[生物——选修1：生物技术实践]

谷氨酸钠是味精的主要成分，工业生产中常用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸。下表是生物兴趣小组探究发酵条件对微生物数量和产物生产的影响。

请分析回答下列问题：

（1）谷氨酸棒状杆菌发酵的培养基中主要营养物质有________，该培养基是一种________培养基。

（2）得到谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法是________，用该方法计数过程：取第二组的100倍的稀释液0.1ml滴加到计数板（由25×16＝400个小室组成，容纳液体总体积为0.1mm³）上；记录到5个中方格（80个小室）共有菌体48个，则1ml的第二组发酵液中有菌体________个。用该方法测定的微生物数量大于实际的活菌数，原因是________。

（3）由上述探究可知，要通过发酵得到大量谷氨酸需首先不断向发酵液中通入________，将碳氮比设为________培养一段时间，然后将发酵液中碳氮比改为________继续培养。

［生物——选修1：生物技术实践］据生物技术相关知识回答：

⑴灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括            。以下操作属于灭菌的有        （选代号，不定项），属于消毒的有      （选代号，不定项）。

①用70%的酒精擦拭双手          ②用适宜浓度的氯气处理水源

③将牛奶在70—75℃下煮30分钟  ④将沾有少量酒精的涂布器末端在火焰上引燃

⑤将试管口、接种环通过酒精灯充分燃烧层

⑥将平板倒置（皿盖在下、皿底在上）放入培养箱

⑵若要测定某培养液中的活菌数，既可经染色后在显微镜下用           直接计数，也可不染色直接选用                 法统计活菌数目，一般前者得到的结果           （填“大于”、“等于”、“小于”）后者。

⑶用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是                  。

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

发酵法生产酒精后的废液含有大量有机物，可用于培养、获得白地霉菌体，生产高蛋白饲料。培养、制取白地霉菌体的实验过程示意图：

请据图回答：

（1） 发酵生产酒精的过程中，发酵液会变成酸性，变酸的原因是       。

（2）废液上清液定量分装前，先调节       ，分装后进行高压灭菌处理，请指出下述高压灭菌的不正确的操作，并说明理由       ：

锥形瓶加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，放入高压灭菌锅，锥形瓶应尽量靠紧桶壁，防止滑动；加盖时要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致；加热时，打开排气阀，等冷空气完全排尽后，关上排气阀；到灭菌时间后，打开排气阀排气，让灭菌锅内压力、温度快速下降，当压力表的压力降到零时，旋松螺旋，打开盖子，取出锥形瓶。

（3）图中①过程称为       ，从甲到丁的培养过程是为了       。

（4）为确定菌体产量，图中②操作之前，应先称量滤纸的质量。过滤后需反复烘干称量，直至         。所获菌体干重等于         。

废纸主要成分是木质纤维。左下图是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程。回答下列问题。

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在        的环境中。②中获得的酶是        酶。
（2）若从土壤中分离出上述微生物,应以        为唯一碳源的培养基进行培养,并加入        形成红色复合物进行筛选,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的        。
（3）接种后一个平板经培养后的菌落分布如右上图所示,推测接种时可能的操作失误是        。向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是        。
（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是        。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供        。从玉米胚芽中提取的胚芽油不易挥发,宜选用        法从玉米胚芽中提取。

39、苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。回答下列问题：

（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的     中进行，其产物乙醇与             试剂反应呈现灰绿色，这一反应用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的      中进行。与无氧呼吸相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度      。

（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在         条件下才能完成。

（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度      （填“低于”或“高于”）第二阶段的。

（4）醋酸杆菌属于      核生物，其细胞结构中           （填“含有”或“不含有”）线粒体。

(1)酵母菌在果酒制作过程中发挥重要的作用，发酵装置需短通气→密封→定时排气等流程，其中通气的目的是________，密封的目的是________。

(2)在果酒的基础上制作果醋时，主要的发酵菌是________，该菌在________条件下能将乙醇间接转化成乙酸。

(3)制备果汁类饮料吋，首先要获取能分泌高活性________酶的微生物，分离该微生物时，向固体培养基上接种微生物的常用方法是________，提取该微生物分泌的此酶可采用的方法有________。为提高该复合酶的利用率，一般不选择________法进行固定。

现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免地产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工艺流程，请回答相关问题：

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在 &;         的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以         为碳源，并加入         的培养基上，筛选周围有         的菌落。

（2）在如上所述的筛选过程中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶的浓度相同，则你认为三种酶液的活性               （填“一定相同”、“不一定相同”或“一定不同”），可以通过                                 进行定量测定。

（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是          ，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意                         。

35[生物一现代生物科技专题」(15分)

  回答现代生物科技方面的有关问题:

  (1)单克隆抗体的制备原理和方法如下图所示，这样制得的抗体为鼠源性抗体。

在此过程中，小鼠必须经过          才能获得所需的小鼠细胞，B过程需要用         处理，才能形成杂交瘤细胞。

(2)这种抗体临床应用时，对人是异种抗原，重复注射可使人产生        ，从而减弱或失去疗效，并增加了过敏反应。

(3)在上世纪80年代早期，人们开始利用基因工程制备抗体，以降低鼠源抗体的免疫原性。进行基因改造时，应该把下图的       和        进行连接，以避免如(2)所提到的麻烦;进行改造的过程中要用的工具酶有                 。

(4)将改造好的基因与质粒进行构建，构建好的结构称为             ，扩增构建好的结构采用的方法是                                                                  。

十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今，形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用                     来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括              。

  a温度控制    b溶氧控制    C．pH控制   d酶的控制

(3)苹果酒在         的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                             。

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是            。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于            。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是             。