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            • 1. 分离筛选降解纤维素能力强的微生物,对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义.研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株,并对筛选出的菌株进行了初步研究.
              (1)对培养基进行灭菌的常用方法是 ______ .为在培养基表面形成单个菌落,若以接种环为工具,则用 ______ 法进行接种.
              (2)先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株.再将初筛菌株接种到以 ______ 为唯一碳源的培养基培养2~5天,加入 ______ 溶液后,依据出现的颜色反应进行筛选,观察菌落特征并测量 ______ .同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中,恒温振荡培养8天,观察滤纸条的破损情况.结果见表.由表可知,8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,你的解释是 ______
              菌株编号
              检测指标
              1号 2号 3号 4号 5号 6号 7号 8号
              DP 5.91 1.73 6.54 1.53 3.23 1.76 7.29 1.34
              滤纸破损 +++++ +++ +++++ ++ ++++ +++ +++++ ++
              注:①DP=(D/d)2,其中d表示菌落直径(cm),D表示水解圈直径(cm)
              ②“+”为滤纸边缘膨胀;“++”为滤纸整齐膨胀并弯曲;“+++”为滤纸不定形;“++++”为成团糊状;“+++++”为半清状
              (3)为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果.分别用这三种菌株对秸秆进行处理,并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定.结果见如图.

              由图分析可知,三种菌株对 ______ 的降解最强,与第5天结果相比,第10天秸秆各组分中 ______ 的降解率变化最大.
            • 2. 随着全球环境污染严重,石油资源逐步减少,近年来乙醇等“绿色能源”的开发备受关注.科技工作者研制出利用秸秆生产燃料酒精的技术,大致流程如图所示.

              (1)若要从土壤中分离出能分解植物秸秆的微生物,培养基中的碳源是 ______ ,对该培养基可采取的 ______ 方法进行灭菌.
              (2)某同学对分离得到的微生物培养液进行数量测定,在稀释倍数为105对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为23.4,则每毫升样品中的细菌数是 ______ (涂布平板时稀释液的体积为0.2mL).
              (3)用上述方法测定目的菌的密度,实际活菌数量要比测得的菌落数量多,原因是 ______
              (4)上述流程图中,糖液发酵产生酒精需要的菌种是 ______ ,酒精是在目的菌的 ______ (结构)中产生的.
            • 3. 下列有关纤维素酶的叙述,正确的是(  )
              A.纤维素酶的化学本质是氨基酸
              B.纤维素酶包括C1酶、C2酶和葡萄糖苷酶等
              C.纤维素酶能与刚果红结合成红色复合物
              D.纤维素酶将纤维素最终分解成葡萄糖
            • 4. 利用纤维素解决能源问题的关键,是高性能纤维素酶的获取.为筛选能够高效分解纤维素的微生物,某研究小组进行了相关实验,实验步骤和结果见下表.请回答相关问题:
              试管号 1 2 3 4
              蒸馏水 1.4 1.4 1.4 (A)
              pH7.5缓冲液 (B) 0.2 0.2 0.2
              纤维素悬浮液 0.3 0.3 (C) 0.3
              微生物A提取液 0.1
              微生物B提取液 (D)
              微生物C提取液 0.1
              将上述四支试管放入37℃的水浴中,保温1小时.
              在上述四支试管中分别加人斐林试剂,摇匀后,热水浴加热约2min.
              观察结果 + +++ ++ /
              注:“+”的多少代表颜色深浅程度
              (1)表格中(A)(B)(C)(D)的值依次是 ______
              (2)三种微生物的提取液中含有纤维素酶,纤维素酶可以催化纤维素分解为 ______ ,与无机催化剂相比,纤维素酶催化效率更高的原因是 ______
              (3)本实验中的对照组是 ______ 号试管,实验中加入缓冲液的作用是 ______
              (4)上述结果表明:不同来源的纤维素酶,虽然酶蛋白浓度相同,但活性不同.若不考虑酶的最适pH和最适温度的差异,其直接原因最可能是 ______
            • 5. 土壤中的纤维素分解菌能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究与应用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等.从土壤中分离纤维素分解菌的实验流程如下:土壤取样→选择培养基→梯度稀释→鉴别培养基
              (1)纤维素酶是复合酶,由C1酶、Cx酶和 ______ 组成.
              (2)实验室中微生物筛选常应用选择培养基的方法,原理是 ______ .为分离得到纤维素分解菌,使用的培养基应以 ______ 作为主要碳源.
              (3)梯度稀释前进行选择培养的目的是 ______ ,这一步一般选用 ______ (填“固体”或“液体”)培养基.
              (4)梯度稀释后用 ______ (仪器)将菌种接种在培养基表面.
              (5)用 ______ 染色法鉴定纤维素分解菌时,培养基上的菌落周围会形成透明圈,其大小反映 ______
            • 6. 某生物兴趣小组尝试从土壤中筛选出纤维素分解菌(流程见下图),并进行计数实验,请回答下列问题:

              (1)培养皿灭菌常用的两种方法是 ______ ;为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该 ______
              (2)将采集的土样加入装有50ml以 ______ 为唯一碳源的 ______ (填“固体”或“液体”)培养基中,按步骤①→③进行培养,培养过程中需将锥形瓶放在摇床上震荡,一方面使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;另一方面能 ______
              (3)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是防止 ______
              (4)用平板划线法纯化菌株的过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是 ______ .采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是 ______ .实验结束后,使用过的培养基应该进行 ______ 处理后,才能倒掉.
            • 7.

              某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)                                           (   )

              A.2.34×108
              B.2.34×109
              C.234
              D.23.4
            • 8.

              下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是                                                       (   )

              A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
              B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
              C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水
              D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
            • 9. 下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述,不正确的是(  )
              A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置
              B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数
              C.在稀释度足够高时,所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同
              D.在相同培养条件下,未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染
            • 10.

              【生物一选修1:生物技术实践】

              某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO47H2O

              蛋白胨

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4 g

              2.1 g

              0.2 g

              1.0 g

              10.0 g

              1.0 g

              15.0 g

              (1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?________(填“能”或“不能”),原因是_________________。

              (2)培养基用________方法灭菌,培养皿用________方法灭菌,待培养基冷却到________℃(填“20”、“30”、“40”或“50”)左右时,在________附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止________,

               以免造成污染。

              (3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的________就能大约推测出样品中活菌数。

              (4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____________         ___。

              (5)实验中使用过的培养基及其培养物必须经过______  __处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。

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