葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示。其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为O.lmL。纯化菌种B釆用的是划线接种。请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有           。图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为           。

（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为           ，接种乙平板时的操作失误是           。

（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、 200、420、190，则样品中菌种A的密度为       个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是                。

（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有                      。

苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：

（1）酵母菌的呼吸代谢途径如上图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增值速度________________。

（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。

（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度____________（填“低于”或“高于”）第二阶段。

（4）醋酸杆菌属于_______核生物，其细胞结构中______（填“含有”或“不含有”）线粒体。

(5)乳酸发酵与酵母菌发酵过程主要是图中_________这一阶段不同，其发酵过程________(是否)有二氧化碳产生。

利用不同微生物的发酵作用来制作果酒，果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久，遍布民间，一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术的相关知识，回答以下问题：

（1）果酒和果醋的制作：

①酵母菌是酿制葡萄酒不可缺少的微生物，如果要获得优质野生酵母菌最好在葡萄园的土壤中采样，利用酵母菌发酵制作葡萄酒要控制的温度为____。果醋发酵利用的微生物是_____。

②果酒发酵装置内要留1/3空间，在发酵期的用途一是初期提供有氧条件促进酵母菌的大量繁殖，二是____________。

③喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是______和氧气在酶的催化下生成醋 酸和水。

（2）腐乳的制作：

①腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是____。

②豆腐发酵主要利用微生物产生的______酶和脂肪酶等，通过发酵，豆腐中营养物质的种类   （减少、增多），且更易于消化和吸收。

（3）乳酸发酵：含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是________。

下图简单表示葡萄酒的酿制过程，请据图分析，回答下面的问题。

(4)如果丙忘记盖上盖子，一段时间后会变酸，这是由于酒精在________的作用下生成了________________。

请据图分析

Ⅰ．⑴如图简单表示了葡萄酒的酿制过程，完成图1中的实验流程。

⑵图2装置中的充气口在      时关闭，在 时连接充气泵，并不断向内             。

⑶排气口在果酒发酵时排出的气体是由                      产生的             ，在果醋发酵时排出的是                     。

Ⅱ．腐乳是我国民间传统发酵食品，营养丰富，味道鲜美。请回答有关问题：

（1）腐乳制作中，起主要作用的生物是_____________，它与乳酸菌在结构上的主要区别是____________________。

（2）有腐乳制作中，加盐的目的是（写三点）：______________、_______________、____________________。

（3）卤汤中酒的含量为何要控制在12％左右？（写二点）__________________、_____________________。

我国酿醋的历史悠久，其主要生产工艺流程如下图。回答下列问题：

（1）酒精发酵阶段的操作过程中，发酵罐先_____________，促进酵母菌大量繁殖，然后密闭，有利于获得更多的酒精产物。若产物中生成了酒精，可使用酸性重铬酸钾试剂检验呈现__________色。

（2）醋酸发酵时所需的外界条件是                     。利用苹果酒制作苹果醋的化学反应方程式是                      。

（3）为了测定醋酸杆菌活菌的数量，可以采用_____________法，在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品溶液0.1ml，培养一段时间后，平板上长出的菌落数分别为24、166、465、185和192，则每毫升样品中的细菌数量为_____________个。但此种方法最终计算得出菌体数目往往比实际的数目低，原因是                。下面四种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是________。

回答下列（一）、（二）小题。

(一）某研究小组欲用苹果汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋，请分析回答：

(1)将苹果汁放入发酵瓶，要预留约的空间。若发酵瓶内持续无气泡产生，则需加入更多的，使发酵作用尽快发生。

(2)变酸的果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜，若要在该菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株，可通过获得的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目，则常采用法。

(3)下图是果酒和果醋的发酵装置，关于果醋发酵叙述错误的是（  ）

A.发酵前，瓶内酒—水混合物的pH需调至7.0 

B.B.发酵过程中，充气口要适时适量充气

C.发酵过程中，排气口排出醋酸发酵产生的CO₂

D.发酵完成后，出料口的pH值不再减少

(二）下图为平板划线法分离纯化细菌示意图。根据所学生物学知识，回答下列问题。

（1）选择培养和扩大培养所用培养基从物理性质上常用培养基，两者共同的目的是。

（2）抗生素可以抑制肽聚糖合成，从而可以抑制多数原核生物繁殖。实验室现有酵母菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌三种微生物混杂生长的固体培养基，已知大肠杆菌菌落遇伊红美蓝试剂变为紫色，并带有金属光泽；金黄色葡萄球菌耐高浓度食盐水，菌落为金黄色；酵母菌细胞壁成分主要为几丁质，营养条件好，氧气充足时，显微镜下可见典型的出芽生殖。现在请你设计一个合理的实验方案，从一个培养基中，将三种微生物一次分离开来。(所需试剂可自选)

下面是果酒和果醋作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：

（1）完成图1中的实验流程。

（2）冲洗的主要目的是                   ，冲洗应特别注意不能                    ，以防止菌种的流失。

（3）图2装置中的充气口在                         时关闭，在                                                            时连接充气泵，并不断向内                             。

（4）排气口在果酒发酵时排出的气体是由酵母菌产生的             ，在果醋发酵时排出的是                     。

下图所示为果酒、果醋工厂化生产流程。请据图回答问题：

(1)家庭自制葡萄酒所用菌种常来自于________，图中的候选菌A、B经筛选和纯化分别获取________和________菌种。

(2)图中所用的培养基都需要在接种前用________法进行灭菌。

(3)在纯化菌种A时接种了5个平板，每个平板均接种了0.1 mL样品并培养。其中乙平板的菌落分布如图，纯化菌种A的接种方法是______________，涂布器的灭菌方法是      。其余的甲、丙、丁、戊平板操作正常，其菌落数分别是210、230、470、190，则样品中菌种A的数量为________个/mL。

(4)果酒发酵罐与果醋发酵罐需要控制的温度条件差异是________________。

人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史，源远流长。如图为酵母菌、醋酸菌的实验室培养和纯化的部分操作步骤。请回答下列问题：

（1）利用酵母菌制作果酒的原理是_____________________。

（2）①是制备培养基时__________中的主要操作，该操作中需要将培养基冷却到________℃左右时进行。②是冷却接种环，此步骤应在__________进行。

（3）步骤④使用的接种方法是___________。纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产，则可以采用________的方法保存菌种，这种方法保存的时间不长，原因是_______________。

（4）利用步骤④纯化细菌时，接种环最少灼烧________次，最后一区域的菌种来源是_________________。