[生物—一选修l：生物技术实践]

 为了调查厦门自来水的质量情况，某研究小组对自来水水样中的细菌含量进行了测定，请回答下列问题：

 (I)在微生物的培养过程中，对培养基灭菌常用的方法是 。为防止冷凝水影Ⅱ向细菌的生长，需将培养皿     培养。

 (2)若小组采用平板划线法分离水样中的细菌，在培养基上共画了5个区域，则至少需要 次灼烧接种环。

(3)可通过滤膜法检测自来水中大肠杆菌的数量，将已知体积的水过滤后，将滤膜放在 培养基上培养。该培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外，还应提供____等基本营养成分。

(4)某同学采用稀释涂布平板法统计菌落数目，菌落分布如图所示 推测该同学可能的操作失误是____。

[生物——选修1：生物技术实践]

生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：

（2）实验需要振荡培养，原因是                  。转为固体培养时，常采用              的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体．其中需要灭菌是    填序号）．

（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．甲同学实验结果差异的原因可能有       （填序号）①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照

（5）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素．理由是                                       。

[生物——选修1：生物技术实践]

已知尿素分解菌合成的脲酶能将尿素分解成氨。回答下列问题：

(1)从土壤中分离尿素分解菌时，首先要进行选择培养，该过程使用的培养基中要添加____________作为唯一氮源；制备上述培养基时，在倒平板之前要进行灭菌处理，常用的灭菌方法是____________；而对接种环等金属用具常用的灭菌方法则是____________。

(2)接种尿素分解菌后的培养基需要倒置培养，原因是____________。若采用稀释涂布平板法检测土壤样液中的尿素分解菌含量，在涂布接种前，应随机选取若干个灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是____________；然后，将1mL样液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和60，据此可得出每升土壤样液中的活菌数为____________。

(3)鉴别培养基中是否存在尿素分解菌时，可在培养基中加入____________指示剂；如果有尿素分解菌存在，则培养基中该菌落的周围会出现红色。

下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_______________，因此需对培养基和培养皿进行_______，操作者的双手需要进行清洗和消毒。

（2）根据用途划分，该培养基属于_______培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培养基中__________换成尿素，若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红美蓝换成__________。

（3）若要统计大肠杆菌活菌数目，常用的方法是____________。统计结果往往比实际值偏___。原因是___________________________________。

【生物——选修1：生物技术实践】

某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________________作用；培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

  A.高压蒸汽  B.干热   C.添加抗生素  D.过滤   E.紫外线照射    F. 70﹪酒精浸泡

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数往往_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

回答下列问题：

(1)对土壤中分解尿素的微生物的分离过程如下：

第一步：土壤取样。取土样用的工具和盛土样的信封等在使用前都需要________(填“消毒”或“灭菌”)。

第二步：样品稀释。通常分离不同种类的微生物要采用不同的稀释度，原因是________。

第三步：微生物的培养与观察。将一定稀释度的样品接种在以尿素为唯一氮源的培养基上，并在适宜的条件下培养。分解尿素的微生物能在该培养基上生长繁殖，而________则不能生长繁殖。(注：实验中所用的培养基经检测符合要求，且均在无菌条件下操作)

(2)若对土壤悬液进行梯度稀释时，未经振荡而直接取上层悬液进行梯度稀释，用稀释倍数为10⁴的样液涂布到平板上进行培养和计数，统计出的菌落数往往比正确操作统计出的菌落数________。

(3)对土壤中分解尿素的微生物作进一步的鉴定

若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定，需在上表培养基配方中添加的物质是________、________。若分离得到的是尿素分解菌，则培养基中pH升高使酚红指示剂变为红色，pH升高的原因是________。

(4)分解尿素的微生物在生态系统中的作用是________。

35 近年来，由于食品安全、环境污染等问题的加重，胃癌的发病率不断增加。常见的切除、化疗、放疗等治疗手段对病人的身体副作用较大，而“生物导弹”(借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置)的定向治疗为胃癌患者带来了福音。下图是“生物导弹”——抗人体胃癌的单克隆抗体的制各过程。

回答下列问题：

(1)幽门螺旋杆菌的感染与胃癌的发生密切相关，幽门螺旋杆菌从细胞结构上与人体细胞相比，最显著的特点是________。

(2)从免疫学的角度分析，图中实验小鼠注射的甲是________，从小鼠的________(免疫器官)中可获得相应的B淋巴细胞。

(3)诱导细胞融合形成细胞乙的原理是________。若只考虑细胞的两两融合，理论上乙有________种类型，符合要求细胞的特点是________。

(4)丙需进行克隆化培养和专一抗体检测，经多次筛选后可获得数量较多的能分泌所需抗体的丁，细胞丁可在体外条件下大规模培养，也可以注射到小鼠________内进行体内培养，从而获得大量的单克隆抗体。该抗胃癌单克隆抗体与从动物血清中分离的抗体相比，最主要的优点是________。

乳酸杆菌常用于生产酸奶，牛奶的质量和乳酸杆菌的种类都会影响酸奶的品质，请回答下列问题：

(1)含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶的原因是________．

(2)在分离纯化优良菌种时制作的培养基中一般含有水、无机盐和________等营养物质，在此基础上，还需要满足乳酸杆菌生长对________以及氧气的要求．制作好的培养基需要进行灭菌，灭菌是指用强烈的理化因子杀死物体内外的微生物包括________．在接种前需要检测该同体培养基是否被污染，具体检测方法是________

(3)测定培养液中乳酸杆菌数量时可选用________法和活菌计数法进行计数；若采用活菌计数法计数，则要对样品进行________操作，为保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行计数．