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            • 1. 番茄营养丰富,是人们喜爱的一类果蔬。但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因(PG),控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。为满足人们的生产生活需要,科学家们通过基因工程技术,给普通番茄细胞中导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因(抗PG),培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种。操作流程如如图所示,请据图回答:

              (1)过程①通常会用两种限制酶切割目的基因的原因是_______________________ 。
              (2)经过程②可获得三种土壤农杆菌,除依据质粒上的___________筛选出的含重组DNA的土壤农杆菌外,还有___________、___________的两种土壤农杆菌。
              (3)从图中可见,mRNA1和mRNA2的结合直接导致了___________无法合成,最终使番茄获得抗软化的性状。
              (4)目的基因能否在番茄细胞内稳定存在的关键是___________。

              (5)如果利用上述方法培育出的蕃茄不具抗软化性状,经分子杂交技术检测,发现细胞内有抗PG存在,但检测不到mRNA2分子,可能原因是目的基因(抗PG)上游缺少___________。

            • 2. 某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因).有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:

              (1)限制性核酸内切酶作为基因工程的工具,其作用特点是 ______ 。
              (2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 ______ ;并且 ______ 和 ______ 的细胞也是不能区分的,其原因是 ______ 。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,还需使用含有 ______ 的固体培养基。
            • 3.

              科研人员以金定鸭、长乐灰鹅和象洞鸡的全血为实验材料,比较苯酚—氯仿抽提法(方法A)和盐析法(方法B)提取血液中DNA的效率。图中EDTA具有破坏细胞膜、抑制DNA酶的活性的作用,SDS具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性和抑制DNA酶活性的作用。提取过程和结果如下:

              提取过程:

              实验结果:

              注:纯DNA的OD值为1.8,OD值在1.75~1.85间,DNA纯度较好;OD值高于1.8,一般有RNA污染;OD值小于1.8,一般有蛋白质或其他物质污染。

              请回答:

              (1)本实验不选择哺乳动物血液为实验材料的原因是                 

              (2)步骤①中,若只用蛋白酶K消化处理,对实验结果的影响是                      

              (3)步骤③中,破碎细胞常用的方法是                      。步骤⑤加入蒸馏水的目的是                     

              (4)苯酚和氯仿-异戊醇不溶或微溶于水,密度均大于水,步骤②⑦所依据的原理是                   

              (5)对于长乐灰鹅、象洞鸡来说,较适宜的DNA提取方法分别是                               

              (6)实验结果表明,不同方法提取的DNA中,影响DNA纯度的主要物质是                。相同体积的不同鸟类的血液DNA提取量有明显差异,其原因可能是                

            • 4.

              某校课外兴趣小组同学以未成熟香蕉(绿色)和成熟香蕉(黄色)为实验材料,进行了相关探究实验(如下图)。请回答下列问题:

              (1)过程①中加入无水乙醇的作用是            。纸层析法分离两种果皮中的色素后,两个滤纸条上共有的色素带的颜色最可能是               

              (2)通过过程②获得的果肉提取液用斐林试剂检测,与未成熟香蕉相比,成熟香蕉果肉提取液中砖红色沉淀更多,说明其中还原糖含量较高,分析其原因                

              (3)过程③需加入食盐和              ,再进行充分地搅拌和研磨。若要进一步探究一定量的果肉与食盐用量的最佳比例,主要实验思路是           

              (4)生产实践中,过程④通常将未成熟香蕉在一定浓度的                 溶液中浸泡1min后取出催熟。研究表明,香蕉成熟过程中必须经过一个呼吸速率急剧上升,达到高峰后又急剧下降的阶段。因此,为保证香蕉的品质,催熟时应注意            

            • 5.
              在含有X-gal和IPTG物质的培养基上,大肠杆菌质粒上的lacZ′基因如表达出产物β-半乳糖苷酶,则能使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色.基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞.请据图回答:
              (1)限制酶EcoRI的识别序列和酶切位点是-G↓,AATTC-,SmaI的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-,图中目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接相应的末端,连接的末端序列是 ______ .限制酶EcoRI在质粒上的酶切位点在lacZ′基因中,故该基因工程中,lacZ′基因的作用为 ______ 基因.
              (2)获取目的基因后,常利用 ______ 技术在体外将其大量扩增,此过程需要一种特殊的酶叫 ______ .
              (3)转化过程中,大肠杆菌应先用 ______ 处理,使其成为 ______ 细胞.
              (4)颜色为白色的是含有目的基因的菌落,原因是 ______ .
            • 6.

              如图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤,请据图分析回答:

              (1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料,这是因为_________________,从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是向鸡血中加入___________,并__________。如果选用植物细胞,需要选用洗涤剂的目的是______________。

              (2)图a表示释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取______进行下一步实验。

              (3)图b表示的相关操作过程中,加入2mol/LNaCl溶液的作用是__________________,图b操作后进行过滤的目的是________________________。

              (4)图c表示在滤液中加入冷却的______________,进一步提取含杂质更少的DNA。

            • 7.

              请回答下列与生物技术实践相关的问题。

              (1)自古酒就与人类生活息息相关。在图所示两发酵瓶中装入等量的葡萄汁,其中装置__________更适用于果酒制作,果酒制作中发酵旺盛期_________产量很大,需进行定期排气。果酒发酵是否成功可用_____对发酵产物酒精进行检验确认。

              (2)在生产过程中,发现葡萄酒变酸,表面观察到菌膜,造成此现象的生物是      ;腐乳外部有一层致密的“皮”,这是     的匍匐菌丝形成的;制作泡菜时,有时坛内会长一层白膜,这是      繁殖形成的。

              (3)培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是     ;一般对配制的培养基采用          法灭菌。

              (4)微生物培养后期进行菌落统计时,除了________计数法,还可用________法培养细菌进行间接活菌计数。

              (5)提取洋葱DNA时,要在切碎的洋葱中加入一定的      ,并进行充分地搅拌和研磨,待过滤后再收集研磨液。

              (6)对于植物有效成分的提取,适用于玫瑰油、薄荷油等化学性质稳定、难溶于水、挥发性强的芳香油的提取方法为______,在提取过程中,加入_____可吸收精油中残留的水分。

            • 8. 某同学使用下列装置或操作进行有关实验,请据图回答问题:

              (1)用图甲的装置制作果酒时,在营养充足的条件下,为适当提高果酒生产速率,进气口应先打开后关闭,写出该装置发酵时产生酒精的化学反应式:                     ;排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的原因是                 

              (2)乙图中加入蒸馏水的目的是                  ,粗提取得到的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解后,与         试剂共热,冷却后可观察到溶液呈蓝色。

              (3)丙、丁用于提取和分离血红蛋白,先对样品进行处理要用图丙装置进行       ;丁图装置所示的方法称为           ,底端试管中首先收集到的是相对分子质量较        (大/小)的蛋白质。

              (4)如果用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳处理丁实验中获得的蛋白质,蛋白质迁移的取决于           

            • 9.

              如图甲为细胞中某一结构的模式图,图乙表示图甲中3的成分及其各级结构。据图回答下列问题。

               (1)图甲所示结构为________的亚显微结构。图甲中1所示的结构由________层磷脂分子构成。

              (2)图甲中2所示结构是________,代谢旺盛的细胞中该结构数目多。

              (3)细胞有丝分裂过程中出现周期性变化的结构是__________________(用数字表示)。

              (4)图乙中①控制②的合成,①是________分子,鉴定的试剂为____________,鉴定②的试剂为____________。

              (5)图乙中④转化成③发生在细胞有丝分裂的________期。遗传物质呈④状态时,不能发生DNA分子转录的原因是____________________________________________________。

              (6)图乙中①在动物细胞中除了在④上外,还分布在________________中。

            • 10. (8分)图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图,请据图分析,回答下列问题:

              (1)图中正确的实验操作顺序是                       (用序号与箭头表示).

              (2)步骤③中加入蒸馏水的目的是                       ;步骤⑤中加入蒸馏水后DNA析出,该操作的原理是                         

              (3)步骤①中所用酒精最佳是经过        后再使用,该步骤的目的是               

              (4)DNA可用               试剂鉴定,沸水浴后的颜色为             

              (5)由于鸡血较难找到,某学生试图用人血代替,结果没有成功,其原因最可能是                                  

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