高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示，请据图回答有关问题：

（1）过程①②合称为______________________。从功能上看，Ⅰ号培养基属于____________；该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

（2）对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中周围___

_________的菌落含有所需菌种。

（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______（填写字母）固定化工艺。

(1)实验中试管用滤膜封口，其目的是________________，A、C过程所采用的接种方法分别是___          _____，_____                      ___。

(2) E过程利用血球计数板制片时，操作步骤是___                      _____，多余的培养液用滤纸吸去。

(3) G过程利用酵母菌进行果酒制作，为适当提高果酒的生产速率，进气口应________，制作好的果酒，还可继续生产果醋，用果酒制作果醋的原理是_____          ___(写化学反应式)。

(4) H过程进行酵母细胞固定化的方法是________，在用注射器将海藻酸钠和酵母细胞的混合液滴加到X溶液中时，应注意控制好____       ____。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

                                               
（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供_____   _ 。发酵过程中检测酵母菌数量可采用             法或稀释涂布平板法计数。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用__   _____法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__      _____催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______ 和 _______ 三步。

36【生物---选修3：生物科学技术】（15分）

应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，既提高了产量，又有了安全保障。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：

（1）上述过程涉及到的生物技术有                                   （至少答3个）。

（2）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法：  　　　　　　                     。

（3）图中①一般经                （酶）处理可以得到③，在①→③的培养过程中，需向培养液中通入一定量的CO₂，其目的是                        　。

（4）在胚胎发育过程中，囊胚时期的　　          　　　细胞将发育成幼体的各种组织。

（5）③到⑥体现了                      。要实现⑥批量生产血清白蛋白，则要求①的性别是              。

附1：命题双向细目表

I．下图是某工厂设计的桑果加工工艺流程，请回答

（1）为提高出汁率，过程b可使用果胶酶和          酶水解果胶；采用          技术则可以提高酶的利用率；过程c通常接种的菌种是            。

（2）果醋的制作需要醋化醋杆菌，将醋化醋杆菌的培养物加在酒水混合物中混匀，倒入发酵瓶前需调pH至             

  A．6.0    B.7.0    C.8.0    D.9.0

（3）桑果酒和桑果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是              

A．桑果汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于酒精发酵


B．桑果醋发酵过程中，需要用脱脂棉来过滤空气

C．桑果酒发酵过程中，每隔一段时间打开瓶盖一次，放出CO₂

D．桑果醋发酵过程中，要适时充气来调节发酵瓶中的pH

II．现代生物技术在农业生产、优良动物繁育、疾病诊治等方面展现出诱人的前景。请根据以下材料回答相关问题。

 材料一：经过一个世纪的发展，植物克隆技术解决了人类生存的关键问题（如粮食问题、花卉苗木生产等），为人类创造了巨大的财富。


（4）用植物花药进行离体培养时，要经过         、        过程才能培养成单倍体幼苗，在此过程需要适当配比的           进行诱导。

 材料二：中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入兔子的去核卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。


（5）克隆大熊猫过程中使用的生物技术手段有          和           。

 （6）如果多个供体细胞来自同一只大熊猫，培育的这些大熊猫在性状上也不完全相同，分析其原因，下列错误的是            

 A．性状变异可由环境条件引起

 B．基因可能会发生突变


 C．受体细胞的细胞质基因不同

 D．细胞核基因发生了重组

（1）该实验中CaCl₂的作用是________。配置海藻酸钠溶液时应特别注意要                ，否则海藻酸钠会焦糊。

（2）加入浓度0.3%的果胶酶可以降低果汁的黏度，有利于________，提高化学反应的速率。

（3）该实验的自变量是________。比较1-3组与4-6组，前者酒精度较低，最可能的原因是                   。

（4）根据实验结果，可以得出固定酵母的最佳条件是________。

（1）刚果红(CR溶液)可以与纤维素形成红色复合物,不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。下表是两种培养基的配方，“+”表示有，“-”表示无。

 据表判断，培养基甲能否用于分离和鉴别纤维素分解菌？回答并说明理由_________；培养基乙能否用于分离和鉴别纤维素分解菌？回答并说明理由_____________。

（2）研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(如图)。 图中降解圈大小与__________有关。 图中降解纤维素能力最强的菌株是           。

（3）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株 A和 B，在不同温度和 pH 条件下进行发酵测得发酵液中酶活性（U·g^-1protein）的结果如下图,推测哪一种菌株       更适合用于人工瘤胃发酵?理由是______________________________。

（4）生产中为了降低酶的成本首先要通过基因工程等技术手段对产酶微生物进行改造，提高酶的产量，还可利用            等技术使酶能够重复利用．

(1)提高洗衣粉去污能力的方法有                                。甲组在洗衣粉中加入了                  。乙组在洗衣粉中加入了                         。

(2)甲、乙组洗涤效果的差异，说明酶的作用具有                     。

(3)如果甲、乙和丙3组均在水温为80℃时洗涤同一种污渍，请比较这3组洗涤效果之间的差异并说明理由。是否有差异        ，由                        。

(4)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的    酶迅速发挥催化作用。请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由。是否运用了酶的固定化技术           ，理由                                         。

（1）甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理，酶活性与处理时间的关系如图1所示。甲酶的化学本质最可能是          。

（2）在实际生产中，固定化细胞技术实质上固定的是         。制备固定化酵母细胞时，常用的方法是下图2中[   ]         (填数字序号及名称)。

（3）在生活实践中，酶制剂在洗衣粉中被广泛应用。某研究性学习小组为探究某品牌洗衣粉中酶催化作用的最适温度，设计了如下装置进行实验，并将结果用曲线图A、B表示（如图3）。

①使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为                 。

②在0℃和75℃时，酶的催化效率基本都为零。但当温度再度恢复到45℃时，后者酶的催化能力已不能恢复，这是因为                                     。

（4）在现代生物工程中，可用酶在体外处理“蛋白质-DNA复合体”以获得包裹在蛋白质中的DNA片段信息，过程如图4所示。

①a、b过程中，酶作用的部位依次是                          。

②若将获得的DNA片段用PCR技术进行扩增，与细胞内的DNA复制过程相比，利用PCR技术扩增DNA时所需酶的不同之处是                          。

Ⅰ．某大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作载体来包埋小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果。(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶的活性和酶的数量)

（1）从图1可以看出：固定化小麦酯酶比游离的小麦酯酶对温度变化的适应性更   ▲   。

（2）从图2可以看出：海藻酸钠浓度为   ▲   时的小麦酯酶活力最强。当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低的原因是   ▲   。

Ⅱ．某实验小组的同学制备固定化酵母细胞的过程如下：

①活化酵母细胞：称取定量干酵母与定量蒸馏水混合并搅拌，使酵母细胞活化；

②配制饱和氯化钙溶液：将氯化钙溶解在定量蒸馏水中，配制成一定浓度的饱和氯化钙溶液；

③配制海藻酸钠溶液：在定量的海藻酸钠中加入定量的蒸馏水，用大火加热，使其迅速溶解，配制成溶液；

④海藻酸钠溶液和酵母细胞混合：将活化的酵母细胞迅速加入到刚配制成的海藻酸钠溶液中，充分搅拌混合均匀；

⑤固定化酵母细胞：用注射器以恒定的速度缓慢地将海藻酸钠和酵母细胞混合液滴加到配制好的饱和氯化钙溶液中，观察凝胶珠形成。

（1）请你改正其中两处错误的操作：第一 处是   ▲   ；第二是   ▲   。

（2）刚形成的凝胶珠要在饱和氯化钙溶液中浸泡30 min左右，目的是   ▲   。

（3）如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度   ▲    (过低/过高)。

（1）酵母菌细胞结构图中含有RNA的结构有（填序号），不能直接分解葡萄糖但能释放CO₂的场所是（填序号）。为制备酵母菌原生质体，需用酶解法除去结构①，但应在溶液中进行。

（2）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是                 。从呼吸角度看，酵母菌属于兼性厌氧型真菌，可用酸性条件下的重铬酸钾溶液检验呼吸产生酒精，其颜色变化是。

（3）为提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净酵母菌，要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为。

（4）为提高果酒的品质及节约生产成本，厂家已尝试使用固定化细胞技术，酵母细胞的固定多采用法。在用此法制备固定化酵母过程中，为加快海藻酸钠在水中的溶解速度，最好采用小火间断加热的方法，以防。与利用游离酵母生产产物相比，利用固定化酵母的优点有等。