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            • 1. 如图是利用奶牛乳汁生产人血清白蛋白的图解,根据下图回答:

              (1)在形成图中③的过程中,我们称②为 ______ ,获取②的途径主要有 ______ .
              (2)人血清白蛋白的生产说明该工程突破了自然界物种之间的 ______ ,在基因表达载体中,人的血清白蛋白基因前端必须要有 ______ .
              (3)对①处理后的分散细胞进行培养,通常要在培养液中添加一定量的 ______ ,此外应定期 ______ ,以便保证被培养的细胞处于 ______ 的环境中.
            • 2. (12分)苦荞是一种有名的经济植物,其含有的黄酮类化合物具有降血糖、血脂等功效。CHS是合成黄酮类化合物的关键酶。有人把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中,培育高产黄酮苦荞品系。按图示回答:

              (1)过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒的酶称为               。这种酶主要有两类,一类是从T4噬菌体中分离得到的,另一类是从大肠杆菌中分离得到的。这两类酶都能恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的                 键。

              (2)图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞的方法称为                   ,除此外还可以利用的方法有                    。对过程②操作前,需先用Ca2+处理农杆菌,使其成为             细胞。

              (3)检测转基因苦荞培育是否成功,可以比较转基因苦荞与普通苦荞的

                               含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定。

            • 3. 家蚕细胞具有高效表达外源基因能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ ______ 之间.
              (3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞.改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ ______
              (4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ 增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
            • 4.

              斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具体纯合突变基因(dd)的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白(G)基因整合到斑马鱼17号染色体上,带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g。用个体M和N进行如下杂交实验:

              (1)在上述转基因实验中,将G基因与质粒重组,需要的两类酶是______和______。将重组质粒显微注射到斑马鱼__________中,整合到染色体上的G基因______________后,使胚胎发出绿色荧光。

              (2)根据上述杂交实验推测

              ①亲代M的基因型是____________(选填选项前的符号)

              a.DDgg               b.Ddgg
              ②子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括________(选填选项前的符号)。
              a.DDGG     b.DDGg     c.DdGG     d.DdGg

              (3)杂交后,出现红·绿荧光(既有红色又有绿色荧光)胚胎的原因是亲代__________(填“M”或“N”)的初级精(卵)母细胞在减数分裂过程中,同源染色体的__________发生了交换,导致染色体上的基因重组。通过记录子代中红·绿荧光胚胎数量与胚胎总数,可计算得到该亲本产生的重组配子占其全部配子的比例,算式为______________________。

            • 5.

              科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图。

              请回答:

              (1)步骤①中,卵母细胞应培养到    期。

              (2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其    分离出ES细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性,在形态上,表现为    ;在功能上,具有    

              (3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的基因表达载体。基因表达载体的组成除了目的基因外,还必须有    等。由于DNA复制时,子链只能由5′向3′方向延伸,故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取     作为引物。用下图所示的质粒作运载体时,对干扰素基因片段和质粒进行酶切,可选用限制酶的组合为       

                 

            • 6. 基因打靶是通过外源DNA与染色体DNA同源序列之间的重组来改造基因组特定位点,从而改变生物遗传特性的方法。下图是利用该技术将小鼠的胰岛素基因(靶基因)置换成人胰岛素基因的过程示意图,其中neor是新霉素抗性基因;HSV-tk基因的表达可以使无毒的丙氧鸟苷代谢为毒性物质,导致细胞死亡。请回答下列问题:


              (1)打靶载体中含有的目的基因是     ,需将该目的基因和与细胞内靶基因同源的DNA片段都重组到质粒上,整合时用到的酶有      

              (2)图中的同源重组位点是指打靶载体和小鼠基因组DNA中具有     的DNA片段。

              (3)将打靶载体线性化是选择的限制性核酸内切酶的识别序列不能位于    等中。线性化的打靶载体可采用    法导入小鼠细胞。将小鼠细胞培养在含     的培养液中,可以成功筛选出打靶成功的小鼠细胞,经细胞培养后可以获得大量的具有目的基因的细胞。

              (4)可以通过动物细胞克隆技术获得含人胰岛素基因的小鼠,其过程是将打靶成功的小鼠细胞的细胞核移植到     中,培养到     期移植到代孕母鼠子宫内进行发育。

            • 7.
              家蚕细胞具有高效表达外源基因能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
              (1)进行转基因操作前,需用 ______ 酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 ______ 和 ______ 之间.
              (3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞.改PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、 ______ 和 ______ .
              (4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以 ______ 增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
            • 8.

              (1)因为_________________________,所以说DNA是主要的遗传物质。

                  (2)DNA复制的方式被称为半保留复制,是因为新合成的每个DNA中,都_________

              _______________________。

                  (3)皱粒豌豆与圆粒豌豆的区别在于是否能够合成正常的______________。

                  (4)通过______________________________等手段,对遗传病进行监测和预防,在一定程度上能够有效预防遗传病的产生和发展。

                  (5)分别被称为“基因剪刀”和“基因针线”的是_____________________________。

            • 9. (6分)酵母菌的维生素、蛋白质含量高,可生产食品和药品等。科学家将大麦细胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中,获得的啤酒酵母菌种可产生LTP1蛋白,并酿出泡沫丰富的啤酒。基本的操作过程如下:

              (1)该技术定向改变了酵母菌的性状,这在可遗传变异的来源中属于______。

              (2)从大麦细胞中可直接分离获得LTP1基因,还可采用__________方法获得目的基因。本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内,所用的运载体是_________。

               (3)要使运载体与LTP1基因连接,首先要进行切割。假如运载体被切割后,得到的分子末端序列为  则能与该运载体连接的LTP1基因分子末端是_______。

              (4)切割完成后,将运载体与LTP1基因连接,连接后得到的DNA分子称为______。

              (5)此操作中可以用分别含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选,则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是___________。

            • 10. (生物一现代生物科技专题)
              人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体.已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程之一如图:
              请回答:
              (1)过程①代表的是 ______
              (2)过程②构建A基因表达载体时,必须使用 ______ ______ 两种工具酶.
              (3)过程③采用的实验技术是 ______ ,获得的X是 ______
              (4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的 ______ 所制备的疫苗.对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行 ______ 比较;或用图中的 ______ 进行特异性结合检测.
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