔化、____ 、____ 、分装、___  、倒平板。 (2) 取土壤10g,放入无菌研钵中,注入无菌水5ml,并用无菌玻璃棒搅拌均匀备用。为了观察到透明圈,应该采用的接种方法是_____________  。为了获得单个菌落,应将提前准备的菌液进行___________。
              (3) 有同学在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落如图。图中降解纤维素能力最强的菌株是           

                (4) 教师用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度条件进行纤维素分解发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株        更适合夏季分解植物桔杆,理由是             

            • 4. 从土壤中分离以尿素为氮源的细菌,下列实验操作不正确的(  )
              A.将土壤用无菌水稀释,制备10-3~10-5土壤稀释液
              B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上
              C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌
              D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株
            • 5. 下列生物学实验操作,能够顺利达到实验目的是(  )
              A.在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单菌落
              B.在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通入无菌空气制作果酒
              C.土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌
              D.在分离土壤中的尿素分解菌实验中,采集的土样经高温灭菌后,可以用于制取土壤稀释液
            • 6. 下列关于微生物培养和利用的叙述,不正确的是
              A.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板
              B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步分开获得单个菌落
              C.含酚红的培养基可鉴别尿素分解菌
              D.菌种的临时保藏是将菌种接种于固体斜面培养基中,然后再放入 -20℃的冰箱中保存
            • 7. 农作物秸秆除了作为动物饲料,还可用于微生物发酵,获得燃料乙醇.回答下列问题:
              (1)纤维素分解菌能分泌纤维素酶,因此常用于作物秸秆的初期处理.纤维素酶主要包括的三种组分是 ______ ,其中能将纤维二糖分解成葡萄糖的是 ______
              (2)通常在的地方采集土样,用于实验室中分离纤维素分解菌,筛选纤维素分解菌时常采用 ______ 法,这种方法能够通过颜色反应来对微生物进行筛选.
              (3)若要对用于后期发酵的酵母菌进行计数,可在显微镜下用直接计数;若要测定活菌数量,可选用 ______ 法进行计数.某同学用0.1mL稀释液在稀释倍数为105的平板中测得菌落数的平均值为112,则每毫升样品中的细菌数是 ______ 个.
            • 8.

              下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )

              A.利用稀释涂布平板法可对微生物进行计数
              B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落
              C.在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌
              D.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌
            • 9. (19分)反刍动物,如牛和山羊,具有特殊的器官——瘤胃,在瘤胃中含有多种微生物,其中许多微生物能以尿素作唯一氮源。以下示意图是从瘤胃中分离出能够分解尿素的微生物流程。



              (1)进行①过程的目的是            ;②过程所使用的接种方法是             。用该接种方法对微生物进行计数时,统计的菌落数往往比活菌的实际数目             ,原因是                                  

              (2)从用途上来说,Ⅰ号培养基属于        培养基,制备该培养基的步骤是:计算→称量→溶化→               。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌,接触空气后会死亡,因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备Ⅰ号培养基外,还要提供       的条件。此培养条件也是        (填“果醋”或“果酒”)制作过程中需要的。

              (3)在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是    

              (4)以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后,加入             指示剂后变红色,说明“目的菌”能分解尿素。理由是                                    

              (5)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h-48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中          倍的稀释比较合适。假设每个平板分别接入0.1mL稀释液,据此可得出每毫升瘤胃液体中的活菌数为               个。

              稀释倍数

              103

              104

              105

              106

              107

              菌落数

              >500

              367

              248

              36

              18




            • 10. 请选出土壤微生物分离的正确操作步骤(  )
              ①土壤取样;
              ②称取0.5g土壤将其加入盛有50mL无菌水的锥形瓶中;
              ③吸取1mL进行平板涂抹;
              ④依次稀释至103、104、105、106、107
              A.①→②→③→④
              B.①→③→②→④
              C.①→②→④→③
              D.①→④→②→③
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