[生物——选修1：生物技术实践]

生活中，部分食品或饮料与微生物的发酵密不可分。回答下列关于微生物的培养及其运用的问题：

（1）不同微生物对营养的需求存在一定差异，但都能归纳为4类营养，即水、________、氮源和________。

（2）为增加分泌高效果胶酶的微生物的浓度，应该用________（填写物理状态）培养基。探究不同微生物分泌的果胶酶的活性实验，所用材料是果汁，那么该实验的自变量是________。

（3）制备果酒时，发酵菌为________，该发酵菌能将葡萄糖转化成酒精和CO₂，如图是某同学设计的发酵装置，该装置的优点有________。

（4）制备果醋时，发酵菌在________（填“有氧、无糖”“无氧、有糖”或“有氧、有糖”）条件下，能将乙醇转化成________，进而转化成乙酸。

[生物——选修1：生物技术实践]

   β—胡萝卜素可在人体的小肠、肝脏等器官转化成维生素A，因此β—胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的疾病。回答下列有关制备β—胡萝卜素和纯化三孢布拉霉的问题：

（1）工业生产上，提取天然β—胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的________中获得，三是利用微生物的发酵生产。

（2）胡萝卜中富含β—胡萝卜素，从胡萝卜提取β—胡萝卜素的方法为________。影响该方法的主要因素是________，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、________等条件的影响。

（3）三孢布拉霉是一种可用于生产β—胡萝卜素的霉菌，培养三孢布拉霉时，培养基中一定要含有水________、________和无机盐等营养成分。

（4）纯化兰孢布拉霉时，固体培养基上菌落的分布情况如下图1、图2所示，则图1、图2分别是采用________法和________法接种的。

[生物——选修1：生物技术实践] （略）

(1)酵母菌在果酒制作过程中发挥重要的作用，发酵装置需短通气→密封→定时排气等流程，其中通气的目的是________，密封的目的是________。

(2)在果酒的基础上制作果醋时，主要的发酵菌是________，该菌在________条件下能将乙醇间接转化成乙酸。

(3)制备果汁类饮料吋，首先要获取能分泌高活性________酶的微生物，分离该微生物时，向固体培养基上接种微生物的常用方法是________，提取该微生物分泌的此酶可采用的方法有________。为提高该复合酶的利用率，一般不选择________法进行固定。

现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程，请回答相关问题：

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在 &;         的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以         为碳源，并加入         的培养基上，筛选周围有         的菌落。

（2）在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶的浓度相同，则你认为三种酶液的活性               （填“一定相同”、“不一定相同”或“一定不同”），可以通过                                 进行定量测定。

（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是          ，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意                         。

35[生物一现代生物科技专题」(15分)

  回答现代生物科技方面的有关问题:

  (1)单克隆抗体的制备原理和方法如下图所示，这样制得的抗体为鼠源性抗体。

在此过程中，小鼠必须经过          才能获得所需的小鼠细胞，B过程需要用         处理，才能形成杂交瘤细胞。

(2)这种抗体临床应用时，对人是异种抗原，重复注射可使人产生        ，从而减弱或失去疗效，并增加了过敏反应。

(3)在上世纪80年代早期，人们开始利用基因工程制备抗体，以降低鼠源抗体的免疫原性。进行基因改造时，应该把下图的       和        进行连接，以避免如(2)所提到的麻烦;进行改造的过程中要用的工具酶有                 。

(4)将改造好的基因与质粒进行构建，构建好的结构称为             ，扩增构建好的结构采用的方法是                                                                  。

十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今，形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用                     来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括              。

  a温度控制    b溶氧控制    C．pH控制   d酶的控制

(3)苹果酒在         的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                             。

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是            。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于            。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是             。

絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。其流程图如下,据图回答：

（1）溶菌酶的作用是_________________________。

（2）PEG的作用是_________________________。

（3）经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是_______________________________。

（4）目的菌株的筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_________的培养基上生长的AB融合菌，选择效果最好的最为目的菌株。

（5）为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中：同时设置________________为对照组。经搅拌、静置各3分钟后，分别测定上层水样的石油浓度COD值（COD值越高表示有机物污染程度越高）,计算石油去除率和COD去除率，结果如下图。

（6）目的菌的种群增长曲线是_____________型。在40～44小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是_________________。

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、___________________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是________________________________________________________________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有___________________________________________________________。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_____              

苹果酒、苹果醋、苹果汁等是人们餐桌上的常见食品。请结合相关知识回答以下问题： 

（1）如图所示是在苹果酒的基础上制作苹果醋的流程图。

过程②常用的发酵菌是               ，可以在食醋中获得，分离和纯化该微生物的方法如下：第一步：配制培养基。根据物理性质，培养微生物常用的培养基为                     。 

第二步：采用                  法对培养基进行灭菌处理。

第三步：                              。

第四步：培养温度控制在                。

第五步：挑选符合要求的菌落。

（2）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10^－4、10^－5、10^－6稀释液进行涂布，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是              ，此对照实验的目的是证明              过程中是否被杂菌污染。

（3）苹果泥与果胶酶混合能提高苹果的出汁率并使浑浊的果汁变澄清，其原因是                                   。