【生物——选修1：生物技术实践】

   日常生活中人们常将吃剩的食物盖上保鲜膜后放入冰箱储藏以防止污染。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的食物中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的食物制成液体，研究其中细菌的种类和数量。

（1）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是________。常用的对培养基进行灭菌的方法是________。对无菌操作间的灭菌方法一般是________。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了鉴定食物液体中微生物的种类并测定数量，应采用________法接种。用这种方法统计的菌种数往往比活菌的实际数目低，其原因是________。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明食物液体中有________（填“一种”或“多种”）细菌。菌落总数越多，说明食物被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。请回答下列问题：

（1）该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用____法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有________（填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

【生物——选修1 生物技术实践】

胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用       或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环，其目的是              。

（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供       。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和            以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用           方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行         ，以除去固体不溶物。

（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，常用           作为层析液。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为             。

[生物——选修1：生物技术实践]

胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，可以作为食用色素。最近还发现天然胡萝卜素具有使癌变细胞恢复为正常细胞的作用。请回答下列问题；

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，在温度及气体环境分别为________条件下最适合其生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，可选用________法接种。接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的是________。

（4）酵母菌菌体裂解后经离心、萃取、浓缩可获得胡萝卜素，可通过________比较不同种类酵母菌的产胡萝卜素能力。所获得胡萝卜素纯度可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照为________。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

[生物——选修1：生物技术实践]

生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如表所示，实验步骤如图所示。请分析回答问题：

（2）实验需要振荡培养，原因是                  。转为固体培养时，常采用              的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体．其中需要灭菌是    填序号）．

（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．甲同学实验结果差异的原因可能有       （填序号）①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照

（5）以尿素为唯一氮源的培养基培养“目的菌”后，加入指示剂后变红色，说明“目的菌”能分解尿素．理由是                                       。

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、 灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和_ _____。除此之外，培养基还必 须含有的基本成分是_____和______。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养 的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照 进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。 一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐__细菌，这种培养基（按功能分）被称为_        。

[生物——选修1：生物技术实践]

在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。请回答： 

(1)可以通过提高培养基中____的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为____培养基。

(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是_____________。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是______________。 

(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是_________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿______培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为_______。 

(4)根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是__________________________。

某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答：

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选______________，这种培养基从用途上分属于______________培养基。培养基灭菌的常用方法是利用高温可以使微生物的________________________等物质发生变性。

(2)化合物A为“目的菌”生长提供_________。培养过程中震荡的目的是_____________。

(3)转为固体培养时，常采用_____________________的方法接种，以便于分离和计数。

(4)若研究“目的菌”的群体生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用__________的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm³)有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为B，菌液稀释倍数为C，那么原菌液的菌群密度为_____个/mL。

(5)实验结束时，使用过的培养基应该进行______处理后，才能倒掉。

(6)为研究化合物A初始浓度对菌株降解能力的影响，做了有关实验并得到下图。结果由图可知，若要得到较好的降解效果，化合物A的初始浓度应该为____________________。

(A、小于1600 mg/L B、小于1200 mg/L C、1200 mg/L与1600 mg/L之间)