【生物——选修1生物技术实践】

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。

(1)从用途上来说，Ⅰ号培养基属于         培养基，仅以淀粉作为        源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时一般加入         作为凝固剂。

(2)进行①过程的目的是    ；②过程所使用的接种方法是          法。

(3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是           ；一般对配制的培养基采用                法灭菌。

(4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放           分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈；应挑出透明圈        (大或小)的菌落，接种到Ⅱ号培养基。

选修题有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染．某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株．回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以     为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于     培养基．

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即     和     ．

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力     。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、     和          。无菌技术要求试验操作应在酒精灯     附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

(1)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是______(填序号)。

①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

(2)在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是______________________________________________________。

(3)向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是________________________________________。

(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。图中降解圈大小与纤维素酶的______有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是______(填图中序号)。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从赤峰市克旗热泉（出口水温达87℃）中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。请回答下列问题：

（1）I号培养基中应加入___________，以便挑选出能产生高温淀粉酶的嗜热菌。从I号培养基中挑选__________菌落接种到II号培养基中。

（2）②过程所使用的接种方法是___________________。如果不经过①过程，直接将采集的样品进行接种培养，可能出现的结果是________________________________。

（3）I、II号培养基接种菌种后，应该置于__________的恒温培养箱中培养，培养皿要倒置的原因是_______________________________。

（4）在高温淀粉酶运用到工业坐产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。下图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保持足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，如曲线②。根据实验结果分析：80℃并不是该酶使用的最佳温度，原因是____________________。曲线②35℃数据点是在_____________℃时测得的。

[生物——选修1：生物技术实践]（略）

[生物——选修1：生物技术实践] （略）

【选修1-生物技术实践】

为解决塑料袋造成的“白色污染”问题，某同学试图从土壤中寻找一种能加速塑料袋自然降解的目的菌，请根据有关知识回答下列问题：

（1）为培养该目的菌，需要配制出供其        所需的营养基质—培养基，对培养基灭菌常用的方法是         。在接种前需要检验使用的培养基灭菌是否合格，方法是              。

（2）为了确保能够从样品中分离得到所需要的微生物，我们可在接种之前进行          培养，以增加目的菌的浓度。实验室常用的接种方法有                 和                。

（3）该同学在稀释倍数为104的培养基中测得平板上菌落数分别为24、23、25，则每毫升样品中的菌落数是             个。（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL） 该方法统计的数目往往比活菌的实际数目            。

[生物--选修1：生物技术实践] 

由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有                                   。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以                作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是                                        。

（2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是                ；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。

人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取．某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→（      ）→鉴别培养。

（1）请补充题干“（　）”中的实验流程：　　　　　　　　　　；找不到合适的取样环境，可采取的办法是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

 （2）选择培养的目的是　　　　　　　　　　　　；研究人员用纤维素、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基进行培养，其中加入的纤维素为微生物的生长提供　　　　　。

 （3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用　　　　　　　法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生　　　　　　　　的菌落作为菌种进行扩大培养。

（４）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是180、200、160。则样品中微生物的数量为　　　　　个/mL。该统计结果　　　　　 (低于、高于)实际值。