[选修1：生物技术实践] 

苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：

（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的________________中进行，其产物乙醇与________________试剂反应呈现______色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞______的中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增值速度________________。

（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。

（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度____________（填“低于”或“高于”）第二阶段。

（4）醋酸杆菌的细胞结构中____________（填“含有”或“不含有”）线粒体，醋酸杆菌和酵母菌的细胞结构主要不同点是________________________________

（5）在苹果汁发酵成苹果醋的全过程中，有机物的质量__________（填“增加”或“减少”）；有机物的种类__________（填“增加”或“减少”）

（6）苹果醋和泡菜都酸，但原理不同；制作泡菜的原理是______________________

回答下列（一）、（二）小题：

（一）天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。

（1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶         。

（2）在酒精发酵阶段，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高        的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。若在酒精发酵环节中温度过低，带来的弊端是           。

（3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如图2：

①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如图3。据图2、3分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是         ，由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是        （至少答出两项）。

②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中         （答出什么时期的什么层）的醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。

③成熟醋醅中乳酸菌的种类、数量均明显减少，主要原因可能是        。

（二）如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题。

（1）克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是       ，动物的这两种繁殖类型，实质性的区别在于后者仍是        。

（2）对供体母牛做超数排卵处理时，一般可采用         激素。

（3）如果要培育能产生某种药用蛋白的转基因荷斯坦奶牛，可采用具体的          技术将目的基因导入到受精卵中，并采用“         ”杂交的方法检测受体细胞中的目的基因是否表达。

（4）在转基因技术中，常需要对相关DNA的碱基序列进行测序。下图中甲、乙为DNA测序仪显示的图像，已知甲图显示的碱基顺序为TCGAAT，则乙图显示的碱基顺序为（   ）

A.TCGCAC        B.ACCGTG        C.ATTCAG        D.TCCGGA

醋是我们生活中常见的调味品。有些醋是以淀粉类原料制成的，如天津独流老醋，下面是该醋的制作流程，根据该流程回答问题。

（1）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通气，后密闭。通气能增加＿＿＿＿＿＿＿＿，有利于密闭时获得更多的＿＿＿产物。

（2）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下。

乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。

（3）现代生活中，苹果醋也收到大众的喜爱，苹果醋制作的第一阶段是将苹果汁在酵母菌的作用下进行酒精发酵，第二阶段是在＿＿＿＿＿＿＿的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为＿＿＿＿＿，再变为＿＿＿＿＿＿的过程，根据该菌的呼吸作用类型，该过程需要在＿＿＿＿＿条件下才能完成。在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度＿＿＿＿＿（填“低于”或“高于”）第二阶段。

葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示。其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为O.lmL。纯化菌种B釆用的是划线接种。请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有              。图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为                。

（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为                    ，接种乙平板时的操作失误是                  。

（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、 200、420、190，则样品中菌种A的密度为       个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是                           。

（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有                          。

①腐乳制作过程中的主要由毛霉等微生物能产生________________酶。

②发酵完后需要加盐腌制，加盐可以析出豆腐中的水分使豆腐块变硬，还可以抑制_______________避免豆腐块变质。在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐___________(填“增加”或“减少”)盐量。

(2)下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：

①完成图1中的实验流程，则矩形框内应为______。酒精发酵通常在_____℃进行；由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是_______。

②图2装置中的充气口在酒精发酵过程中要关闭，而排气口在该过程中应开放，目的是用来排出酵母菌___________________。 排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是_______________________。

（3）制作泡菜时所用盐水需煮沸，其目的是__________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是_____________。

回答下题：

(一） 酿酒、造醋是我国的传统技艺，为了探究与改进制造工艺，进行了相关研究。请回答有关问题：

（1）目的菌株筛选后应该利用     培养基进行扩大培养，       是消除污染杂菌的通用方法。

 (2)制作葡萄酒过程中，为了酵母菌迅速发生作用，可加少量      混匀。将葡萄浆放入发酵瓶，装量不超过      （A.1/2 B.2/3 C.3/4 D.100%）,当发酵瓶       表示发酵完毕。

 (3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至       ，将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒-水混合物中，混匀，并调PH至       后，倒入发酵瓶。

（二）毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。请回答相关问题：

(1)过程①中构建重组表达载体所需要的酶是限制性核酸内切酶和      。（A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.解旋酶）

(2)在过程②中，用       处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞，置于    中培养。

(3)在过程③中，一般用     激素处理供体母牛，使其超数排卵；对供体母牛和代孕母牛进行           处理。

 (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是          。在胚胎移植前，通过                技术可获得较多胚胎。

下图为传统酿酒的工艺流程图

根据对微生物发酵原理以及操作原理的理解回答下列问题：

(1)在酿酒前对粮食种子(多为高粱)要适当粉碎成小颗粒状态，但是并不磨成面粉状态，这样做的原因是________________________，第二步高温蒸汽条件下蒸一段时间，其目的一方面是________，另一方面“糖化”的含义是__________________________________。

(2)第三步为什么晾至35℃左右时才可向粮食中加曲？ ____________。“加曲”实际上相当于向培养基中________。

(3)密封后在酒缸中发酵12d左右，此间温度基本保持在18~25℃，原因是此温度是酵母菌等酿酒微生物的________。

下图所示为果酒、果醋工厂化生产流程。请据图回答问题：

(1)家庭自制葡萄酒所用菌种常来自于________，图中的候选菌A、B经筛选和纯化分别获取________和________菌种。

(2)图中所用的培养基都需要在接种前用________法进行灭菌。

(3)在纯化菌种A时接种了5个平板，每个平板均接种了0.1 mL样品并培养。其中乙平板的菌落分布如图，纯化菌种A的接种方法是______________，涂布器的灭菌方法是      。其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常，其菌落数分别是210、230、470、190，则样品中菌种A的数量为________个/mL。

(4)果酒发酵罐与果醋发酵罐需要控制的温度条件差异是________________。

【加试题】（一）如图表示果酒和果醋制作过程，请回答有关问题。

（1）制作果酒时，先将适量干酵母和少量温水调成糊状，待酵母悬液中出现                           后待用。将葡萄汁转入发酵瓶中，装量不超过                          ，加入酵母悬液后，放在25—30℃条件下发酵。

（2）③接种的微生物是                            ，利用该微生物产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量达到                            。      

（3）葡萄匀浆在果胶酶的作用下，葡萄细胞壁的粘合剂被分解为                          和                          ，使葡萄组织变得松软。为了确定过程①的效率，可取一定的葡萄汁与等量                          混合，若没有出现浑浊，说明果胶已经完全被水解。

（二）如图为烟草植物组织培养过程的流程图，请回答有关问题。

（1）②过程需将烟草根组织块在                         培养基上进行培养，经过                         获得愈伤组织，④过程需将含有愈伤组织培养物的试管放在                       上，通过液体悬浮培养得到X细胞。在⑤过程中以适当配比的营养物质和生长调节剂的诱导培养，X细胞依次经过细胞团、                      、心形胚，再分化为胚状体。

（2）若需要进行原生质体培养，可用纤维素酶和果胶酶处理愈伤组织，但需要0.5—0.6mol/L的                         溶液维持一定的渗透压，以确保获得的原生质体不至于吸水胀破。

（3）X细胞的主要特点是                         。（A.细胞壁薄、细胞质丰富 B.液泡大、细胞核大 C.细胞壁薄、细胞核小 D.细胞质丰富、液泡大）

[生物-选修1：生物技术实践]

蓝莓富含花青素等营养成分，具有保护视力、软化血管、增强人体免疫力等功能。某同学尝试用蓝莓来制作蓝莓果酒和蓝莓果醋。

（1）制酒中利用的微生物是__________。发酵时一般要先通气，通气的目的是____________。制酒过程中可在酸性条件下用____________检验酒精的存在。

（2）酿制蓝莓果酒时，并不需要对蓝莓进行严格的消毒处理，这是因为在________的发酵液中，绝大多数微生物无法适应这一环境而受抑制。

（3）酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，分析其原因是___________。醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖原__________（填“充足”或“缺少”）。

（4）为鉴定蓝莓果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测______和比较_____作进一步的鉴定。