酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答： 

（1）酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物                      。 

（2）实验室可采用                           法进行菌种纯化，所用培养基需经_________________法进行灭菌。 

（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏，也可以利用____________的方法长期保存。

（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持            ，(1分)理由是                     。 

(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以　　              　　为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于　　　    　培养基。 

(2)纯化菌种的原理是在培养基上将细菌__________          成  ________  细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。为 了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即　              　　　　　　　         　。 若要统计活菌数目则要采用______________________法。

(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力　　          　。 

(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、　____　　  。无菌技术要求实验操作应在　　　        　附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。 无菌技术的关键是________________________________。

（1）研究中，首先要配制培养基，培养基中一般应含有                 等四类营养物质，配制好之后，应该用        灭菌法进行灭菌。

（2）操作A的目的是        ，操作B的接种法培养出的结果应该如图         所示。

（3）为了检测水样中的细菌，在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                   ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为         个。

 （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。其原因是振荡培养能                   。

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量金黄色葡萄球菌，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的数量，可确定该蛋白质的抗菌效果。
（1）抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供         。灭菌与调节pH的先后顺序是　    。抗菌蛋白需在灭菌        （填“前”或“后”）加入。
（2）对新配制的培养基灭菌时所用的设备是             。实验前需对超净工作台进行             处理。
（3）该实验接种金黄色葡萄球菌的方法是             。
（4）实验中的自变量和因变量分别是             。
（5）有人认为抗菌蛋白本身具有极强的抗菌能力，因此，该实验操作不需要在无菌条件下进行，请你谈谈自己的观点，并简要说明理由                     。

以下是从自然菌群中筛选理想菌种的主要步骤，请回答：

采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定→菌种保藏

（1）在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，因此筛选嗜盐菌应从____________中分离、纯化。

（2）富集培养是在将样品稀释涂布到鉴别菌种的培养基之前，可以通过____________增加目的菌株的浓度，目的是_____________________________________________。

（3）下图所示的操作是培养基配制过程的____________，该操作的正确使用顺序是：____________（用图中的序号和箭头表示）。②步骤需要培养基冷却到____________才能操作。③步骤操作的目的是____________________________________。

（4）对获取的菌种通常是在低温条件下进行短时间保藏，也可以利用甘油管藏的方法____________。

35-2.[生物——选修3：现代生物科技专题] 

回答下列关于胚胎工程方面的问题。

（1）胚胎工程是指对动物        或         所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。

（2）精子的顶体内含有              ，能协助精子穿过卵子的                。

（3）从供体母牛子宫内收集胚胎的方法叫          。

（4）在胚胎工程中，若要获得多个卵细胞，则需对母畜作            处理，若要出现“不同的母体产下性状相同的后代”这一现象，则应使用的技术为            。

（5）胚胎干细胞在功能上具有            性，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生            。

(1)欲从多种微生物中分离某种细菌并抑制其他微生物的生长．应使用________培养基．纯化菌种时可采用比较简单的________法进行接种，接种操作应在________进行．

(2)纯化的菌种常采用固体斜面培养基临时保藏，该方法保存的时间较________，而且菌种易________．常用的凝固剂是________．

(3)从培养基所含的成分来看，从土壤中分离出固氮菌的培养基特点是________，从土壤中分离出纤维素分解菌的培养基特点是________．

（二）人组织纤溶酶原擞活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得．流程如下：

(1)卵母细胞可以从活体________中采集，还可从已处死的雌羊卵巢中获取．对供体母羊用________处理，可以获取更多的卵(母)细胞．采集的精子需要经过________处理，才具备受精能力．

(2)欲用有限的早期胚胎获得多个转基用个体，可以利用________技术．由于代孕母羊对移入其子宫的外来胚胎________，才使早期胚胎能在代孕母羊体内存活．

(3)质粒上应有________，才能使htPA基因插入其中．在转htPA基因母羊的肌肉细胞中________(能、不能)检测到目的基因．若在其羊乳中检测到________，说明目的基因成功表达．

    某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_______（填“能”或“不能”），原因是___________________________。

   （2）培养基用_________方法灭菌，培养皿用____________方法灭菌，待培养基冷却到________℃（填“20”、“30”、“40”或“50”）左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止__________，以免造成污染。

   （3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

   （4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________。

   （5）实验中使用过的培养基及其培养物必须经过_________处理后才能丢弃，以防止微生物的扩散。

（1）巴氏消毒的方法是             。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10mL生牛奶稀释到10^-4浓度后，取0.1mL滴在培养基上。

（2）将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择的涂布工具是          。该涂布工具最合适的灭菌方法是____________。
  

 A．火焰灼烧    B．高温高压灭菌C．酒精擦拭    D．紫外线照射

（3）下图所示方法为稀释培养法，按此方法培养得到的3个培养皿中菌落数分别为25个、23个、24个，则生牛奶中每毫升含细菌数为________个。

（4）消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释培养法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动？__________________。 

（5）检测食品中大肠杆菌数量，可评价食品是否受到污染。下表培养基配方中，大肠杆菌能够生长的是______，理由是__________________。

（6）从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加入             ，具有              特征可以鉴别大肠杆菌。

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度．本步骤需设计________作为空白对照。

(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够________。

（1）某小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间,这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过　　　灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是　　　　　　　　　　　　　　　。 

（3）某同学尝试接种的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图所示。该同学的接种方法是__________________；推测该同学接种时可能的操作失误是               。

（4） 为了检验某致病菌对于抗生素的敏感性，在该病菌菌落均匀生长的平板的不同位置，分别放置含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，由此推断，该病人目前适合使用的抗生素是______．含C的滤纸片周围透明圈比含A的小，说明                                ；若抗生素B的滤纸片周围没有出现透明圈，最可能的原因是                        导致的结果；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现一个菌落，这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的                ，也可能是由于                  产生的抗生素D的耐药菌。