知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

（1）按物理性质划分，该培养基属于 ______ 培养基，无论配制何种培养基，在原料称量、溶解之后都要先 ______ ，然后分装、包扎并灭菌，常用的灭菌方法是 ______ ．
（2）根据培养基的成分判断，该培养基能否用于分离土壤中分解尿素的细菌？ ______ ，原因是 ______ ．
（3）为检测尿素分解菌是否存在，还应加入 ______ ，如果存在，将出现 ______ 反应．
（4）微生物常用的接种方法有 ______ ．

难度：较难

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3．
啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种，对啤酒的品质、风味有很大影响．请回答：
（1）若实验室中啤酒酵母菌种被杂菌污染，可采用 ______ 进行纯化培养：接种时，先将接种环在酒精灯火焰上灼烧，待其 ______ 后，蘸取带菌培养物放到新的培养基中．倒置培养皿恒温培养直到出现 ______ ，再进行菌种鉴定．
（2）为实现啤酒发酵连续生产，酵母细胞固定化技术已在啤酒工业中广泛应用．例如，将啤酒酵母和海藻酸钠混合均匀，经CaCl₂处理形成凝胶颗粒，而酵母细胞则被固定在其内部．这种固定化方法称为 ______ （A．吸附法 B．包埋法 C．交联法 D．共价偶联法）．
（3）科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中，进而转入 ______ ，发酵生产转基因酵母乙肝疫苗．在构建重组质粒过程中，通过同种限制性核酸内切酶（-G↓AATTC-）切割得到的一个目的基因和一个开环质粒，共有 ______ （A．1 个 B．2 个 C．3个D．4 个）粘性末端．将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选，这是因为 ______ ．该转基因技术实践应用的成功标志是 ______ ．
（4）转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用．人们将经过基因改造的胚胎干细胞与 ______ 融合，得到 ______ ，并促使其在体外分裂发育成 ______ ，再通过胚胎移植获得后代．目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法，其原因是 ______ ．
（5）胚胎干细胞具有重要的生产和临床医学价值．在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为 ______ ，其作用是 ______ ．

难度：较难

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4．
酸奶是以牛奶为原料，经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌，经发酵制成．家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题，为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行如图所示操作．回答下列问题．
（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基，倒平板待其冷却后将平板倒置的主要原因是 ______ ．
（2）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布，涂布前要将涂布器 ______ 才能涂布．如果培养基上出现 ______ 的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染．
（3）在恒温培养箱中培养一段时间后，3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个，则可以推测酸奶中每毫升含菌数为 ______ 个．运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小，原因是 ______ ．
（4）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，进一步分离纯化乳酸菌的方法是 ______ ，该操作中常使用的接种工具是 ______ ．若培养后获得的某个平板，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成第一条线上无菌落的可能操作失误有 ______ 、 ______ ．

难度：较难

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5．

下列关于实验结果的分析，正确的是（　　）

A．稀释涂布平板法用于微生物的分离计数，统计结果可能比实际值小

B．实验室腐乳制作时，若酒的浓度偏大，则发酵时间会缩短

C．DNA的粗提取与鉴定实验中，提取时若搅拌速度过快，鉴定时溶液蓝色会偏浅

D．血细胞计数板洗涤后未经干燥处理而直接用于酵母菌的计数，结果会偏小

难度：较难

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6．
据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注．葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环．请回答下列问题．
（1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌，请帮他们完善下列步骤．
①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨．NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节PH，分装到锥形瓶后进行 ______ ，在无菌状态下加入卵黄液（100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板．
②接种：取待检测果汁2.5ml加入22.5mL灭菌生理盐水中，制成接种样液．
实验组：将接种样液用 ______ 法接种在含卵黄的固体培养基上．
对照组：将 ______ 用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为 ______ 对照．
将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h．
③观察：观察培养基表面 ______ ．
（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供 ______ ．
葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于 ______ 培养基．
（3）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用 ______ 法．

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7．

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品,但易变质,保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离,并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果,为生产豆浆时,优化保质方法提供依据。主要研究过程如下:

①豆浆变质处理:将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250 mL三角瓶中,密封、37 ℃条件下,放置7 d后,豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数:取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上,培养一段时间后,统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表:

细菌序号	菌落特征	菌落直径/mm	菌落数/个
细菌序号	菌落特征	菌落直径/mm	豆浆A	豆浆B	自制豆浆
S1	表面有白色绒毛,圆形边缘不规则	5	5	3	7
S2	白色,表面无绒毛,有白色液滴	12	18	11	24
S3	黄色,表面无绒毛,如同黄色液斑	2030	11	7	15

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果:以自制的新鲜豆浆为材料,经相应处理后,在37 ℃下放置35 d后,统计豆浆中腐败细菌数量,结果如图。

请回答下列问题:

(1) 步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是________,步骤②中培养基的常用灭菌方法是____________。

(2) 步骤②中适宜采用的接种方法是________。区分菌落种类的依据是________________。统计菌落种类和数量时要每隔24 h观察统计一次,直到各类菌落数目稳定,以防止____________________。

(3) 乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂,它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明,最能耐受乳酸链球菌素的细菌是____;为有效防止豆浆腐败,在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在____左右。

(4) 与用抗生素防腐相比,使用乳酸链球菌素防腐的优点是_。

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8．

生物学实验中常常遇到筛选问题，以下筛选不能够成功的是（　　）

A．用同位素示踪技术筛选融合的原生质体

B．用抗原-抗体杂交技术筛选特定的杂交瘤细胞

C．含高浓度盐的培养基培养愈伤组织筛选耐盐突变体

D．利用纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌

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9．
大肠杆菌有许多菌株，野生型菌株在普通培养基中就能成活，菌株A：met^- bio^-thr⁺ leu⁺thi⁺需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素，菌株B：met⁺bio⁺ thr^-leu^- thi^-需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫胺．科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验．回答下列问题：

（1）如图1所示，菌株 A 和 B混合培养几小时后，把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上，发现长出了若干野生型菌落，对此实验现象可作出如下假设：
①不同大肠杆菌间遗传物质发生重组．
② ______ ．
（2）为了探究上述假设①，有人设计了一种U型管（如图2），中间用过滤器隔开，大肠杆菌不能通过，但培养液和营养物质可通过，实验如下．请补充相关实验内容：
实验步骤：
①在U型管中加入 ______ ；
②U型管两端各加入菌株A、菌株B，培养几小时；
③将U 型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在 ______ 上，观察有无菌落．
实验结果： ______ ．
实验结论：菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组．
（3）现有1升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至10³倍．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为31、34、37，则每升原水样中大肠杆菌数为 ______ ．该数据理论上比细菌实际数目 ______ ．
（4）该实验中需要灭菌的是 ______ ．（至少写3个）

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10．

在分离土壤中分解纤维素的细菌过程中，需要进行的是（　　）

A．用紫外线对样品进行消毒

B．用显微镜对菌落进行计数

C．用选择性培养基进行筛选

D．用刚果红对菌体进行染色

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