在盛产柿子的某地，生物小组开展柿子酒、柿子醋生产的相关活动。

（1）土壤中的酵母菌计数：

在秋季的柿子园中，落地的柿子流出果汁的周围土壤中有酵母菌大量生长繁殖。

①用灭过菌的小铁铲、信封取该处土样，并在________旁称取10g土样，加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。而后进行系列稀释操作：吸取锥形瓶中土壤液的上清液________mL，转移至盛有9mL无菌水的大试管中充分摇匀，依次等比稀释，获得稀释至10¹、10²、10³、10⁴倍的土壤液的稀释液。

②为测定土壤中酵母菌的数量，选用第①步中所获得的10²、10³、10⁴倍的土壤液的稀释液，并依次分别吸取0.1mL进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对各稀释度涂布的三个平板进行菌落计数（如下表）。

则每克土壤样品中的酵母菌数量约为________个。要使该实验所得数据可靠，还应该实施的操作是________。

（2）柿子醋生产菌的制备：

   为去掉酵母菌，挑取变酸的柿子酒内的菌膜于________℃进行纯化培养，获得如图所示菌落分布。应从________（填“甲”“乙”或“丙”）区域中挑取部分菌落制玻片观察，选择所需菌种。

（3）柿子酒、柿子醋的制作（发酵装置如下图所示）：

①排气口弯管设置的目的是________。

②可通过装置中的________对发酵情况进行及时监测。此时，若采用血细胞计数板对发酵液的酵母菌观察计数，与（1）中计数方法相比，该计数方法测得的酵母菌数自较________。

③柿子醋可在柿子酒生产的基础上改变________进行生产。

[生物——选修1：生物技术实践]

生活中，部分食品或饮料与微生物的发酵密不可分。回答下列关于微生物的培养及其运用的问题：

（1）不同微生物对营养的需求存在一定差异，但都能归纳为4类营养，即水、________、氮源和________。

（2）为增加分泌高效果胶酶的微生物的浓度，应该用________（填写物理状态）培养基。探究不同微生物分泌的果胶酶的活性实验，所用材料是果汁，那么该实验的自变量是________。

（3）制备果酒时，发酵菌为________，该发酵菌能将葡萄糖转化成酒精和CO₂，如图是某同学设计的发酵装置，该装置的优点有________。

（4）制备果醋时，发酵菌在________（填“有氧、无糖”“无氧、有糖”或“有氧、有糖”）条件下，能将乙醇转化成________，进而转化成乙酸。

【生物——选修1：生物技术实践】

科研人员以秸秆为原料进行酒精的制备，大致流程如图所示。回答下列问题：

（1）对采集的土样进行稀释的目的是         。有时需要在梯度稀释前进行选择培养，其目的是                     。

（2）常用的微生物接种方法有平板划线法和           。用分离得到的纤维素分解菌培养液进行数量测定，在稀释倍数为10⁵对应的培养基中测定平板上菌落数的平均值为26，则每毫升样品中的纤维素分解菌个数是（接种液的体积为0.2mL）        。

（3）经过③的培养，可以得到多种纤维素分解菌，应该在鉴别培养基上选取         的菌落进行扩大培养，从中提取的纤维素酶活性高。

（4）经⑤、⑥步骤后得到的糖液中的糖是             ，⑦过程常用的微生物是           

        ，⑦过程的气体条件是                    。

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

【选修1—生物技术实践】

   在橘子成熟的季节，人们通常用它制作精油、果汁、果酒、果醋，简要流程如下：

（1）图中步骤③利用橘皮提取精油过程中，为了提高出油率需要将橘皮干燥去水后，用________浸泡处理，精油提取时一般采用________（填“蒸馏法”“萃取法”或“压榨法”）。

（2）图中步骤②制备果汁时为了提高橘子出汁率，常用________酶处理果汁，并且采用________技术来提高酶的使用效率、节约生产成本。

（3）图中步骤④酿制果酒过程中，图中步骤④酿制果酒过程中，即使有少量醋酸菌混入也因生活环境不适而不能存活，请说明理由________。

（4）工业上在进行图中步骤⑥酿制果醋时，为了提高果醋产量，需要得到纯化的醋酸菌菌种，在菌种纯化过程中使用________接种方法可以同时进行计数，获得的纯化菌种可以用________的方法进行长期保存。

  (1)当酵母细胞处于5％的蔗糖溶液中时，可构成一个渗透系统。由图中的______(填序号)将该渗透系统分隔为外界溶液(5％的蔗糖溶液)与______(填序号)二个区域。

(2)探究“培养液中酵母菌细胞呼吸方式”的实验中，若在氧气不充足条件下，丙酮酸氧化分解的场所有____         __(填序号)。

(3)家庭“制作葡萄果酒”中，发酵所需的菌种主要来自于__            ____。

(4)制备固定化酵母细胞时，若操作的其他过程符合规范，但观察制作的凝胶珠颜色过浅，最可能的原因是___             ___。

(5)在探究“培养液中酵母菌种群的数量变化”的实验中，某学生的部分实验操作过程如下：A．将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的锥形瓶中，把酵母菌培养液放置在冰箱中培养；B．静置一段时间后，用吸管从锥形瓶中吸取培养液；C．在血球计数板中央滴一滴培养液，盖上盖玻片；D．用滤纸吸除血球计数板边缘多余培养液；E．将血球计数板放在载物台中央，待酵母菌沉降到计数室底部，在显微镜下观察、计数；F．若出现气泡，则应重新滴加样液。该同学实验操作中错误的步骤有____                __(填字母)。

请回答下列现代生物技术中实验操作及目的等有关的问题：

（1）果酒制作过程中，需要先通气后密封，通气的目的是               ；密封的目的是                    。

（2）微生物接种方法很多，常用于统计菌落数目的接种方法是                   ；在

接种操作中，需要在酒精灯的火焰旁进行，其原因是                     。

（3）在植物组织培养过程中，需要对外植体进行         （填“消毒”、“灭菌”），常用体积分数为          的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞。

（4）根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，可用      的方法获得胡萝卜素；提取的胡萝卜素粗产品可通过       方法进行鉴定和分离。

（1）发酵前，需要在樱桃番茄汁中添加适量白砂糖主要目的是      。 主发酵结束后，需将上层酒液转移到另一灭菌容器中进行后发酵，为了防止醋酸菌污染，加入容器中液体的量应      (填“注满”、“2/3”或填“1/3”)，以保证果酒品质。

（2）图1是固定化酵母发酵与游离酵母发酵的对比结果，从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是      ；后期游离酵母发酵速度减慢，除了底物浓度降低外，还可能是因为      。

（3）为探究固定化酵母重复使用的效果，对固定化酵母进行了2次连续的重复发酵实验，图2是实验的结果，试分析在第2次发酵前期，酵母降糖速度明显加快的原因      。实验结果说明固定化细胞具有      的优点。

（4）为分离纯化优良酵母菌品种，采用平板划线法进行如下操作，排序最合理的是      （图可以重复使用）。

①  　　　　　　②　　　　　　　　    ③　　　　　　　　　　④