【生物—选修1 生物技术实践专题】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配制了下列培养基，在适宜条件下培养）：

（1）为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除________并加入高浓度的________。

（2）步骤Ⅲ应挑取图A中________处的菌落，本步骤的目的是________。

（4）图B是该蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60－70℃保温一定时间的，其作用是________。

萌发的小麦种子中主要有α-淀粉酶(在pH3.6以下迅速失活，但耐热)和β-淀粉酶(不耐热，70℃条件下15min后就失活，但耐酸)。请根据以下实验过程回答相关问题。

[实验目的]测定40℃条件下α-淀粉酶的催化效率。

[实验材料]萌发3天的小麦种子。

[主要器材]麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅、试管等。

[实验步骤]

步骤一：制备不同浓度麦芽糖溶液，与2ml斐林试剂生成标准颜色。取7支洁净试管编号，按下表中所示加入试剂，再将试管置于60℃水浴中加热2min，取出后按编号排好。

表中X、Y、Z代表的数值依次是__________________。

步骤二：以萌发的小麦种子制取淀粉酶溶液，将装有淀粉酶溶液的试管置于______________，以获得α－淀粉酶溶液。

步骤三：取A、B、C、D四组试管分别作以下处理：

步骤四：将A1和B1试管中溶液加入到E1试管中，A2和B2溶液加入到E2试管中，A3和B3溶液加入到E3试管中，C、D试管中的溶液均加入到F试管中，立即将E1、E2、E3、F试管在40℃水浴锅中保温一段时间。然后分别加入__________，并经过____________后，观察颜色变化。

[结果分析]用比色法获得试管中麦芽糖浓度：将E1、E2、E3试管中的颜色与______试管进行比较得出结果；计算出α-淀粉酶催化效率的________。

[讨论] ① 实验中F试管所起的具体作用是排除__________对实验结果的干扰，从而对结果进行校正。

② 若要测定β－淀粉酶的活性，则需要对步骤二进行改变，具体的操作是将淀粉酶溶液____________处理一段时间，从而获得β-淀粉酶。

【生物—选修1 生物技术实践专题】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配制了下列培养基，在适宜条件下培养）：

（1）为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除________并加入高浓度的________。

（2）步骤Ⅲ应挑取图A中________处的菌落，本步骤的目的是________。

（3）图B是该蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60－70℃保温一定时间的，其作用是________。

萌发的小麦种子中的淀粉酶主要有α﹣淀粉酶（在pH3.6以下迅速失活，但耐热）、β﹣淀粉酶（不耐热，70°C条件下15min后就失活，但耐酸）。以下是以萌发的小麦种子为原料来测定α﹣淀粉酶催化效率的实验，请回答下列与实验相关的问题。

【实验目的】测定40°C条件下α﹣淀粉酶的催化效率。

【实验材料】萌发3天的小麦种子。

【主要器材】麦芽糖标准溶液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅、试管等。

【实验步骤】

（1）制备不同浓度麦芽糖溶液，与斐林试剂生成标准颜色。取7支洁净试管编号，按下表中所示加入试剂，而后将试管置于60°C水浴中加热2min，取出后按编号排序。

表中Z代表的数值是 。

（2）以萌发的小麦种子制取淀粉酶溶液，将装有淀粉酶溶液的试管置于                ，取出后迅速冷却，得到α﹣淀粉酶溶液。

（3）取A、B、C、D四组试管分别作以下处理：

（4）将A₁和B₁试管中溶液加入到E₁试管中，A₂和B₂溶液加入到E₂试管中，A₃和B₃溶液加入到E₃试管中，C、D试管中的溶液均加入到F试管中，立即将E₁、E₂、E₃、F试管在40°C水浴锅中保温一段时间。然后分别加入2mL斐林试剂，并经过60°C水浴中加热2min后，观察颜色变化。

【结果分析】将E₁、E₂、E₃试管中的颜色与 试管进行比较得出麦芽糖溶液浓度，并计算出α﹣淀粉酶催化效率的平均值。

【讨论】①实验中F试管所起的具体作用是排除        对实验结果的干扰，从而对结果进行校正。②若要测定β﹣淀粉酶的活性，则需要对步骤二进行改变，具体的操作是将淀粉酶溶液 ，从而获得β﹣淀粉酶。

[生物——选修1：生物技术实践]

回答下列有关“生物特定成分提取与分离”的问题：

（1）通常利用DNA与蛋白质等其他成分在不同浓度的________溶液中溶解度不同对DNA粗提取，再利用DNA在酒精溶液中溶解度远远________（填“低于”或“高于”）蛋白质等而对DNA进一步分离。若进一步提取的DNA不是白色丝状，说明________。

（2）玫瑰精油化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，可用________法提取，要提高产品质量，应采取的措施是________。

（3）从分解纤维素细菌中提取出的产物中含有多种蛋白质，纯化得到纤维素酶常用的方法是________。要判断纯化的纤维素酶是否达到要求，常通过________对纤维素酶进行纯度鉴定，对进行完纯度鉴定的纤维素酶要检测________，以便更好地将酶用于生产实践。

乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：

  玉米秸秆糖液酒精

 (1)玉米秸秆经预处理后，应该选用        酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。

 (2)（多选）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？            。

   A．酿制果醋的醋酸菌   B．生长在腐木上的霉菌   C．制作酸奶的乳酸菌   

   D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌                        E．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物

 (3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为         （按功能分），培养基中的碳源为            。

 (4)从生物体提取出的酶首先要检测           ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用固定化酶技术。

(5)发酵阶段需要的菌种是           ，在产生酒精时要控制的必要条件是           。

【加试题】

为研究某生物制剂（W）具有促进细菌B增殖的作用，请根据以下提供的实验材料，以细胞数变化为检测指标，提出实验思路，并预测实验结果。

实验材料：培养瓶若干个、液体培养基、W、细菌B、细细胞计数板、显微镜等。

（要求与说明：不考虑加入W后体积变化等因素；细胞计数的具体操作过程不作要求；培养过程中不更换培养液；培养液成分变化不利于细菌B生长不作要求；实验条件适宜）

请回答：

（1）实验思路：

①取细菌B，经稀释后得到菌液，在显微镜下用         进行计数，并记录。

②取菌液分别接种于以下两组培养瓶中，每组若干瓶。

甲组：液体培养基

乙组：         
③将上述两组样品培养一段时间后，分别取上述两组中的培养瓶内的菌液，在显微镜下用血细胞计数板分别进行计数，并         。
④          。
⑤对实验数据进行          。
（2）预测实验结果（设计一个坐标，用柱形图表示至少3次的检测结果）：

（3）分析与讨论

①培养过程中，细菌B的增长方式为           形增长。
②为提取细菌B内的酶，对该菌进行破碎时，应将其         。

A．置于蒸馏水中           B．用纤维素酶水解

C．置于稀盐酸中           D．冷冻研磨