下图表示微生物培养与利用的相关实验技术，回答下列问题：

 (1)在培养基的制备过程中，A表示____________，B表示灭菌，对培养基灭菌常用的方法是_________。

（2）D是微生物接种最常用的方法之一，它包括___________和_____________两步操作。

（3）在筛选土壤中分解尿素的细菌时，所用培养基以尿素作为_______________；在统计菌落数目时，一般选择菌落数在 ___________________的平板进行计数。若要对分离的菌种作进一步的鉴定，可在选择培养基中加入___________________指示剂，若指示剂变__________，则可初步鉴定该种细菌能够合成___________，分解尿素。

土壤是“微生物的天然培养基”，下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请根据下图回答相关问题：

(1)能分解尿素的细菌代谢类型为_____________，取样时一般_____（能/不能）从土壤表层取土样。
(2)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用__________________________________的____体培养基进行分离，并加入________指示剂进行鉴别。为了提高实验结果的可信度，还需设置对照组。若要判断选择培养基是否起到了选择作用，对照组的设置是__________________________________；若要判断选择培养基是否被杂菌污染，对照组的设置是__________________________________。

(3)若取土样5g，应加入___ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。随后将10³-10⁷倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培养基上，用________将菌液铺开。这种接种方法称为_____________。
(4)将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h～48h，观察并统计呈_____色的菌落数，结果如下表，其中________倍的稀释比较合适。

如下图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题：

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有无机盐、水、________四类。①是制备培养基时________中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过灼烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基，实验操作中的灭菌方法还有_________。

（2）该纯化醋酸菌的接种方法是______________；完成步骤④的操作，接种共需要________次灼烧处理。如果需要统计醋酸菌液中活菌的数目可以采用______________法进行接种；培养过程中，常选择菌落数在__________的平板统计计数。

（3）食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成__________酶的微生物能够降解纤维素，该酶是一种复合酶，它至少包括__________________。为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入__________染料，形成________色复合物，若产生__________，则证明有纤维素分解菌存在。

（一）酵母菌是日常生产和生活中应用极其广泛的一种微生物。下图是有关酵母菌的实验操作。请据图回答：

(1)实验中试管用滤膜（封口膜）封住，其目的是___________________________，A和C过程所采用的接种方法分别是______________和______________。

(2)为了扩增酵母菌，可将经D过程接种后的三角瓶置于______培养一段时间，若要测定三角瓶中酵母菌的细胞数，可借助显微镜和血细胞计数板进行计数，下列操作不正确的是____（A.压在方格线上的细胞只计左线和上线上的酵母菌数  B.用滴管取1滴培养液到血细胞计数板的方格区，盖上盖玻片进行计数 

C.如果酵母菌有芽体，因为没有分离成两个子体，要以一个计数 D.计数方格内酵母菌总数应不少于300个）。

(3)G过程利用酵母菌进行果酒制作，为适当提高果酒的生产速率，进气口应____________，制作好的果酒，还可继续生产果醋，用果酒制作果醋的原理是__________________________（写化学反应式）。

（二）玉米自交系（遗传稳定的育种材料）A具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需进行一系列试验。部分试验如图所示。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建重组DNA分子需用2种限制性核酸内切酶，选择的原则是____。

①Ti质粒内，每种限制性核酸内切酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个粘性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个粘性末端序列相同

A．①③         B．①④        C．②③       D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是__________，自交系_____的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体，用愈伤组织做受体细胞是因为其细胞表达___________的能力强，图示目的基因导入受体细胞的方法是_____________。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K处理后出现蓝色的愈伤组织可能是无农杆菌附着的转化愈伤组织或________________________。

在生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。回答下列与微生物的培养与利用有关的问题

（1）下图是利用______________法将微生物接种到固体培养基上，把混合的菌种逐步稀释分散获得______________菌落。接种后培养基应______________放在37℃恒温培养箱中进行培养。

分析下面培养基的配方：NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于筛选尿素分解菌，则应除去上述培养基成分中的________，并加入______________和________物质，以补充其生活所需的碳源和氮源。培养基中加入酚红作指示剂的原因是尿素分解菌能合成________将尿素分解为氨，使培养基pH发生改变，酚红由黄变红，使菌落周围呈现红色。

（3）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为10⁶的培养基中，取0.2ml稀释液涂布，得到以下统计结果：

甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是260；

乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和246，取平均值232；

丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；

在三位同学的统计中，____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是______________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量______________。

塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，塑料袋的自然分解需要20-1000年不等．2008年7月3日加拿大媒体报道：16岁的高中生丹尼尔-伯德从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月，而且分解产物只有水和二氧化碳．伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”．以下是伯德寻找到聚乙烯降解菌的大致过程．请回答：

（3）对培养基灭菌的常用方法是________________。接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是__________________________。

（4）I号培养基属于______培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”．如图采用的接种方法为______．

（5）使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多，若对目的菌进一步培养，则其增长呈____型曲线增长。Ⅱ号培养基中必须包含水、无机盐、______等基本营养成分．从物理性质来看，Ⅱ号培养基中________（填“不能”或“能”）添加琼脂．假设该同学发现培养基上细菌数目过多连成一片，说出一种可能的原因并提出合理的处理措施。原因：__________________________；

(2)在制备杨梅醋过程中，乙罐内填充的木材刨花应先经__________处理，然后加入含___________菌的培养液，使该菌附着在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵，请写出乙罐中生产杨梅醋的化学反应方程式_______________________。

(3)为了提高杨梅酒和杨梅醋的品质，更好地抑制其他微生物的生长，需向相应的发酵罐中加入优良的菌种。从野生菌群中分离纯化优良菌种时，最常用的接种方法有____________和____________。

如表所示为某微生物培养基的配方：

回答下列有关微生物培养的问题。

某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。

（1）培养基中加入化合物A的目的是________，这种培养基属于________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________，同时，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________。

（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________。

（4）转为固体培养基培养时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（5）在培养基的配制过程中，操作方法包括以下步骤，其正确顺序为________。

①溶解 ②调pH值 ③定容 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量 ⑦灭菌

A.①②⑥⑤⑦③④                 B.⑥①③②⑤④⑦

C.⑥①②⑤④⑦③                D.①②⑤④⑥⑦③

（6）实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉，这样处理的目的是________。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。