（一）【生物——选修1：生物技术实践】

特定微生物产生的纤维素酶能将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，经发酵后形成乙醇，再加工即可制成生物燃料。图甲为纤维单胞菌（能产纤维索酶）的获取过程。图乙为生物燃料的制备过程，请回答以下问题。

（1）过程②分离获取纤维单胞菌的接种方法为________法。过程①选择培养出纤维单胞菌的原理是________。

（2）图乙中的微生物X是________，其发酵的化学反应式为________。

（3）某研究人员经图甲培养获得了三种微生物（甲、乙、丙），如何简要判断三种微生物所产生的纤维素酶活性大小？________。

（4）利用纤维素酶制取生物燃料的生态学意义为________。

（5）要统计每克土壤样品中的活菌数目，宜采用________法接种。通过统计平板上的________就能推算出样品中的大约活菌数。

（二）【生物——选修3：现代生物科技专题】

我国已实现部分“胚胎工程产业化”，如肉牛、奶牛胚胎工程产业化。如图所示是科学家采用不同方法产业化培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请回答下列问题：

（1）h操作的核心是________，一般其运载体上含有荧光蛋白基因，用于是否导入目的基因的检测，那荧光蛋白基因称为________。

（2）若A、B牛的核遗传物质相同，其产生通过________技术，它们性状________（填“是”“否”）完全相同，原因是________。

（3）图中用到的激素是________，其作用是________，胚胎工程中还有________过程需要用激素处理。

（4）d和f过程是________，是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”，胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________。

[生物——选修1生物技术实践]

   乳酸菌是人和动物体胃肠道中的有益菌，能助消化，利于肠道健康，但是消化道中胆汁所含的胆盐会对乳酸菌的生理活动有抑制作用，为此，研究人员通过辐射处理野生型乳酸菌，得到耐高浓度胆盐的乳酸菌。

（1）与腐乳制作所用微生物相比，乳酸菌在结构上的主要特点是________。

（2）实验步骤：

①育种与培养：辐射处理后可得到多种类型的乳酸菌，置于经过________法灭菌处理的________（固体／液体）培养基中，37℃振荡培养。

②接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于含0.3％胆盐和不含胆盐的固体培养基上，配置时为了使培养基凝固，应向培养基中加入________；置于37℃条件下________（密闭／充气）培养；设置不含胆盐的培养基培养的目的是________。

③筛选与纯化：从平板中提取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进一步纯化。

[生物——选修1：生物技术实践]

胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，可以作为食用色素。最近还发现天然胡萝卜素具有使癌变细胞恢复为正常细胞的作用。请回答下列问题；

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，在温度及气体环境分别为________条件下最适合其生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，可选用________法接种。接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的是________。

（4）酵母菌菌体裂解后经离心、萃取、浓缩可获得胡萝卜素，可通过________比较不同种类酵母菌的产胡萝卜素能力。所获得胡萝卜素纯度可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照为________。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列与微生物有关的问题。

（1）土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生脲酶，该酶能将尿素分解成________。

（2）为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解茵的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：

（注：“＋”表示有，“－”表示无）

培养基甲________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________；培养基乙________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________。

（3）如分别取0.1mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中该细菌数为________个。

（4）纯化细菌时使用的培养基一般用________法灭菌，________（填“可”或“不可”）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

（5）某小组采用平板划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________。

（6）尿素分解菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________（填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”）。

[生物——选修1：生物技术实践]

   某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按下表处理：

将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题：

（1）上述实验的实验目的是________。若E组的培养基表面有菌落生长，说明了________。

（2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供________和________。

（3）实验过程中“待培养基冷却至室温”的目的有________。

（4）实验结束后，对使用过的培养基应进行________灭菌处理。

牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。回答下列问题：

（1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为________。牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的________能使纤维素分解成纤维二糖。

（2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用________法进行灭菌。

（3）为了从牛胃的食糜中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以________作为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是________。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是________。

自生固氮菌可不与其他植物共生，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途。研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究。请回答下列问题：

(1)在配制含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项不需要的是________(填序号)

①酒精灯　②接种环　③高压蒸汽灭菌锅　④棉塞

(2)要从土壤样品中分离出自生固氮菌，在获得土壤浸出悬液后，可以采用稀释涂布平板法将菌液涂布于________培养基上进行筛选。

(3)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是________。

(4)涂布培养四天后，可通过观察________的形态特征来统计土壤中自生固氮菌的种类。

(5)为了进一步筛选高效固氮菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果如下表：

①培养过程中需不断振荡的目的是____________________。

②可以采用________方法对固氮菌进行计数，假设计数室长和宽均为1 mm，深0.1 mm，每个小方格中平均有7个固氮菌，则10 mL培养液中有固氮菌的数量为________个；如果小方格中固氮菌的数量太多，无法数清，则应________。

③由上述结果可知，________菌的固氮效率最高。

请回答下列有关的问题：

（1）鉴定尿素分解菌需在培养基中加入        指示剂。纤维素分解菌的筛选方法                              

（2）制作泡菜时，所用盐水使用前，盐水需要         。为了缩短制作时间，有人还会在盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是         。

（3）在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是                                。

（4）水中蒸馏的方法对于有些原料不适用。这是因为水中蒸馏会导致                   、和                 等问题。

（5）萃取的效率主要取决于                     和                ，同时还要受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。

图是利用影印培养技术证明大肠杆菌产生抗链霉素突变基因的实验。具体方法是：

①首先把大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的平板1的表面，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落。

②对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到平板3上那几个抗性菌落的“孪生兄弟”。

③把平板2上与平板3上菌落相应的一个部位上的菌落挑至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上。

④重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落。

请根据以上材料回答下列问题：

（1）大肠杆菌的同化作用类型为________，与酵母菌相比，大肠杆菌细胞在结构上的主要特点是________。

（2）从培养基的功能上看，含有链霉素的培养基属于________培养基。若在培养皿的培养基中加入伊红和美蓝，则培养皿中长出的菌落颜色表现为________。

（3）大肠杆菌抗链霉素基因存在于细胞的________结构上，而与生长、繁殖和遗传有关的基因主要存在于________中。

（4）3号、7号、11号培养基中加入链霉素的作用是________，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明了________。