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            • 1．
              类胡萝卜素是一种常用的食品色素，并常用于临床治疗夜盲症等疾病．类胡萝卜素的主要来源是化学合成或从植物中提取，成本较高．科研人员尝试从光合细菌中提取类胡萝卜素，流程如图：

              （1）将少量污泥样品接入液体培养基中，培养基中加入铵盐和谷氨酸钠为光合细菌的生长提供 ______ ，培养基中没有加入有机碳，从功能上看这种培养基属于 ______ 培养基．
              （2）②将样品涂布到固体培养基之前要进行梯度稀释，为了防止混淆，应该在培养皿的 ______ 部位做好标记．从固体平板中挑选紫色非硫细菌（某光合细菌）的菌落，萃取效率主要取决于萃取剂的性质．通过③接种到新鲜培养基中继续培养，②、③过程需要重复几次，目的是 ______ ．
              （3）从浸提离心干燥后的菌体中提取胡萝卜素常用萃取法，萃取剂应该具有的特点是 ______ ，萃取液的浓缩可直接使用 ______ 装置．
              （4）鉴定所提取的胡萝卜素样品常用的方法是 ______ ，鉴定过程中需用 ______ 作为对照．
              难度：较易
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            • 2．
              某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后，对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌，当培养基温度下降到50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，待培养基冷却至室温，按如表处理：
              组别 处理
              A组 打开培养皿盖，距地面0.3米处暴露15分钟
              B组 打开培养皿盖，距地面0.6米处暴露15分钟
              C组 打开培养皿盖，距地面0.9米处暴露15分钟
              D组 打开培养皿盖，距地面1.2米处暴露15分钟
              E组 不打开培养皿盖
              将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2～3天，观察每个培养皿中的菌落特征和数目．回答下列问题：
              （1）上述实验的实验目的是 ______ ．若E组的培养基表面有菌落生长，说明了 ______ ．
              （2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供 ______ 和 ______ ．“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了 ______ ．
              （3）实验过程特别强调温度控制，请简要说明下列温控措施的目的：
              ①“待培养基冷却至室温”的目的有 ______ ．
              ②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是 ______ ．
              （4）培养微生物时将培养皿倒置的目的是 ______ ．实验结束后，对使用过的培养基应进行 ______ 处理．
              难度：较易
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            • 3．
              纤维素是地球上最丰富的可再生资源，而耐高温纤维素酶因其耐热性在生产中具有实用意义．研究者从高温堆肥中筛得一株产耐66℃高温纤维素酶的芽孢杆菌．请回答问题：
              MgSO4 0.03%
              KH2PO4 0.05%
              FeSO4 0.01%
              MnSO4 0.01%
              CaCl2 0.02%
              羧甲基纤维素钠 0.05%
              蛋白胨 0.2%
              琼脂 1.5%
              （1）表为初筛培养基配方．按功能划分，此培养基为 ______ 培养基．
              （2）可采用 ______ 法将菌种接种在培养基上以获得单菌落，将单菌落接种在含刚果红的鉴别培养基上培养，测量 ______ 的大小，进行初筛．
              （3）将初筛得到的菌种再接种到液体培养基中，并置于 ______ 条件下复筛培养，最终得到目的菌．对带有菌体的发酵液及其离心后的上清液进行测定，发现有活性的纤维素酶含量相近，可以推断该芽孢杆菌产生的纤维素酶在 ______ 发挥作用，分离提纯这类酶不需要破碎细胞．
              （4）在酒精发酵业中，原料需要在60℃下处理，而原料中常含有1%～3%的纤维素，所以需要向原料中添加适量的耐高温纤维素酶，其意义是 ______ ．
              难度：较易
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            • 4．
              某探究小组尝试从学校饭堂空气中分离筛选出产淀粉酶的菌株．他们先用空气沉降法分离出菌株，再用两种培养基（配方见表）分别进行活化和筛选，请回答：
              A培养基配方                          
              成分 含量
              牛肉膏粉 3g
              蛋白胨 10g
              NaCl 5g
              琼脂 15g
              B培养基配方
              成分 含量
              可溶性淀粉 2g
              蛋白胨 1g
              酵母膏 1g
              琼脂 20g
              （1）蛋白胨提供的主要营养是 ______ 和维生素．据配方可知， ______  （填“A”或“B”）培养基更适合用于筛选产淀粉酶菌株．
              （2）培养基需通过 ______ 法灭菌．若空白对照培养基中 ______ ，说明灭菌合格．
              （3）采用 ______ 法将经活化的菌株再接种到筛选培养基上，操作时，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是 ______ ．该操作应在 ______ 附近进行．
              （4）待菌株形成明显菌落后，需测定菌株产淀粉酶活性，在平板上滴加卢革氏碘液直至铺满整个平板，若观察到 ______ ，则说明该菌落内的菌株产淀粉酶活性最高．
              难度：较易
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            • 5．
              硅酸盐细菌可以将土壤中不溶性的含钾矿物（如长石、云母）以及磷灰石等分解转化，释放出水溶性的钾、磷，将土壤中的无效磷钾转化为速效养分．现代工业可将硅酸盐细菌制成细菌肥料，达到增产目的．硅酸盐细菌在无氮培养基、钾细菌培养基以及硅酸盐细菌培养基上均能生长，如表1是硅酸盐细菌培养基的一种配方．
              回答下列问题：
                表1：
              硅酸盐细菌培养基的一种配方
               葡萄糖 10.0 g
               MgSO4•7H2O  0.2g
               CaCO3  0.2g
              K2HPO4  2.0g
                NaCI  0.2g
               K2SO4  0.2g
               琼脂  20.0g
               将上述物质溶解后，用蒸馏水定溶至1000mL
              （1）根据硅酸盐细菌培养基的配方可知，从功能上看，该培养基属于 ______ 培养基，原因是 ______ ．
              （2）培养硅酸盐细菌时必须进行无菌操作．培养基的灭菌一般采用 ______ 法．配制培养基时，灭菌与调节pH的先后顺序是 ______ ．
              表2：
              培养基种类 各稀释度对应的平均菌落数 菌落直径
              （mm） 
               103 104  103 104  
              无氮培养基  32  3 2  0  1.0～2.0 
              钾细菌培养基  36  6  4  0.6  多数小于1.5
              硅酸盐细菌培养基  50  8  5  1.2 多数大于2.0 
              （3）表2的名称是 ______ ，在进行接种时，所有的操作都应在 ______ 附近进行．在采用平板划线法分离硅酸盐细菌时，第二次及之后的划线，总是在上一次划线末端开始，这样做的目的是 ______ ．
              （4）在进行表2所示实验的同时也设置了空白对照，空白对照的培养基中 ______ ，说明培养基灭菌合格；根据表2数据可以得出，用 ______ 培养基筛选硅酸盐细菌的效果最好．
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            • 6．
              以下是一种分离土壤中纤维素分解菌的培养基配方：纤维素粉5g、NaNO3 1g、Na2HPO4•7H2O 1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4．7H2O0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g（蒸馏水定容到1000mL）．请回答：
              （1）培养基的种类很多，但培养基中一般都含有水、碳源、 ______ 和无机盐，该培养基中 ______ 是最主要的碳源，按培养基的功能划分属于 ______ 培养基，培养基配制完成后，一般还要调节PH值，并对培养基进行 ______ 处理．
              （2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是 ______  和 ______ ．
              （3）为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入 ______ 染液，将筛选获得的菌液稀释后用 ______ 法接种到鉴别培养基上，假设某同学发现培养基上此种细菌数目过多连成一片，可能的原因是 ______ ．
              （4）如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是 ______ ，PH值等无关变量保持相同且适宜．
              难度：较易
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            • 7．
              饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用．若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等．下图是学生们从作物根部土壤中分离产植酸酶菌株的过程．

              （1）分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基．配制培养基时，在各成分都溶化后和倒平板前，要进行的是 ______ 、分装和灭菌．对培养基进行灭菌的常用方法是 ______ ．倒平板时，一般需冷却至50℃左右，在酒精灯火焰附近操作．依物理性质看，该培养基属于 ______ 培养基．依功能看，该培养基属于 ______ 培养基．
              （2）接种以前进行的一系列稀释操作，目的是在培养基表面形成 ______ ，这种接种方法是 ______ ．根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数．如果图示过程接种的培养基上平均有40个菌落，则1g土壤中大致的活菌数量是 ______ 个．该方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目 ______ ．
              （3）由于植酸钙的不溶解性，可使培养基形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．实验结果显示A～E五种菌株中， ______ 是产植酸酶的理想菌株．
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            • 8．
              如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，请据图回答：

              （1）无菌技术是微生物培养和鉴别的关键，在对培养基进行灭菌时，应采用的方法是 ______ ．为检测培养基灭菌是否彻底，应进行的操作是 ______ ．
              （2）图中选择培养基应以 ______ 作为唯一氮源；鉴别培养基还需添加 ______ 作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成 ______ 色．
              （3）若要估算试管中菌种的数量，除了采用显微镜直接计数的方法外，还可采用 ______ 法进行计数，该方法测得的值与实际值相比一般会 ______ （填“偏大”、“偏小”或“相等”），其原因是 ______ ．
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            • 9． 磷是植物生长的重要营养元素之一，我国74%的耕地土壤中缺磷，而施入土壤中的磷肥只有5%-25%的利用率，大部分磷都成了不能吸收的难溶性磷酸盐．为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，以便将其添加到有机肥中，改善植物磷元素供应．科研人员进行如下实验：
              实验原理：固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈（如图），透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小．
              实验步骤：
              步骤1  取某地区土样 5g 制得土壤溶液后稀释，取稀释液 lmL 接种到基础培养基 A 上，在适宜温度下培养72h．
              步骤2  在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种，培养3-4d后观察菌落特征和透明圈的大小，初步筛选出三种优良解磷菌株（如右表）．
              请分析回答下列问题：
              （1）土壤中的磷以______形式被植物细胞吸收，吸收后可用于合成______（填出 3 种含磷的有机物）．
              （2）实验中所用的固体培养基往往是在液体培养基中加人凝固剂______制备的，培养基上出现的单一菌落可以看做一个______（填“种群”、“群落”、“生态系统”）．
              （3）为了筛选出所需菌株，培养基中唯一的磷源应该是______，步骤 1 中接种方法是______，步骤 2 中接种环的灭菌方法是______．
              （4）根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是______．为了保持所得菌种的纯净，需要进行菌种的保藏．临时保藏时，要将菌种接种到试管的______格养基上，长成菌落后放人 4℃的冰箱中；长期保存时可以采用______的方法．
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            • 10． 尿素是一种重要的农业肥料，但若不是经细胞的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示．
              （1）在培养基加入尿素的目的是______．
              （2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的______和______．为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，应采用的操作方法是______．
              （3）图中将细菌（非硝化细菌）转到固体培养基上时，应采用______法接种，获得单个菌落，初步筛选选出来的菌落．初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在此培养基中接种并培养初步筛选的菌种，若pH______（降低/不变/升高）．说明该菌种能够分解尿素．
              （4）在进行分离分解尿素细菌的实验中，配制培养基的操作步骤是______
              a．调节pH          b．计算     c．溶化     d．称量         e．灭菌
              A．a→b→c→d→e                B．c→b→d→c→a
              C．b→d→c→a→e                D．b→d→c→e→a
              （5）A同学从培养基筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．若A同学的实验结果的原因是培养基被污染，为了确定该原因，操作思路是______．
              （6）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是______（填序号），实验结束后，使用过的培养基应该进行______处理后，才能倒掉．
              ①培养细菌用的培养基与培养皿     ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管   ③实验步骤作者的双手．
              难度：较易
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