“创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识，通过实验证明痰液中含有细菌，来倡导同学们不要随地吐痰，为“创卫”添一份力。请回答下列问题：

(1)欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl________、H₂O等；该培养基中微生物所需的氮源来自________，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是_______________________________________________；培养基灭菌后，需要冷却到________ ℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是___________________________________________。

(2)为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是____________________________________________________________。若在某次调查中，某一实验组平板上的平均菌落数为39个，而空白对照组的平板上出现了9个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

(3)某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是：____________________________________。

(1)与大肠杆菌相比，嗜热菌DNA碱基组成的特点是                          。

(2)Ⅰ号、Ⅱ号培养基的配制主要包括如下步骤:a.溶化，b.调pH，c.灭菌，d.称量。正确的操作步骤顺序是                 。溶化过程中当琼脂完全熔化后，还需用蒸馏水                 。

(3)将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内，加盖并将排气管插入内层灭菌桶内的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓时，应注意                ，以免漏气。

(4)1号培养基中以淀粉为唯一碳源，从功能上讲该培养基属于                 。待菌落长出后，应选择                 的菌落接种到Ⅱ号培养基，第二次及以后的划线，总是从                 开始，实验中过程③的目的是                 。

(5)若要保证高温淀粉酶的活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则最好选择图2中的                 固定化工艺(填图中字母）。

下面的图甲表示硝化细菌、酵母菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，图乙表示这三种菌的增殖速度与氧气浓度之间的关系，请据图回答：

(1)图乙中a、b、c三条曲线依次表示图甲中__________号试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度。

(2)研究发现，青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用。如果培养基中混杂了这三类微生物，请设计实验，利用改变培养基成分等培养条件，将酵母菌和硝化细菌分离出来。

①主要步骤：

A．分别配制不含__________的培养基(A)和加入________的培养基(B)，分别灭菌。

B．分别接种混合液放在适宜条件下培养。

C．观察结果。

②结果：在A培养基上生存的是____________，在B培养基上生存的是____________。

(3)微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________________。

在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。

(1) 下图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

 (2) 分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_______成分，并加入______物质，以补充______源。若用于培养纤维素分解菌，应加入________物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_______染料，含纤维素分解菌将形成__________圈。

石油是人类重要的化工原料之一，其在给人类生产生活带来便利的同时也对陆地和海洋造成污染，下图是科研工作者分离能分解石油污染物的假单孢杆菌的过程。请根据流程图回答下列问题：

土壤取样→A→梯度稀释→涂布到培养基上→筛选目的菌株（假单孢杆菌）

（1）A过程为___________，目的是增加假单孢杆菌的浓度，该培养基中应当以___________为唯一碳源。该实验过程中需要设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显___________（填“多于”或“少于”）选择培养基上的菌落数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

（2）实验中需要用___________对菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同浓度的菌液分别滴加到固体培养基的表面，用___________（器具）涂布均匀并进行培养，以便获得单个菌落。

（3）若实验中用10³倍的0.1mL的稀释液分别涂布三个平板，培养后分别形成了98、100和102个菌落，则每毫升原样液中含有假单胞杆菌___________个，实际值一般要比该测量值偏大的原因是___________。

①加抗生素   ②不加抗生素   ③加氮素   ④不加氮素   ⑤加葡萄糖   ⑥不加葡萄糖  ⑦37℃恒温箱培养   ⑧28 ℃--30℃温度下培养

（每空1分，共7分）

传统发酵技术包括果酒、腐乳、泡菜的制作等，丰富了餐饮生活，根据下列要求回答问题：

（1）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出________→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。把腐乳的制作过程看作是微生物的培养过程，则从物理性质看，制作腐乳的培养基属于__________。

（2）在制作果酒实验中，某同学为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，要取样统计分析，并测定pH。判断取样先后顺序的主要依据是_____________。

（3）制作泡菜时，若菜坛有裂缝，即使其他操作正确规范，实验也会失败。说明该种微生物是________________。

（4）传统发酵技术中，都没有接种菌种，也没有严格的灭菌，但都可以得到相应的发酵产物。其菌种来源于____________________；
（5）某同学制作果酒时，在发酵后期向发酵液中通入空气，并将发酵液置于适宜温度的环境中，结果发现发酵液中有醋酸菌出现，这类微生物在糖类缺乏时可以使______转化为_______，后者再转化为醋酸。

如图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题：

（1）步骤①前的一步操作是________。，该操作用到的主要仪器是________。

（2）实验步骤②的目的是________，步骤②、③之间还需要将接种环________。

（3）指出步骤④操作不当的地方________。

（4）分别用三个平板培养三种细菌（E.coli、S.albus、B.subtilis），然后在培养基上打出直径为3mm的孔，并在孔中加入一定浓度的甲抗生素，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰区，此乃抑制细菌生长所致。测量清晰区的直径（如图所示），数据如下表。

①s.albus和B.subtilis对甲抗生素敏感的区别是________。

②有人感染E.eoli而患病，医生使用20μg／mL甲抗生素给予治疗，试用生物进化理论解释这种不明智的做法________。

③采养殖池中的水样1mL稀释100倍，吸取稀释后的水样1mL，接种于E.coli选择性培养基上培养。一段时间后观察菌落并计数，重复三次实验结果如图。该养殖池每mL水含有E.coli________个。