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            • 1. 食物中的纤维素(即膳食纤维)对人体的健康有着重要的作用,其主要存在于蔬菜和粗加工的谷类中,有促进肠道蠕动、利于粪便排出等功能.但纤维素不能被人体吸收,因为人体缺乏分解纤维素的酶.某校生物兴趣小组开展了以下探究纤维素酶研究的工作,请回答下列问题:
              (1)纤维素酶是一种 ______ 酶,包括C1酶、Cx酶和葡萄糖昔酶三种,其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是 ______
              (2)自然界中不少微生物都具有分解纤维素的能力.要从土壤中筛选含有纤维素酶的微生物即纤维素分解菌,应在含有纤维素丰富的 ______ 土中采样.取回的土样中含有多种微生物,兴趣小组可在培养基中加入 ______ 来帮助筛选纤维素分解菌,目标菌落的特征是 ______ .为了提高酶的产量,研究人员欲利用诱变育种的方法获得能产生较多纤维素酶的菌株,把实验组的菌株接种于多个配制好的培养基中,同时接种对照组,相同条件下培养,观察两组菌株菌落周围的情况,选出 ______ (填“透明圈大的”“透明圈小的”或“无透明固的”)菌株即为所需菌株.
              (3)马、牛、羊等食草动物也具有消化纤维素的能力.若从马的胃中分离出纤维素分解菌,与从土壤中分离出的纤维素分解菌相比较,除了要调整培养基的pH外,还必须控制的条件是 ______ .配制好的培养基还应进行灭菌处理,一般采用的方法是 ______ .从功能上看,该培养基是 ______ 培养基.
              (4)对筛选得到的微生物还需进一步纯化培养以增加菌种的数量,为方便后续的计数,宜采用的纯化方法是 ______
              (5)用物理和化学的方法使筛选出的纤维素分解菌破裂后,用 ______ 的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开.分离出的纤维素酶还需进一步鉴定.纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖,根据这一特性,可加入 ______ 试剂并水浴加热,判断提取物是否起到了降解纤维素的作用.
            • 2.

              分离土壤中分解尿素菌的实验操作中,对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是

              A.制备浸出液的土壤取自土壤的表层
              B.涂布前玻璃刮铲未在酒精灯外焰上灼烧
              C.牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源
              D.接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
            • 3.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              下表为筛选分解尿素细菌的培养基,据此回答下列问题:

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              将上述物质溶解后,用自来水定容到1000mL

              (1)在该培养基中加入尿素的作用是________;琼脂的作用是________。从培养基的物理性质上分属于________培养基。

              (2)培养基的配制步骤:计算→称重→溶化→灭菌→倒平板。倒平板为什么将平板倒置?________。

              (3)用该培养基筛选出来的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们体内能合成________,在该培养基中加入________指示剂,如变红则说明筛选到了分解尿素的细菌。

              (4)统计菌落数目的方法可用间接计数法:土壤取样→________→微生物培养→观察记录结果→细菌计算。如C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数,则每克样品中的菌落数为________。

            • 4.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              已知硅酸盐细菌在甲(尿素为唯一氮源)、乙、丙培养基上均能生长。表1表示以尿素为唯一氮源的培养基的配方,表2是每种培养基上每个稀释度的菌落数及菌落直径。请回答下列问题:

              尿素为唯一氮源培养基的配方

              葡萄糖

              10克

              尿素

              9克

              K2HPO4

              0.2克

              MgSO4·7H2O

              0.2克

              NaCl

              0.2克

              CaCO3

              5克

              琼脂

              20克

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL

              表1

              培养基种类

              平均菌落数

              菌落直径

              10-3

              10-4

              10-5

              10-6

              32

              3

              2

              0

              1.0~2.0

              36

              6

              1

              0.6

              多数小于1.5

              50

              8

              5

              1.2

              多数大于1.5

              表2

              (1)表1从物理性质看属于________培养基,按用途划分属于培养基。

              (2)为统计硅酸盐细菌的数目,应采用________法进行接种,该方法的所有操作都应在________环境中进行。表2中,稀释度为________时,统计的结果较为可靠。

              (3)为检测培养基灭菌是否彻底,应进行的操作是________。由表2中的数据得出,用________培养基分离硅酸盐细菌的效果最好。

              (4)甲培养基中加入________指示剂,可根据指示剂变红的情况初步鉴定菌种分解尿素的情况。

            • 5. 鉴定分解纤维素的微生物要用刚果红染色,加入刚果红的操作可在(  )
              ①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时  ④涂布时  ⑤培养基上长出菌落时.
              A.①③
              B.②⑤
              C.③⑤
              D.④⑤
            • 6.

              关于生物体产生的酶的叙述,错误的是

              A.酶的化学本质是蛋白质或RNA
              B.脲酶能够将尿素分解成氨和CO2
              C.蛋白酶和淀粉酶都属于水解酶类
              D.纤维素酶能够降解植物细胞壁和细菌细胞壁
            • 7. 地球上植物产生的纤维素中有40%~60%被土壤中的某些微生物利用,从土壤中分离并研究这些微生物有利于人们更有效地利用植物秸秆中的纤维素.请回答:
              (1)分离纤维素分解菌,宜从 ______ 的土壤中取样.纤维素分解菌之所以能够利用纤维素,是因为其细胞内含有 ______
              (2)培养基除含有碳源、氮源、水和多种无机盐外,还应含有 ______ .其中,碳源主要为 ______ .对配制的培养采用高压灭菌,目的是 ______
              (3)纤维素分解菌纯化培养中常用的接种方法有 ______ .在添加刚果红的培养基上,可通过是否产生 ______ 来筛选纤维素分解菌.
              (4)从纤维素分解菌中提取纤维素酶,可采用 ______ 方法,如果采用 ______ 法对该细胞菌进行固定,也可不经过酶的提取和分离等繁操作即可实现纤维素发酵.
            • 8. 下列叙述中,正确的有

              ①对外植体消毒时既要考虑药剂的消毒效果,又要考虑外植体的耐受能力

              ②利用白色的大蒜根细胞作外植体培养成的新植株的叶片也是白色的

              ③稀释涂布平板法可获得单菌落,并能用于活菌计数。

              ④以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别能分解尿素的细菌

              ⑤醋酸菌只能利用葡萄糖进行醋酸发酵,尽管没有线粒体,但可以进行有氧呼吸。

              ⑥各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源、无机盐

              ⑦利用稀释涂布平板法测得的菌落数比活菌的实际数目低

              A.3项
              B.4项
              C.5项
              D.6项
            • 9. 下列关于微生物分离和培养的有关叙述,不正确的是
              A.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度
              B.测定土壤样品中的活菌数目,常用显微镜直接计数法
              C.提纯和分离严格厌氧型微生物,一般不用稀释涂布平板法
              D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源
            • 10.

              [生物—选修1:生物技术实践]某生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如表所示,实验步骤如图所示。请分析回答:

               

              (1)培养基中加入尿素的目的是     ,原理是                                  

              (2)实验需要振荡培养,原因是                           。转为固体培养时,常采用                的方法接种,获得单菌落后继续筛选。 

              (3)在实验过程中:①培养基、培养皿;②玻棒、试管、锥形瓶、吸管;③瘤胃中液体。其中需要灭菌是                 (填序号)。 

              (4)分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学实验结果差异的原因可能有              (填序号)①取样不同    ②培养基污染    ③操作失误    ④没有设置对照 

              (5)以上表培养基培养“目的菌”后,加入指示剂酚红后变红色,说明“目的菌”能分解尿素。得出该实验结论的理由是                                                 。 

              (6)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37°C恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中       倍的稀释比较合适。

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